消化内镜如何做基础研究?从取标本开始~

文摘   2024-07-12 18:51   广东  


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您有没有因为忙于消化内镜工作,而无暇顾及基础研究?虽然这像一句广告的开场白,但是实实在在告诉各位,消化内镜标本可以用于制备类器官(PDO),这给了我们很好的方向和目标!

患者来源的肿瘤PDO优势显著:Ta保留了原始肿瘤的形态学、基因与转录全景、突变等生物学特征,这种现象在食管癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌中均存在。PDO既解决了肿瘤细胞系突变导致无法反映原始肿瘤特性问题,又解决了动物模型、移植模型造模周期长、费用高、难以高通量应用的问题。



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PDO被誉为生物医学的未来之星!?

其可用于治疗前评价药物、放射与免疫治疗效果,类似抗菌药物敏感性检测,有助于预测患者治疗反应、改善预后、减少不良事件以及节约医疗资源。同时应注意,保障患者(供者)对采样、类器官培养、敏感性检测、所得数据用途,以及样本处理等相关事宜的知情和同意权利以及信息安全。



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PDO样本主要通过外科手术切除、活组织检查及采集循环肿瘤细胞等方式获得。通过外科手术获取样本,患者术后需等待较长时间才能得到敏感性检测结果。而消化内镜可在术前获取组织样本用于培养类器官,以利于患者术后及时得到有效的序贯治疗。



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我们的工作贯穿于消化内镜下取样,但规范化取样可以为类器官培养成功奠定基础,提高研究效率,因此将其分为⑤个部分:

1.取样前准备

准备的目的是充分暴露肿瘤、降低类器官污染、方便穿刺或活检。食物残渣、黏液、白苔都应该尽量清除,并按照消化内镜诊疗相关肠道准备的指南与共识意见清洁肠道,可移步这样做,最适合的方法,才是最有效的肠道清洁!;上消化道需使用祛泡剂、祛黏液剂。

2.取样部位

(1)隆起型病变,于病变顶部或侧缘表现为充血、糜烂、凹凸不平等部位取样;

(2)溃疡型病变,于溃疡边缘隆起部位取样;

(3)弥漫浸润型病变,于黏膜充血、肿胀、糜烂、溃疡、凹陷等病变显著的部位取样;

(4)胰腺癌在肿瘤内部实体部分取样,尽量避开坏死、囊性病变区域,转移灶补充取样。

3.取样方式

食管、胃、结直肠肿瘤采取深挖、多点活检较好,此外还可以使用隧道法(tunnel biopsy)、转吸法(turn and suction)、撕脱法(strip biopsy)和提切法(lift and cut)等

胰腺癌采取穿刺活检方式,取样方式推荐FNB优于FNA,取样技巧推荐慢拉法(slow pull)、干抽法(dry suction)与改良湿抽法(modified wet suction)。

4.取样器材

取样器材的型号与规格是决定样本大小与取材深度的直接因素。活检钳钳头容积越大(主要体现在钳头长度与直径),采集的样本体积越大。齿状钳头有助于获取更深层的组织,并且带齿的钳头获取的样本体积要大于卵圆形活检钳。钳头是否带针对获取的组织量影响不显著,但带针是否有助于获取更深层的组织却存在争议。

胰腺癌应获取更多核心组织,可选择更粗的穿刺针,优选EUS-FNB,次选EUS-FNA,19G用于胰颈体尾、22G应用最广、适用于胰腺各部位、25G用于胰腺钩突。

5.样本大小与数量

食管、胃、结直肠等肿瘤取样,应至少取3块2~3 mm大小富含肿瘤细胞的组织块

胰腺癌取样,推荐使用FNB/FNA获取1~2条足量组织条,取样前常规宏观现场评估MOSE和/或快速现场评估ROSE,以明确诊断和选择高质量核心组织条。


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我把上述内容和实践操作总结成思维导图,如下:

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做好消化内镜取样是肿瘤PDO培养的第一步,之后样本还会经历储存、运输、培养等一系列环节,最终得以实现成功培养的肿瘤PDO,我们留在下一节分享。如果对本文中内容有疑惑、纠正或分享心得、经验的朋友,可以底部留言互动。



参考文献

中华医学会消化病学分会医工交叉协作组.中国经内镜消化系统常见恶性肿瘤组织取样及类器官培养专家共识(2024,成都)[J].中华消化内镜杂志, 2024, 41(5): 337-350.

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