撰文：paperplaneIN
又有刚确诊的网友咨询我，我十分理解ta的心情，安慰的话通过扁平文字框传递过去，企图平稳ta内心的翻腾巨浪。
有些无奈，因为大家常常都忧心得不可开“教”。也许是相关领域知识了解甚少，也许真的要责怪HIV，因为它还会影响你的大脑——HIV-1 复制持续存在于脑部，从而导致相关的神经认知障碍（认知功能的下降、情绪问题、运动协调性，或发展为严重的精神障碍）。
今天分享的文献研究的是关于如何解决大脑中的HIV。
一、背景
一、背景
研究背景
抗逆转录病毒药物（ART）在治疗HIV-1和提高感染者生活质量方面取得了显著进展，但由于这些药物难以有效穿过血脑屏障（BBB），HIV-1在脑部储存器（如血管周围巨噬细胞和小胶质细胞）中的复制仍然持续，导致HIV-1相关的神经认知障碍。因此，开发能够穿过BBB并靶向脑部储存器中的HIV-1的新疗法变得尤为重要。
p75神经营养因子受体在这些过程中扮演了关键角色。研究者们希望通过调节这一受体来抑制HIV的复制和减轻炎症反应。因此，本文的研究目的是探讨LM11A-31作为p75受体调节剂的潜力，评估其对HIV-1复制和巨噬细胞炎症反应的抑制作用。
二、研究方法
研究背景
人单核细胞来源的巨噬细胞（MDM）培养：
参考之前的研究方法，将人外周血单个核细胞（PBMCs）从血浆中分离并进行培养。PBMCs经过4小时的粘附培养后，去除非粘附细胞，并在含有M-CSF的培养基中培养7-10天，促进其分化为巨噬细胞。分化后的MDM经HIV-1 Ada株病毒感染，感染后的细胞在6孔板中培养，每三天更换新鲜培养基，以保持细胞活力。在确认病毒感染后（7-10天），HIV-1感染的MDM细胞接受DMSO（对照）或LM11A-31（100 nM）的处理。
图2. LM11A-31 对MDM中HIV-1复制的影响
U937和U1单核细胞系培养：
获得HIV-1未感染的U937细胞系和HIV-1感染的U1细胞系，并将其培养在含有10%胎牛血清和1%L-谷氨酰胺的RPMI 1640培养基中。为了研究LM11A-31、达芦那韦（DRV）及其联合治疗对HIV-1复制的长期影响，将U937和U1细胞分别以0.4×10^6细胞/mL的密度种植于含100 nM PMA的孔中，72小时后更换为新鲜培养基，并进行药物处理（DMSO、LM11A-31、DRV及其联合治疗）72小时。
图3. LM11A-31 对 U1 巨噬细胞中氧化应激的影响
图1.LM11A-31 对 U937 巨噬细胞的影响
活性氧（ROS）测定：
使用流式细胞术检测U1细胞中的活性氧水平。细胞经过药物处理后，用CM-H2DCFDA染料染色并进行流式细胞仪检测，以确定平均荧光强度（MFI）。
Western Blot分析：
细胞裂解后，提取的蛋白通过SDS-PAGE电泳后转移到PVDF膜上。使用p75NTR、SOD1、Catalase、Beclin-1、p-Akt等特异性抗体进行检测，之后用次级抗体染色并通过Li-Cor扫描仪检测。
多重ELISA：
评估细胞培养上清液中的细胞因子水平，使用定制的多重免疫分析法检测促炎和抗炎细胞因子。
HIV-1 p24抗原ELISA测定：
使用HIV-1 p24 ELISA试剂盒检测HIV-1 p24抗原水平。该方法通过捕获p24抗原来定量测定培养上清液中的病毒复制量。
LDH活性测定：
使用LDH细胞毒性分析试剂盒检测药物处理对细胞的细胞毒性作用。
统计分析：
结果以平均值±标准误表示，实验组之间的差异通过Student’s t检验或单因素方差分析（ANOVA）和Tukey’s事后检验评估。显著性水平设定为*p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。
三、结论
研究背景
HIV-1感染者在其一生中容易罹患多种神经疾病或病症，包括认知障碍、中风、阿尔茨海默病（AD）以及快速衰老。最近完成的一项2a期临床试验评估了LM11A-31在AD受试者中的安全性和探索性终点，同时在缺血性中风小鼠模型中也发现了LM11A-31的疗效。因此，LM11A-31可能对易患其他神经疾病（尤其是AD和中风）的HIV-1感染者具有潜在治疗作用。LM11A-31与抗逆转录病毒治疗（ART）药物结合使用，可发挥双重作用，改善HIV-1感染和神经系统合并症（如中风或AD）的治疗效果。
总的来说，LM11A-31不仅能够抑制HIV-1，还可以与达芦那韦（DRV）产生协同作用，进一步降低细胞毒性和氧化应激，而不会导致自噬失调。此外，LM11A-31单独使用或与DRV联合使用能够显著降低多种促炎细胞因子和趋化因子，从而减轻巨噬细胞的炎症反应。由于ART药物难以穿过血脑屏障（BBB）并抑制大脑中的HIV-1，因此LM11A-31具有重要的临床意义，其亲水性使其能够渗透BBB。然而，为了充分发挥LM11A-31在HIV-1及其合并症中的治疗潜力，还需要进一步使用合适的HIV-1动物模型和双重感染（HIV-1+中风）模型进行研究。
四、注释
研究背景
p75NTR调节剂：p75神经生长因子受体（p75NTR）是一种参与细胞生长和死亡的受体。p75NTR调节剂是指能够调节该受体功能的化合物，在神经系统疾病和病毒感染的研究中具有潜在的治疗价值。
LM11A-31：一种小分子化合物，能够穿过血脑屏障（BBB），对神经系统疾病和病毒感染具有抑制作用。在本文中，LM11A-31被用来抑制HIV-1病毒复制和炎症反应。
巨噬细胞：一种免疫细胞，负责吞噬和消灭病原体以及清除细胞残骸。HIV-1病毒可以感染巨噬细胞并在其中复制。
血脑屏障（BBB）：大脑内的屏障结构，保护大脑免受有害物质的侵入，但同时也阻碍了一些药物进入中枢神经系统（CNS）。
中枢神经系统（CNS）：包括大脑和脊髓，是人体的主要神经控制中心。
氧化应激：一种由自由基或活性氧（ROS）引起的细胞损伤过程，常见于感染、炎症和许多疾病的病理过程中。
细胞毒性：指某种物质对细胞的有害作用，可能导致细胞死亡或损伤。
自噬失调：自噬是细胞回收和降解自身损伤或废物的过程。自噬失调指这种过程异常，可能导致细胞损伤或疾病。
促炎性细胞因子：由免疫细胞释放的信号分子，能够促进炎症反应。过度的促炎性细胞因子可能导致组织损伤和疾病的加重。
文章标题: LM11A-31, a modulator ofp75 neurotrophin receptor,suppresses HIV-1 replication andinflammatory response inmacrophages
作者: Golnoush Mirzahosseini, Namita Sinha, Lina Zhou, Sandip Godse, Sunitha Kodidela, Udai P. Singh, Tauheed Ishrat, and Santosh Kumar
DOI : 10.3389/ebm.2024.10123
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