背
景
血小板输注对于治疗血小板相关疾病和预防外科手术患者出血至关重要。血小板储存损伤（platelet storage lesion, PSL）的发生限制了血小板输注的有效性和有效期。减轻PSL是延长血小板保存期和减少浪费的关键。引发PSL的因素包括储存时间和温度、保存液、保存袋和振荡模式。细胞内过量的活性氧是引起PSL的主要因素之一。
白藜芦醇（Res）是一种天然植物产物，具有抗氧化作用。然而，由于其水溶性和稳定性较差，Res在医学中的应用受到限制。本文研究者使用了负载白藜芦醇的脂质体系统（Res-Lipo），以更好地利用白藜芦醇的抗氧化作用缓解PSL。
方
法
研究者首先制备脂质（Res）和负载白藜芦醇的脂质（Res-Lipo），并先后进行了Res和Res-Lipo的表征测定和体外药物释放分析以及Res-Lipo的载药量和包被率测定。将血小板用香豆素-6（C6）或C6-Lipo处理，并检测其细胞摄取率和不同浓度Res条件下的血小板活力。
从SD大鼠腹主动脉采集血液制备PRP, 用Annexin V-FITC和anti-CD62P-PE分别标记PS和CD62P，使用流式细胞仪检测D1、D3和D5不同浓度Res条件下的荧光阳性率。设置空白组、Res组、Lipo组和Res-Lipo组，使用流式细胞仪测定D1、D3、D5各组中的ROS水平、PS和CD62P水平、ATP水平、NO水平和线粒体膜电位的差值并用WB测定D1和D5这四组中p66Shc、NOX2以及细胞凋亡相关生物标志物的表达。使用流式细胞仪分别测定搅拌和不搅拌状态下添加Lipo和不添加Lipo的相对凋亡值。将血小板样品分成两等份，与CFSE或DiI孵育，混合。在37 ℃下加入ADP刺激血小板聚集，通过流式细胞术定量双阳性百分比。用CFSE标记储存血小板，过静脉注射到小鼠体内。在指定的时间点采集血样并通过流式细胞术计数CFSE阳性血小板的百分比。
结
果
图1.Lipo和Res-Lipo的表征
图2.血小板储存过程中的血小板凋亡和活化情况
图3.白藜芦醇的抗氧化能力
图4.Res-Lipo对储存期间的PSL的改善
图5.Res-Lipo在储存期间对血小板质量的改善和对脂质体物理缓冲作用的验证
图6.储存血小板的有效性
结
论
这项研究中使用Res-Lipo来减轻储存血小板中的氧化应激，抑制血小板凋亡和活化，从而缓解PSL。Res-Lipo可以作为一种安全的添加剂，在储存期间保持血小板质量。加入Res-Lipo可延长血小板保存时间以满足患者的巨大需求，具有良好的临床应用前景。
参
文
考
献
公众号
感谢中南大学湘雅二医院输血科来稿
公众号｜输血人
本期编译｜操博为
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