摘要
很多准妈妈产检时因为不同原因被告知异常结果，然后去做了羊水穿刺，发现腹中胎儿检出致病性CNV，这可把准爸爸妈妈们吓得不轻。面对突如其来的抉择，有的选择将宝宝送回宝宝星球，有的选择把宝宝带到人世间。相信很多准爸爸妈妈看到这些难免伤感，不幸的是致病性CNV发生在自己宝宝身上，但幸运的是在孕期就及时发现了。无论好坏，产检的结果终归要面对，不如现在就先来学习一下相关的知识吧。
根据临床意义，可分为致病类、正常类与临床意义不明类，其中临床意义不明类又包括可能正常、可能致病及不确定。
无法排除胎儿存在单亲源二体（UPD）； 孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查（NIPS）提示异常； 超声检测提示胎儿存在结构异常或生长发育异常； 夫妻双方或一方曾发现染色体异常或有遗传疾病； 高龄产妇或有不良妊娠史或生育史； 一些临床医生认为需要行CNV检测的其他情况[1,5-7]。
目前CNV比较常见的检测方法主要分为两类，即定位分析技术和基于全基因组水平的分析平台。
（一）定位分析技术
1、实时荧光PCR检测技术
一种高通量检测CNV的方法，操作简单、耗时较短、经济效益好的特点使PCR检测成为大规模遗传关联分析的首选。缺点是，该方法不能对多等位的CNV进行准确分型，且在检测复杂的CNV时结果难以重复。
2、多重连接依赖探针扩增技术（MLPA）
通过在DNA靶序列两侧设计一对MLPA探针，杂交序列与靶序列杂交后，使用连接酶将两部分探针连接成一条核苷酸链，再使用通用引物进行PCR扩增。通过比较待测DNA与正常对照DNA的PCR产物量，来确定待测样本DNA靶序列的拷贝数。MLPA是检测CNV的“金标准”，特点是高通量、设备要求低、简单经济、快速精准。
3、基于杂交的检测技术
主要包括Southern印迹杂交技术（Southern blotting）和DNA纤维荧光原位杂交（Fiber FISH）。Southern blotting可检测各种类型的CNV，但其操作繁琐，所需DNA量较大，已逐渐被替代。FISH是直接在DNA纤维上进行荧光原位杂交的技术，是目前多等位的CNV分型较为准确的方法。缺陷是不同位点需单独设计探针，通量小，一般只用于固定基因的检测，无法区分杂合型缺失（LOH）。
（二）基于全基因组水平的分析平台
1、微阵列比较基因组杂交（aCGH）
aCGH是在全基因组水平检测CNV的常用方法之一。通过在一张芯片上用标记不同荧光素的样品共杂交，检测样本基因组相对于对照基因组的CNV，可直观地表现出遗传性疾病基因组DNA在整个染色体组的缺失或扩增。该法操作简单，处理方便，探针设计灵活，分辨率更高；但这种技术只能检测CNV，不能检测亚微观结构中的倒转和移位。
2、单核苷酸多态性微阵列技术（SNP-array）
SNP-array利用待测样本与芯片探针进行单杂交，通过比较不同样本信号强度来确定每个位点的拷贝数。特点是分辨率高，可发现大量微缺失/微重复，除CNV外还可检测UPD、LOH和嵌合体等。
3、第二代DNA测序技术（NGS）
通过测序reads（测序仪单次测序所得的碱基序列）的深度，来测定目标片段的拷贝数，可同时检测多基因CNV以及其他生物标志物。NGS技术的强项在于其可以检测各种不同类型的基因组变异，从SNP到小片段的缺失到较大片段的CNV。但是其相对昂贵，受影响因素多，这也限制了其进一步的推广与应用[8]。
2020年，美国医学遗传学与基因组学学会（ACMG）联合临床基因组资源中心（ClinGen）发布了适用于产前/产后的染色体拷贝数变异（CNV）解读和报告的技术标准，以打分方式明确了CNV致病性的评估标准。CNV的评分在不同个体间应当保持一致性，不因年龄、性别、表型等因素进行改变。
CNV致病性评估打分工具网址
（https://cnvcalc.clinicalgenome.org/cnvcalc/），根据待分析的CNV变异类型（缺失或重复），可进行选择CNV-Loss/CNV-Gain。
CNV的报告
当评分≥0.99时，CNV为致病性；当评分≤-0.99时，CNV为良性。此外，作为临床诊断时，还需要考虑CNV评分标准外的因素（如参考文献）来添加相关报告信息。若有文献提示检测结果有疾病相关性，应在知情同意的情况下在报告中提示，并告知夫妻双方可能存在的风险[9]。
参考文献(向上↑滑动查看全部）
[1] Society for Maternal-Fetal Medicine (SMFM). The use of chromosomal microarray for prenatal diagnosis[J]. Am J Obstet Gynecol, 2016, 215(4): B2-B9.
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