中国汉族人群中多基因位点相互作用对IgA肾病的影响
Effects of Multilocus Interaction on IgA Nephropathy in the Chinese Han Population
[TH-PO531]
October 24, 2024 | 10:00 AM - 10:00 AM
Location: Exhibit Hall, Convention Center
Authors：石殿春, Yuanyuan Wu, 余学清; 广东省人民医院
IgA肾病（IgAN）是全球最常见的原发性肾小球肾炎。先前的全基因组关联研究（GWAS）已确定多个与IgAN易感性相关的基因，包括TNFSF13、ITGAX-ITGAM、FCRL3、ST6GAL1和CARD9。基因间的相互作用可能对IgAN的易感性产生更大影响，并有助于我们深入理解IgAN的遗传发病机制。本研究旨在探讨基因间相互作用与IgAN易感性之间的相关性。采用MassARRAY平台，在1000例IgAN患者和1000例健康对照者中，筛选出63个单核苷酸多态性（SNPs）进行基因分型。使用PLINK 1.90进行数据质量控制和筛选，并计算基因型和等位基因的频率分布。采用多因子降维法（GMDR）分析多步骤基因-基因相互作用。GMDR分析显示，TNFSF13（rs4968210）、FCRL3（rs11264793）和ST6GAL1（rs2284750、rs7634389）之间的相互作用与IgAN风险显著相关（P=0.01，OR=2.88）。此外，基因型-表型关联分析显示，TNFSF13（rs3803800）、FCRL3（rs11264793、rs7528684）、ITGAX（rs11150619）和ST6GAL1（rs6784233、rs7634389）之间的相互作用与IgAN患者的估算肾小球滤过率（eGFR）相关（P=0.01，OR=14.03）。TNFSF13（rs3803800）、FCRL3（rs11264793、rs7528684）、ITGAX（rs11150614）和ST6GAL1（rs7634389）对IgAN患者的低密度脂蛋白水平有联合效应（P=0.01，OR=4.81）。此外，TNFSF13（rs3803800）、FCRL3（rs11264793、rs7528684）、ITGAX（rs7190997）和ST6GAL1（rs6784233、rs7634389）之间的相互作用还与IgAN患者的血尿相关（P=0.001，OR=29.66）。本研究表明，ITGAX-ITGAM、TNFSF13、FCRL3和ST6GAL1基因之间的相互作用可能对IgAN易感性产生一定影响。此外，它还可能与患者的脂质水平、血尿以及肾功能进展相关。![]()
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转铁蛋白受体1介导系膜细胞内半乳糖缺乏IgA1溶酶体积聚，从而促进IgA肾病发生
Transferrin Receptor 1 Mediates Lysosomal Accumulation of Galactose-Deficient IgA1 in Mesangial Cells, Contributing to IgA Nephropathy
[FR-PO813]
October 25, 2024 | 10:00 AM - 10:00 AM
Location: Exhibit Hall, Convention Center
Authors：Fang Mengting, 司美君, 余学清; 广东省人民医院
Gd-IgA1在系膜区的沉积是免疫球蛋白A肾病（IgAN）的病理特征，但其机制尚不清楚。我们利用CRISPR/Cas9技术筛选可能介导系膜细胞与Gd-IgA1结合的膜蛋白，并确定转铁蛋白受体1（TfR1）为候选蛋白之一。在体外实验中，我们在系膜细胞中过表达和敲低TfR，并探究其对Gd-IgA1与系膜细胞结合的影响。在体内实验中，我们通过AAV9在BALB/c裸鼠中过表达TfR，然后静脉注射吲哚菁绿（ICG）、HC-IgA1-ICG和Gd-IgA1-ICG，并通过活体荧光成像监测肾脏中IgA1的沉积强度。我们还在IgAN患者的肾组织上验证了这一发现，检测了TfR的表达和定位。我们观察到，与对照组相比，TfR敲低组中Gd-IgA1与系膜细胞的结合明显减少。相反，与对照组相比，TfR过表达组中Gd-IgA1与系膜细胞的结合明显增加。我们证明，在TfR过表达的小鼠中，肾脏中Gd-IgA1的沉积显著增强，并且发现Gd-IgA1与肾脏中的TfR和溶酶体标志物lamp1共定位。为了验证我们的发现，我们进行了免疫组化染色，并揭示与癌旁对照相比，IgAN患者肾小球中TfR的表达显著增加，并且发现TfR与IgA共定位。透射电子显微镜（TEM）和免疫电子显微镜（IEM）显示，IgAN患者系膜细胞溶酶体中存在IgA1蛋白积聚。我们的研究阐明了系膜细胞中的TfR促进了Gd-IgA1的结合和内吞作用，导致其在溶酶体内聚集。本研究为IgAN治疗提供了潜在的新策略。A Human Origin Anti-GdIgA1 Antibody and Its Implications in IgA Nephropathy
[FR-PO818]
October 25, 2024 | 10:00 AM - 10:00 AM
Location: Exhibit Hall, Convention Center
Authors: Tang Haipei, Zeng Huikun, Zhang Zhenhai, 余学清；广东省人民医院
IgA肾病（IgAN）是一种常见的肾脏疾病，其特征是IgA沉积于系膜区，导致系膜细胞增殖。IgAN的潜在机制尚不清楚。“四重打击”假说认为，由半乳糖缺陷IgA1（GdIgA1）和抗GdIgA1形成的免疫复合物在该疾病中起关键作用。然而，这些免疫球蛋白在系膜区沉积的原因及其在疾病过程中的作用尚不清楚。本研究从外周血中收集了与GdIgA1结合的B细胞，并通过scBCR-Seq进行测序。随后合成并筛选了一组候选抗体。在这些候选抗体中，P4对GdIgA1表现出高亲和力。本研究通过将序列重置至种系来调查成熟与原始态（na?ve state）P4之间的结合亲和力。此外，使用P4、HAA和KM55比较了IgAN患者和健康对照者中GdIgA1的水平。最后，进行了初步的体外实验来探讨P4在IgAN发病机制中的作用。在外周血B细胞（PBMCs）中获得了高亲和力抗GdIgA1抗体（P4），其由IGHV3-64D|IGHJ4、IGKV1-39|IGKJ2和IGHA2编码，对GdIgA1的KD值为1.508×10-8(M)。重链决定了与GdIgA1的结合，而轻链对亲和力的影响较小。最重要的是，原始态的P4不与GdIgA1结合，这表明它是由除GdIgA1以外的抗原诱导。P4在测量血清GdIgA1水平方面与KM55和HAA表现出相当的能力。第三方实验室进行的更大规模的验证集证实了P4在临床应用中的潜力。体外实验显示，P4和GdIgA1共同刺激系膜细胞可上调Wnt通路，并可能导致系膜细胞增殖，而单独使用P4或GdIgA1均不会产生这种效果。综上所述，高亲和力抗GdIgA1抗体P4的发现为有效测量GdIgA1水平提供了希望。本研究的结果表明，高亲和力抗GdIgA1自身抗体可能是由模拟GdIgA1铰链区抗原诱导产生的。此外，P4和GdIgA1共同刺激上调Wnt通路，凸显了P4的关键作用。进一步探索IgAN的分子和细胞机制可能提供有价值的见解。
