乙肝病毒不是DNA病毒吗?为什么要查RNA?

文摘   科学   2024-04-22 15:12   上海  

文案:吴星洁

审核:秦学亮

排版:殷杏



“请问检验科有开展乙肝RNA定量这个项目吗?”



随着问询从电话中传来,小检打开了项目查询系统,顺利的将相关项目的全称、最终报告时间等信息传达给前台同事。这本是一次稀松平常的工作咨询。

但脑海中却突然闪过一个疑问:乙型肝炎病毒不是双链DNA病毒吗?这个项目检测的RNA从何而来?将要合上的笔记本电脑又再次被打开。


最“熟悉”的陌生毒:HBV病毒

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus)是引起乙型肝炎(简称乙肝)的病原体,引起人体感染的是嗜肝DNA病毒-正嗜肝DNA病毒的病毒。完整的乙肝病毒颗粒(Dane)中包含双链HBV-DNA、包膜抗原HBsAg、核心蛋白HBcAg等多种成分,有感染性。


即使没有医学背景,大部分人对“乙肝”这个词应该都不陌生。无论是乙肝疫苗接种,体检中的“乙肝二对半”检测,还是在患有“大三阳”“小三阳”的家人/亲戚中流行的分餐制,“乙肝大国”这个几十年前经常出现在电视公益广告中的词汇,经过国家不懈的宣传、预防、治疗和控制后,在如今大部分身体健康的年轻人听来,可能已略显疏离。


相比70年代,感染率大幅下降是真。但由于我国人口基数大,全球2.57亿乙肝病毒携带者中仍有约7000万是中国人,且每年仍有数以万计的新发感染者出现。


这其中,有5~10%的青少年和成人急性乙肝患者,病毒持续6个月仍未被清除,转为慢性乙肝患者;而围产期和婴幼儿乙肝患者慢性化比例更高,甚至高达90%。慢性乙肝复发率高,且有继发肝纤维化肝硬化甚至肝癌的风险,一旦罹患,长期、甚至终身服药,并需要定期监测,经济负担和身心消耗都持续存在。



APASL指南指出:停药后产生复发的慢性乙肝患者,发生肝纤维化、肝癌等不良后果的风险大增。



如何提高乙肝定期监测的质量,开发更精准的辅助检测项目,减少乙肝患者对病情进展和用药情况的误判几率,一直是临床检验和相关医学科研专家的追求。



HBV DNA
入市早,发展较成熟的乙肝DNA检测对病情的诊断、治疗起着指导性作用,尤其在发现它与肝癌的发生密切相关后,更是将“乙肝DNA转阴”作为乙肝治疗首要目标

有研究显示,DNA定量在12IU/mL~2000IU/ mL(低病毒血症)的患者中,有25%发展为肝癌,而DNA检测阴性(<12IU/mL)的患者,肝癌发生率为10%。可见即使低于检出下限,仍有部分患者存在病毒复制风险,需要更灵敏的方法尽早发现,并积极进行治疗。


cccDNA
HBV慢性感染难以被彻底清除,根源在于感染后形成的共价闭合环状DNA (cccDNA)可长期稳定存在于肝细胞核内。由于外周血不含cccDNA,需要进行肝穿刺取活组织送检,难以作为常规监测项目。



HBV RNA

HBV RNA是以HBV cccDNA的负链为模板,转录产生的长度3.5KbmRNA。这种3.5KbRNA具有双重功能,既可作为病毒前基因组RNA(pgRNA)复制子代病毒RNA,又可编码DNA聚合酶、HBcAg和HBeAg前体蛋白。血清HBV RNA水平可反映肝组织cccDNA转录活性,且灵敏度高,可应用于经过治疗后的慢性乙肝患者的监测。停药时HBV RNA高水平患者,停药复发风险也高。



2021年,我国批准了全球第一个用于临床的HBV RNA高敏检测试剂,并被纳入最新专家共识。


随着强效、高耐药屏障的一线口服核苷(酸)类似物(NAs)如恩替卡韦、替诺福韦等的广泛应用,目前大部分慢性乙肝患者在接受NAs治疗1年后,HBV DNA就会转阴或处于低病毒血症状态,而HBsAg转阴则较为困难,抗原血症时间可达10年甚至更久。在此期间,HBV RNA可覆盖两者之间的检测盲区,监控抗病毒疗效。


   

现有的HBV RNA检测方法中,RT-PCR(PCR-荧光探针法)检测下限为300 copies/mL,SAT(RNA捕获探针法) 检测下限为50copies/mL 。前者使用开放平台,无需专用仪器设备,但操作步骤较多;后者自动化程度更高,速度更快,但成本较高。





总结
HBV RNA是由环状HBV DNA(cccDNA)转化出的产物之一,是一条长3.5Kb的mRNA。它既可以自我复制,也是编码各种病毒蛋白的模板。由于它在血清中的含量与cccDNA复制能力强相关,只需采集静脉血即可检测,结合如今高灵敏度的方法学,有效覆盖了传统的HBsAg和HBV DNA之间的监测盲区,可用于慢性乙肝患者治疗后监测。

成文的2024年3月18日恰逢第24个“全国爱肝日”。今年的宣传主题正是“早防早治,远离肝硬化”,小检看着自己梳理的慢性乙肝对抗史,对未来充满希望。


参考文献

[1] 杨瑞锋.最新研究进展:HBV RNA的临床价值与应用展望.检验医学,2022-07-28.

[2] 柳丽娟.一文读懂HBV RNA检测.检验医学,2022-12-02.




备注:本文部分图片来源于网络





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