前基因组HBV RNA是cccDNA的转录产物，不能被NA直接抑制。血清HBV RNA在未治疗和接受NA治疗的患者中均能很好地反映肝内HBV RNA。超过75%的无法检测到HBV DNA的NA抑制患者在治疗2年后仍可检测到可量化的血清HBV RNA。与肝硬化患者相比，肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者的HBV DNA（2.4 log vs. 0.0 log IU/ml）和HBV RNA（3.1 log vs. 2.0 log copies/ml）水平明显较高。这些强调HBV RNA作为病毒标志物的潜在重要性，表明尽管NA完全抑制HBV DNA，但cccDNA转录活性持续存在。
虽然在HBV RNA被推荐为HBV治疗终点的一个组成部分之前，还需要解决一些问题。（首先，商业化的标准化检测必须在诊所可用。其次，必须消除可检测HBV DNA的混杂效应。第三，需要解决无法检测到的HBV RNA是否会在停止治疗后改善疾病缓解的可持续性。）尽管如此，迄今为止发表的数据表明，如果在持续抗病毒治疗中除了HBV DNA外，还完全抑制HBV RNA可以进一步降低HCC的风险，那么在有限的HBV治愈药物可用之前，它可能成为一个新的治疗目标。
随着对HBV RNA的深入研究以及对其临床应用价值的探索，慢乙肝患者中HBV DNA和RNA的关系一直是相关工作者关注的问题。2024年8月发表在国际期刊Liver International上的一篇文章做了相关研究。
该研究应用数字PCR技术对HBV基因组3个区域的HBV RNA和HBV DNA进行定量分析。结果表明，HBV RNA水平与HBV DNA水平密切相关（图1A），慢性感染者血清中HBV RNA水平在Core区高于S区和X区（p<.0001），而HBV DNA水平显示出相反的梯度（p<.001）（图1B）。这与RNA酶H在3′ → 5′方向上降解RNA相吻合，而RNA酶H的降解与DNA合成平行。这也与先前报道的病毒颗粒中存在HBV RNA的3 '截短体一致。总HBV核酸（DNA + RNA）水平未显示任何梯度。
图1 (A)Core区、S区和X区HBV DNA和RNA血清浓度的相关性。(B)针对Core、S和X的数字PCR测量的HBV DNA和RNA水平的逆梯度。DNA和RNA的比率Core/S和S/X以及相应的p值
Core区定量核酸平均80%为DNA，Core区DNA/RNA比值与病毒载量和基因型有关。研究还表明，pgRNA在约75%的病毒颗粒中完全逆转录为负链DNA，而其余25%的病毒颗粒中同时含有RNA和DNA。在接受或未接受抗病毒治疗的患者中观察到RNA水平的差异取决于靶区域。DNA与RNA的比例也取决于靶区域。DNA和RNA水平之间的比值在X区域最大，在S区域居中，在核心区域较低。此外，HBV RNA梯度随着时间的推移保持稳定，并与HBV基因型相关。
随着时间的推移，HBV RNA模式仍然存在（图2）。核心DNA和核心RNA的比值反映了逆转录病毒（DNA）或RNA在核苷酸2367- 2448的核心PCR区域以外进行的病毒颗粒的比例。该比值与血清中HBV DNA水平相关（r= 0.15，p= 0.001），并且D基因型高于非D基因型（p= 0.006）。基因型之间的序列差异可能会影响RNase H的酶活性或改变pgRNA的二级结构，从而间接影响逆转录速率或RNase H活性。
图2 HBV RNA梯度随着时间的推移保持稳定，并与HBV基因型相关
参考文献
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撰写 | 马兴焕
校稿 编审 | 韩剑锋 缪为民 刘娟
编辑 | 谭易秋子
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