Endo
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上一期我们分享了消化内镜制备PDO的取样篇，全文看这里：核心思维导图向下看。
PDO可以有效反映原始肿瘤的特性，还能实现低成本、短周期、高通量应用于动物模型和移植模型，应用前景广泛！
今天我们从标本的储存、运输和培养等方面展开讨论，希望有助于基础研究的有志之士。
样本存储与运输
陈述10 按要求采集富含肿瘤细胞的新鲜组织样本，食管、胃和结直肠等肿瘤样本采用组织清洗液清洗后尽快放入组织保存液中，而胰腺癌样本经MOSE挑选后直接放于组织保存液中；样本须4℃低温保存、快速转运，确保样本安全、准确、及时送达实验室。
肿瘤组织质量的好坏直接影响类器官培养的成功率，样本在环境中暴漏时间越长、活性越低、受污染的风险也越高。样本在采集后24h内冷链运送至实验室，避免影响细胞活性和培养效果。
类器官培养
预处理
陈述11 样本送达实验室后，应由样本接收人员确认样本是否符合要求、信息是否完整准确，并对符合要求的样本按照标准操作规程进行清洗、细胞解离和种胶等操作。
类器官构建与培养
陈述12 消化系统恶性肿瘤类器官培养应严格按照培养流程对内镜获取的食管、胃和结直肠等肿瘤样本进行清洗、剪切、消化和过滤，而后依次加入基质胶和适量相应组织类型的类器官培养基，并于培养箱（37℃，5% CO2）中进行培养，而胰腺癌样本不建议进行消化，通常以切碎组织进行培养。
类器官DPO培养及药敏试验流程
类器官生长状态评估
陈述13 培养初期，应每日于显微镜下观察类器官是否有微生物污染，并记录类器官生长及形成情况，如出现不可控的微生物污染和（或）无类器官形成等情况，建议终止培养。
类器官鉴定
陈述14 组织病理学可作为类器官鉴定的常规手段，同时可根据实际需求选择免疫荧光、基因检测等其他鉴定方式，以保证后续类器官治疗敏感性检测结果的可信度。
药物敏感性检测
陈述15 将经过鉴定的类器官接种于多孔板中，加入相应药物，至少设置3个复孔，并同时设置阴性对照，读取药物处理后的类器官活性值，计算并预测药物的敏感性。报告内容应包括患者信息、类器官培养情况和药物处理后的结果。
2024年可以称为消化内镜取样及类器官DPO培养元年，由中华医学会消化病学分会医工交叉协作组牵头形成的《中国经内镜消化系统常见恶性肿瘤组织取样及类器官培养专家共识，2024，成都》有助于规范类器官培养平台操作，合理掌握适应证及伦理要求，推动相关临床和基础研究，更好地指导后续精准治疗！
参考文献
中华医学会消化病学分会医工交叉协作组.中国经内镜消化系统常见恶性肿瘤组织取样及类器官培养专家共识（2024，成都）[J].中华消化内镜杂志, 2024, 41(5): 337-350.
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