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中国中医科学院仝小林院士团队
于2024年7月24日
在Engineering（IF=10.1）
发表中医学研究
《Sanhan Huashi Formula and Its Bioactive Compounds Exert Antiviral and Anti-Inflammatory Effects on COVID-19》
散寒化湿方及其生物活性化合物对COVID-19具有抗病毒和抗炎作用
原文链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095809924003965#s0135
Keywords：Sanhan Huashi formula；Coronavirus disease 2019；Anti-inflammatory properties；Nodakenin；3C-like protease
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研究发现与亮点：
散寒化湿方通过抑制病毒侵入和促进抗炎效应来对抗COVID-19。
散寒化湿方中的强效抗病毒成分：Nodakenin，可通过靶向3CLpro蛋白酶来抑制SARS-CoV-2的复制。
重点摘要
背景及目的：
散寒化湿方（Sanhan Huashi Formula, SHHS）是一种传统中药，已在临床治疗COVID-19中显示显著效果。
COVID-19由SARS-CoV-2引起，对全球公共卫生构成重大挑战。
目前抗病毒药物存在局限性，如Omicron变种的免疫逃逸能力和药物间的相互作用。
SHHS包含20种传统中药成分，已被纳入COVID-19的诊断和治疗方案。
方法：
体外实验：使用Vero-E6细胞感染SARS-CoV-2，评估SHHS对病毒入侵和增殖的抑制效果。
体内实验：利用K18-hACE2转基因小鼠模型，通过病毒样颗粒（VLPs）暴露来评估SHHS对SARS-CoV-2进入的阻碍效果。
抗炎效果评估：使用LPS诱导的急性肺损伤（ALI）模型和RAW264.7细胞模型来验证SHHS的抗炎生物标志物水平降低能力。
化合物分析：利用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS和SPR技术鉴定SHHS中的活性化合物，并研究其抗病毒机制。
分子对接和HDX-MS：研究nodakenin与3CLpro的相互作用及其抗病毒机制。
研究结果:
1、体外实验：SHHS在Vero-E6细胞中有效抑制了SARS-CoV-2的入侵和增殖，减少了病毒载量。
2、体内实验：SHHS减少了小鼠肺部VLPs的水平，抑制了SARS-CoV-2的侵入。
3、抗炎效果：SHHS显著减轻了肺部病理损伤，降低了IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子的水平。
4、化合物分析：鉴定出308种化合物，其中包括Nodakenin，它被识别为针对3CLpro的强效抗病毒成分。
5、分子机制：Nodakenin通过与3CLpro（3CLpro（3C-like蛋白酶）是SARS-CoV-2病毒复制过程中的一个关键酶）形成氢键和疏水相互作用来抑制其活性，从而发挥抗病毒效果。
在文章的3.6节中，文章深入探讨了“散寒化湿方”（Sanhan Huashi Formula, SHHS）治疗COVID-19的抗病毒机制。
主要专注于五个关键的抗病毒靶点：hACE2、RBD、3CLpro、PLpro和TMPRSS2。这些靶点是SARS-CoV-2病毒入侵和复制过程中的关键环节。
化合物与靶点的相互作用：
hACE2和RBD的结合：研究发现，gallic acid、aegeline和apigenin等化合物能够与hACE2和RBD结合，这些化合物可能通过阻断病毒刺突蛋白与宿主细胞受体的结合来发挥抗病毒作用。
3CLpro和PLpro的抑制：gallic acid、nodakenin、marmesin、epicatechin和quercetin等化合物显示出对3CLpro的抑制活性。marmesin、scoparon和luteolin对PLpro活性有抑制作用。
抗病毒效果的体外验证：
通过在Vero-E6细胞中进行的SARS-CoV-2感染实验，验证了这些化合物的抗病毒效果，特别是Nodakenin，可通过靶向3CLpro蛋白酶来抑制SARS-CoV-2的复制，显著降低了细胞上清中的病毒载量。
结论:
SHHS通过抑制病毒侵入和促进抗炎效应来对抗COVID-19。
Nodakenin作为SHHS中的活性成分，通过靶向3CLpro蛋白酶来抑制SARS-CoV-2的复制。
本研究为SHHS治疗COVID-19的机制提供了科学依据，为中药现代化和全球化应用提供了见解。
研究结果支持进一步探索和开发SHHS及其活性成分作为COVID-19治疗手段的可能性。
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