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暨南大学药学院戴毅团队
于2024年6月22日
在Carbohydrate Polymers（IF=10.7）
发表中药学研究
《A novel strategy with in vivo characterization, extraction, isolation and activity evaluation for discovery of absorbed anti-inflammatory oligosaccharides from Zhu-Ling decoction》
用于研究猪苓汤中抗炎寡糖的一种体内表征、提取、分离和活性的新型评价策略
原文链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0144861724006489
研究发现与亮点：
1、在体内和体外分别鉴定出了猪苓汤的30个和11个可吸收的寡糖（OSs）；
2、并采用一系列方法分离鉴定了一系列−1→3-β-D-Glcp-OSs（−1→3-β-D-Glcp-OSs 是指那些以β-D-葡萄糖单元通过−1→3糖苷键连接形成的寡糖。这类寡糖可能具有特定的生物学功能，例如抗炎、免疫调节等，它们在某些中药、食品或生物制剂中可能作为活性成分。）；
3、−1→3-β-D-Glcp-OSs包括 ：laminaritriose（木耳三糖）, laminaritetraose（木耳四糖）, laminaripentaose（木耳五糖）, laminarihexaose（木耳六糖）, laminariheptaose（木耳七糖）, laminarioctaose（木耳八糖）和laminarinonaose（木耳九糖）；
4、其中，laminaritriose, laminaritetraose and laminaripentaose显著抑制LPS诱导的HK-2细胞中TNF-α和IL-6水平，并通过NF-κB和Akt/mTOR信号通路发挥显著的抗炎作用。
重点摘要
背景及目的：
猪苓汤（ZLD）是一种传统中药方剂，可用于治疗慢性肾病，但其吸收的寡糖（OSs）的结构和活性尚未明确。
本研究旨在建立一种新的策略，用于体内特征识别、提取、分离和活性评估，以鉴定猪苓汤中的抗炎寡糖。
方法：
使用UPLC/Q-TOF-MS与PMP衍生化技术，在体外和体内条件下对ZLD中的寡糖进行鉴定。
利用HPLC-HILIC-UVD-ELSD、SPHPLC-HILIC-RID、单糖组成分析、质谱和一维/二维核磁共振波谱技术，对特定寡糖进行分离和鉴定。
通过与标准物质比较，识别非还原吸收寡糖。
评估特定寡糖对LPS诱导的HK-2细胞中TNF-α和IL-6水平的影响，以及通过NF-κB和Akt/mTOR信号通路的抗炎效果。
研究结果:
1、在体内和体外分别鉴定出猪苓汤中30种寡糖（22种还原糖和8种非还原糖）和11种寡糖（7种还原糖和4种非还原糖）。
口服ZLD后血浆中11种外源Oss被鉴定（表1）
2、成功分离并鉴定了木耳三糖至木耳九糖等系列寡糖，以及蔗糖、海藻糖、棉子糖和刺云实糖。
3、吸收的寡糖对LPS诱导的HK-2细胞炎症因子TNF-α和IL-6的影响。
4、木耳三糖、木耳四糖和木耳五糖在抑制炎症因子和激活抗炎信号通路方面显示出显著的抗炎活性。
结论:
本研究通过UPLC/Q-TOF-MS和PMP衍生化技术在体外和体内分别鉴定出30个和11个寡糖，并利用HPLC-HILIC-UVD-ELSD等方法对一系列−1→3-β-D-Glcp-OSs进行了分离鉴定，包括从木耳多糖中提取的多种低聚糖。
此外，通过比较标准品鉴定了4种非还原性吸收寡糖。
研究发现特定寡糖能显著抑制炎症因子表达，并通过NF-κB和Akt/mTOR信号通路发挥抗炎作用，为发现中药中的活性寡糖提供了新策略。
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