阴道分泌物,俗称“白带”,是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道黏膜、前庭大腺、宫颈腺体及子宫内膜的分泌物混合而成,其形成与雌激素作用有关。
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阴道分泌物检查包括性状、清洁度、微生物检查等,常用于判断雌激素水平和诊断女性生殖系统炎症、肿瘤及性传播疾病。
在临床上,阴道分泌物检查是细菌性阴道病、需氧菌性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病和滴虫阴道炎等妇科疾病的重要诊断依据。
正常白带呈白色稀糊状或蛋清样,粘稠、量少,无腥臭味,称为生理性白带。
生殖器官炎症如阴道炎和急性宫颈炎或发生癌变时,白带量显著增多且发生性状改变,称之为病理性白带,临床常见以下7种:
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由于阴道分泌物的性状易受取样和运送的影响,难以在实验室判断,建议以临床医生进行妇科检查为宜。
正常阴道环境为弱酸性,pH值保持在3.8~4.5,是反映阴道微生态平衡的重要指标。
PH>4.5:阴道毛滴虫病、细菌性阴道病、需氧菌性阴道炎
PH<4.5:外阴阴道假丝酵母菌病
pH值多由临床医生床旁利用干拭子擦拭阴道侧壁,在精密pH试纸上滚动进行检测。需要注意宫颈黏液、精液、血液或预湿拭子会影响阴道分泌物pH值的检测。
操作方法:取膀胱截石位,将窥器以少量生理盐水润滑后放入阴道内,暴露宫颈,用干棉签从阴道上1/3侧壁刮取分泌物;无性生活者仅用棉签进入阴道取标本。
对于分泌物涂片的制备,有湿片制备和干片制备两种方法。
湿片制备:向试管内滴加约0.5ml的0.9%氯化钠溶液洗脱阴道拭子制成悬浊液,或直接滴加1~2滴0.9% NaCl溶液至洁净载玻片上,再将拭子放在溶液中混合,制成涂片。
干片制备:直接将阴道拭子均匀涂抹在玻片上,制成涂片,待自然晾干后,利用酒精灯快速烘干固定,再进行革兰染色;或根据临床需求和病原微生物特点选择其他染色方法进行染色,待玻片干燥后镜检。
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临床常见的镜检方法有湿片镜检法、革兰染色法、荧光染色法等。
1. 湿片镜检法
湿片镜检法是阴道分泌物检查最传统最常见的方法,主要以生理盐水湿片为载体,显微镜下观察上皮细胞、杆菌、球菌、白细胞的数量及形态以进行清洁度分级,同时观察是否存在线索细胞、阴道毛滴虫、真菌等病原微生物。
阴道清洁度:
清洁度判定主要根据杆菌、球菌、白细胞和上皮细胞4项指标,以“Ⅰ~Ⅳ度” 进行分级报告,Ⅰ~Ⅱ度多为正常,Ⅲ或Ⅳ度为异常。
阴道分泌物清洁度判断标准
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需要注意的是,清洁度判定存在一定的局限性,不建议单独使用清洁度诊断阴道炎。
基于盐水湿片的Amsel法是细菌性阴道病诊断的临床标准;以下4项指标中,满足至少3项即可诊断为细菌性阴道病:
阴道分泌物性状为灰白色、均质、稀薄
pH值>4.5
胺试验阳性
湿片镜检中,线索细胞数量>20%的阴道上皮细胞总量
湿片还有助于阴道毛滴虫的检出,在生理盐水的湿片上观察到呈波状运动的滴虫及增多的白细胞,即可诊断为滴虫阴道炎。
在湿片中滴加1~2滴10%氢氧化钾溶液,可快速溶解细胞、阴道毛滴虫和黏液丝等有形成分,镜下更易发现孢子或菌丝,常用于外阴阴道假丝酵母菌病的诊断。
此外,Donders评分被国内外推荐用于需氧性阴道炎的辅助诊断。Donders评分是基于生理盐水湿片法,利用相差显微镜对乳杆菌、白细胞数量、含中毒颗粒的白细胞比例、背景菌群和基底旁上皮细胞比例进行评价分级的评分标准。
诊断标准:阴道分泌物显微镜下Donders评分≥3分;3~4 分为轻度;5~6分为中度;>6 分为重度。
需氧性阴道炎的Donders评分标准(10×40)
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2. 革兰染色法
革兰染色是指将阴道分泌物均匀涂抹于载玻片上,依次干燥、固定、初染、媒染、脱色、复染后,置于油镜下检查阴道菌群,如细菌、真菌、阴道毛滴虫和线索细胞等。
阴道分泌物病原微生物和线索细胞的革兰染色形态
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阴道分泌物革兰染色镜检是细菌性阴道病实验室诊断的参考方法,用于评估乳杆菌、阴道加德纳菌及其他类杆菌、弯曲杆菌的细菌性阴道病特征,通过Nugent评分可用于细菌性阴道病的实验室诊断。
细菌性阴道病的Nugent评分标准(10×100)
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Nugent评分是实验室诊断细菌性阴道病的“金标准”;诊断标准:0~3分,为正常;4~6分,诊断为中间型细菌性阴道病;≥7分,诊断为细菌性阴道病。
1. 阴道菌群密集度分级
以油镜下每个视野平均细菌数评估阴道分泌物菌群总生物量,共分为4个等级:
Ⅰ级:每个视野平均细菌数1~9个
Ⅱ级:每个视野平均细菌数10~99个
Ⅲ级:≥100个且光镜下观察,细菌满视野
Ⅳ级:成团聚集的细菌覆盖于上皮细胞
2. 阴道菌群多样性分级
以涂片中细菌种类数评估菌群种类数量,共4个等级:
Ⅰ级:1~3 种
Ⅱ级:4~6 种
Ⅲ级:7~9 种
Ⅳ级:超过10种及以上
3. 优势菌群
阴道微生态环境中生物量或种群密度最大的细菌即为优势菌,在很大程度上对菌群功能有决定性作用。
常见的有以乳杆菌为代表的革兰阳性杆菌、以链球菌为代表的革兰阳性球菌和以加德纳菌为代表的革兰阴性短杆菌或弧菌。
4. 菌群生长情况
正常菌群的标准为菌群密集度Ⅱ~Ⅲ级、多样性Ⅱ~Ⅲ级、优势菌为乳杆菌。
菌群抑制表现为细菌明显减少,无优势菌,密集度和多样性均≤Ⅰ级。
菌群增殖过度的密集度和多样性均为Ⅲ~Ⅳ级,且优势菌为形态类似乳杆菌的革兰阳性杆菌。
1. 胺试验
向新鲜涂片直接滴加10%氢氧化钾溶液可使游离氨释放,产生鱼腥样气味,即胺试验阳性,可用于辅助诊断细菌性阴道病。
2. 干化学检查
通过干化学酶法检测特异标志酶可反映病原微生物的存在,评估阴道健康状况,辅助鉴别诊断各型阴道炎。
通常检测指标包括pH、 过氧化氢 (H2O2)、白细胞酯酶 (LE)、唾液酸苷酶 (SNA)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)、乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)。
目前我国最常使用的是阴道炎五联检,可同时测定pH、H2O2、LE、SNA和NAG等多项指标。
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