单位:汉中市中心医院检验科
流式细胞仪检测到上样管后,产生一定的气体压力将待测样本压入流动池。同时鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液)在仪器产生的高压作用下从黯液管喷出,鞘液管入口方向与样本流形成一定的角度,形成一个圆形的鞠液流,包围着细胞或微粒高速流动,使待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,逐个地通过流式细胞仪的激光聚焦区(流动池),从而被检测到,并发出散射光及荧光等多种光学信号。光学信号通过光电信号转换器及电子信号处理系统采集及分析后,最后以图形的形式将数据结果显示在电脑屏幕上。
流式细胞术(flow cytometry, FCM)已在检验医学领域被广泛应用,其检测结果受样本采集、抗体选择、红细胞裂解方法等多种因素的影响。
机体的细胞免疫由T淋巴细胞介导,体液免疫由 B 细胞 ( CD3-CD19+ ) 介导,非特异性免疫以NK细胞 ( CD3-/CD56+16+)。T淋巴细胞进一步分为辅助性T淋巴细胞(Th,CD3/CD4)和细胞毒性/抑制性T淋巴细胞(Tc/Ts,CD3/CD8)。流式细胞术广泛的应用于细胞免疫功能。
案例介绍
此时可以揭开隐藏在流式细胞术身上黄色的面纱——高胆红素血症。
高胆红素样本中异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的CD3 +细胞群与CD3- 细胞群荧光表达分界不清,进而影响设门的情况,直接影响了FCM检测结果的准确性。
究其原因是因为DBil是经过肝脏加工后的胆红素,其实质为胆红素分子与1个或2个葡萄糖醛酸分子单独酯化形成的结构,易溶于血浆和样本处理所用的裂解液,因此可能对FITC荧光信号的干扰较大。
研究显示,DBil≥200μmol/L对FCM检测的干扰较大,采用染色-裂解-洗涤法处理可最大程度地消除DBil的干扰。检验人员在做流式细胞检测时可以先查看标本胆红素结果,然后进行下一步操作,这样可以在繁忙的检验工作中提高检测速度,保证检测结果的准确性。
为了方便全国各地的检验人交流,我们特别成立了检验医学网全国交流群。欢迎您的加入,与大咖对话,分享经验和见解!因微信群超过200人后无法扫码进群,大家可以添加检验医学网编辑个人微信,编辑将邀请您进群。