MRD，即肿瘤微小残留病灶，就是通过极灵敏的技术来检测肿瘤释放到血液中的ctDNA，来反映肿瘤在“根治性治疗”后体内癌细胞的残留程度。在多个瘤种中，ctDNA-MRD检测都显示出预后预测及治疗指导价值。复旦大学附属中山医院周俭教授团队开展了一项单中心研究，探索肝细胞癌患者围手术期个性化MRD评估对术后复发的预测能力。研究结果发表于近期的Clinical Cancer Research。周俭教授为该文的通讯作者。
复旦大学附属中山医院院长
中国医学科学院学部委员
国家杰出青年科学基金获得者
国家级人才项目获得者
国家“万人计划”科技创新领军人才
科技部“肝癌转移复发的精准医疗研究创新团队”负责人
中华医学会肿瘤学分会候任主任委员
亚太原发性肝癌专家联盟（APPLE）主席（首位获此殊荣的中国大陆学者）
中国医师协会外科医师分会副会长兼总干事
中国抗癌协会肝癌专业委员会前任主任委员
个性化的ctDNA检测方法
根据BCLC分期，肝细胞癌（HCC）分为5期：0期、A期、B期、C期和D期。其中， BCLC 0 和A 期的标准治疗方法是手术切除，但术后复发风险仍然很高，残留病灶是导致术后复发的关键因素，因此，检测残留病灶是HCC术后管理的重要临床需求。既往研究表明，循环肿瘤DNA（ctDNA）在预测疾病复发和患者预后方面具有潜力，而下一代测序（NGS）技术的应用为检测术后血液中的残留病灶提供了可能。然而，既往的研究往往聚焦于特定的基因组区域，敏感性有限，达不到HCC的MRD检测阈值。周俭教授的这项研究采用了一种基于NGS的个性化ctDNA检测方法，分析术前和术后血浆样本中的MRD，并与预后进行关联分析。
研究入组了2016年1月~2016年5月在复旦大学附属中山医院接受手术治疗的HCC 患者。要求患者须有完整的临床数据，病理诊断明确，并符合以下标准之一：①单个肿瘤病灶，已接受根治性手术切除；②多个肿瘤病灶，但局限于一个肝叶，且切除后残肝体积充足；③肿瘤数目≤3个且伴有肉眼癌栓，但癌栓不在门静脉主干内，肿瘤和癌栓均可切除。
在手术过程中采集肿瘤和正常组织标本，并在术前和术后7天内采集血浆样本。使用 PredicineBEACONTM NGS 个性化 ctDNA 检测方法，分析术前和术后血浆样本中的MRD状态。PredicineBEACONTM是一种根据手术组织标本的数据进行的个性化MRD检测，具体方法是先对手术获取的肿瘤组织标本和正常组织标本进行全外显子测序，识别出与癌症相关的体细胞突变，以此定制MRD panel，然后以定制的MRD panel对术前和术后的血浆样本进行超深度测序。该panel包括50个个性化的体细胞突变，以及一组固定的可操作/热点突变。
术后MRD与预后相关
研究共入组了88例已接受手术切除的HCC患者。根据BCLC分期：0~A期68例（77.2%），B期10例（11.4%），C期10例（11.4%）。根据中国肝癌分期（CNLC）：Ⅰ~Ⅱ期78例，Ⅲ期10例。75.0%（66例）的患者伴有肝硬化，其中轻度39例，中度和重度共27例。此外，在10.2%（9例）的患者中发现了肉眼癌栓。
研究结果显示，88例患者中，36例术后MRD阳性，52例阴性。术后MRD状态与无复发生存（RFS）和总生存（OS）显著相关。术后MRD 阳性患者的中位RFS为17.1个月，而 MRD阴性患者在77.8 个月的中位随访期间中位RFS仍未达到（P=0.0013）。MRD阳性患者的中位OS为40.1个月，MRD阴性患者在81.0个月的中位随访期间中位OS仍未达到（P=0.0012）。
多变量Cox回归分析显示，与其他临床危险因素如微血管浸润（HR=2.05，P=0.032）和肝硬化（HR=2.12，P=0.084）相比，MRD阳性（HR=2.17，P=0.027）是肿瘤复发的最显著的危险因素。
术后MRD与临床特征相关
研究还探索了术后MRD与临床特征之间的相关性，发现所有BCLC C期患者均为MRD阳性，其比例显著高于B期（30.0%，P=0.003）或0~A期（33.8%，P＜0.001）。同样，伴有肉眼癌栓的患者也是100% MRD阳性，这一比例显著高于无肉眼血栓的患者（34.2%，P=0.001）。与没有肝硬化的患者（18.2%）相比，有肝硬化的患者MRD阳性率（48.5%）也显著更高（P=0.013）。伴微血管浸润的患者（48.0% vs 31.6%，P=0.133）和男性患者（46.3% vs 23.8%，P=0.079）的MRD阳性率也有增加，尽管差异未达到统计学显著性。
进一步的研究显示，MRD状态有可能对“临床低复发风险”患者的预后风险进一步分层。在BCLC 0~A期患者（68例）中，尽管无统计学显著性，但MRD阳性患者的中位RFS（25.4个月 vs 未达到，P=0.071）和OS（中位OS未达到 vs 未达到，P=0.11）较MRD阴性患者更短。
术前肿瘤分数与预后相关
在术前血浆样本中，77例患者检测出ctDNA阳性，11例阴性。尽管术前MRD状态与RFS 或OS 之间没有显著关联，但ctDNA 肿瘤分数（TF）与预后显著相关。TF≥10%的患者（12例）较TF＜10%的患者（65例）RFS和OS更差，这表明了术前血浆中ctDNA TF评估的预后价值。TF是根据77例MRD阳性患者中检测到的体细胞突变估计得出，77例患者的TF范围从0.007%到66.265%不等，中位值为1.112%。
研究的两大意义
第一，对于对于传统意义上低复发风险人群，如BCLC 0~A期或CNLC Ⅰ~Ⅱ期的患者，MRD检测可以筛选出高复发风险的患者，这些患者可能需要更密切的影像学监测或进行辅助治疗。有必要将MRD检测纳入常规的临床实践。
第二，术后MRD阳性与术前存在高风险特征（如血管癌栓、肝硬化）显著相关。这表明 MRD 状态不仅是复发的独立风险因素，还可能与术前病理特征相关联。
总之，该研究通过个性化 的ctDNA 检测方法，为 HCC 术后复发风险的评估提供了新的视角。
Hu J, Tang H, Jia CC, et al. Personalized MRD Assessment in Peri-surgical ctDNA for Prognostic Prediction in Hepatocellular Carcinoma. Clin Cancer Res. 2024 Nov 11.
排版编辑：Linda
