近日，圣湘生物暨感染性疾病及肿瘤基因诊断技术国家地方联合工程研究中心参与的“术前/输血前筛查血源性传播疾病风险检测方法比较的多中心研究”临床检测灰区数据经挖掘分析产出核酸检测在免疫灰区的应用成果。相关内容已在2024年9月第十二届中国输血大会进行了大会专题报告，研究论文《HBV、HCV、HIV血筛多中心研究免疫学灰区的核酸检测分析与临床特征研究》近日发表在国内输血领域专业期刊《临床输血与检验》（2024年10月第5期）。
该多中心研究项目由北京医院牵头，北京大学第一医院、复旦大学附属华山医院、哈尔滨医科大学附属第一医院、陕西省人民医院、四川大学华西医院、天津医科大学总医院、郑州大学第一附属医院、中国医学科学院肿瘤医院、中南大学湘雅三医院等医院共同参与。对2021年7月至12月拟进行术前/输血前传染病检测的住院患者样本，采用核酸检测技术与血清学检测技术开展了血源性传播疾病检测的多中心研究，以探索更优的传染病筛查方案。之前的研究成果已发表于《中华检验医学杂志》（2023年1期）。本次数据挖掘分析了其中5家医院的相关检测结果与临床资料，为免疫灰区及核酸检测的应用提供了数据支持。主要内容介绍如下：
研究背景
血源传播疾病最为常见的病原体包括病毒性肝炎（乙肝、丙肝）、艾滋病、梅毒等，可通过输血、骨髓或者器官移植等方式传播，临床诊治中需要开展早期筛查，精准发现感染者进行有效防控。血源性传播病原体的筛查诊断方法目前主要有血清学与核酸检测方法。免疫学检测中经常会碰到处于临界值（Cut-off值）附近的灰区可疑结果难以判定。在灰区范围内需要对结果进行复检验证，以保证检测结果的准确性。对于灰区的设定目前没有统一的技术规定和行业标准要求，各实验室灰区设置差异较大，灰区确认复杂且影响结果判断，对灰区的设置是否必要值得商榷。核酸检测的方法相比血清免疫学方法具有更加灵敏和特异的特点，不受机体免疫状态的限制，有助于提高病原筛查的准确性，且能够对免疫学检测灰区进行更精准的复核验证，避免免疫学方法产生的漏检误检问题。
本研究旨在对HBV、HCV、HIV化学发光免疫检测结果灰区的标本进行核酸检测结果研究，分析核酸检测对灰区样本结果判断的指导性意义及灰区样本的临床特征。
研究背景
● 各家医疗机构化学发光法检测HBV、HCV、HIV的参考值及灰区范围
5家医院均使用同一公司化学发光免疫检测试剂，灰区设定范围不一致，详见下表。5家医院有HBV灰区样本检出，3家医院有HCV灰区样本检出，3家医院既有HBV灰区样本又有HCV灰区样本检出，各家医院均无HIV灰区样本检出。
● HBV、HCV、HIV化学发光灰区的核酸检测结果
5家医院总计5723例样本中共检出HBV免疫灰区样本28例（占比0.49%），HCV灰区样本20例（占比0.35%）。经核酸检测验证，28例HBV灰区样本中，15例HBV样本核酸检测为阳性（占比53.5%），其HBcAb也均为阳性；13例HBV样本核酸检测为阴性（占比46.5%），其中HBcAb阳性4例，HBcAb阴性9例；20例HCV样本核酸检测均为阴性。HIV样本未发现灰区结果。
● HBV化学发光灰区样本的临床特征分析结果
28例HBV免疫灰区样本中男性13例，女性15例，年龄60岁以下18例，60岁以上10例；HBV免疫灰区核酸检测阳性样本中男性10例，女性5例，年龄60岁以下7例，60岁以上8例；阴性样本中男性3例，女性10例，年龄60岁以下11例，60岁以上2例。患者临床诊断结果有10例（35.7%）为肿瘤类疾病，核酸检测阳性样本中肿瘤类疾病4例，核酸检测阴性样本中肿瘤类疾病6例。
● HCV化学发光灰区样本的临床特征分析结果
HCV免疫灰区样本中男性14例，女性6例，年龄60岁以下9例，60岁以上11例。HCV灰区样本患者临床诊断结果8例（40%）为肿瘤类疾病。
研究总结
血筛多中心研究结果显示核酸检测能有效弥补血清学漏检问题，能最大限度地筛查出潜在感染者，实现早发现、早治疗，助力医疗机构对感染性疾病的防控。本次研究对北京医院牵头多家医院参与的血液筛查多中心研究免疫学灰区检测结果的分析表明，核酸检测可发现假阳性样本，能够更精准的给出判定结果。
HBV与HCV化学发光免疫学检测灰区存在假阳性问题，可以通过核酸检测进行阴阳性确认鉴别或核酸检测阴性排除，如果设置灰区将增加假阳性标本数和后续复核检测，且设置灰区还增加了结果判定的复杂性和需要进一步验证，核酸检测可以给出精准快速的结果判定。著者认为免疫法检测时按试剂说明书判断阴阳性即可，无需另外设置灰区。
HBV免疫灰区核酸检测阴性样本女性高于男性，中年人群更多见。建议关注中年、女性的HBV免疫学检测结果的验证。临床科室数据资料分析结果显示，HBV、HCV免疫检测灰区在临床各个科室均有发现，出现HBV灰区样本最多的前三科室为骨科、妇科、泌尿科，HCV免疫检测灰区样本最多的前三科室为泌尿、肾内、外科，提示应重点关注泌尿等相关科室的免疫检测结果验证。本研究临床诊断数据资料显示，HBV、HCV灰区样本结果与肿瘤类疾病存在一定关系，提示应重点关注肿瘤类疾病患者的免疫检测结果与验证。
总之，临床血源性传播病原体的血液筛查中应规范灰区设定，严格按试剂说明书操作，而非各实验室凭经验设置，当试剂说明书未要求设置灰区时，宜不必设置灰区，或者采用更为敏感精准的核酸检测方法来进行验证，防止漏检误检。
撰写 | 韩剑峰
校稿 编审 | 缪为民 刘娟
编辑 | 谭易秋子
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