IF=4.5,GEO数据库+RNA-seq:探究小Cajal与膀胱癌细胞的关联

文摘   2024-12-28 18:10   陕西  

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文章标题:Small Cajal Body-Specific RNA12 PromotesCarcinogenesis through Modulating Extracellular Matrix Signaling in Bladder Cancer

中文标题:小Cajal体特异性RNA12通过调节膀胱癌细胞外基质信号传导促进癌变

发表期刊:Cancers 

发表时间:2024年1月

影响因子:4.5


研究背景


小Cajal体特异性RNA (scaRNAs)是小核仁RNA (snoRNAs)的一个特定子集,最近在多种生理和病理过程中成为关键的贡献者。然而,它们在致癌作用中的明确作用在很大程度上仍然难以捉摸。

研究思路

采用TCGA、GEO和GTEx数据集分析SCARNA12在BLCA中的表达及其临床病理意义。采用qPCR和原位杂交技术验证SCARNA12在BLCA细胞系和组织中的表达。通过RNA测序(RNA-seq)结合生物信息学分析,揭示SCARNA12和T24细胞系不同表达的BLCA患者在SCARNA12敲低后基因表达模式和功能通路的变化。然后使用单细胞质量细胞术(CyTOF)评估受SCARNA12影响的肿瘤相关细胞簇。

结果分析

1.SCARNA12在BLCA组织和细胞系中高表达
首先下载了TCGA数据集,并评估了SCARNA12在不同类型癌症中的表达水平。与正常组织相比,SCARNA12在BLCA(膀胱尿路上皮癌)中的表达明显增加。同样,在其他侵袭性癌症中,如多形性胶质母细胞瘤(GBM)、胆管癌(CHOL)和脑低级别胶质瘤(LGG)中,与正常组织相比,它也明显上调。
2. SCARNA12参与ECM信号传导和细胞周期调控
利用RNA-seq技术在转录组水平上研究了SCARNA12异常表达介导的潜在功能。本研究组收集的52例BLCA患者,根据SCARNA12的表达水平,将其分为高SCARNA12组和低SCARNA12组。火山图描绘了3051个差异表达基因(DEGs)。基于标志通路的基因集富集分析(GSEA)显示,高SCARNA12表达的BLCA患者在G2/M检查点和E2F靶点等信号通路中显著富集,这些信号通路与细胞周期相关。GO功能注释分析表明,差异上调基因与多种生物过程相关,包括细胞-细胞粘附、细胞连接、核基质、核体以及细胞周期相变GO项。同样,KEGG通路的富集结果表明,上调的差异表达基因在P53、MAPK、凋亡和细胞周期中显著富集,调节干细胞相关信号通路。

3. 基于CyTOF数据的ECM相关细胞簇富集于BLCA并高表达SCARNA12

为了进一步证实RNA-seq分析的结果,作者利用单细胞质量细胞术(CyTOF)技术在单细胞水平上评估细胞外基质相关簇与SCARNA12表达之间的相关性。从转录组队列中纳入了20例BLCA患者,包括10例SCARNA12高表达的BLCA患者和10例SCARNA12低表达的BLCA患者,用于随后的CyTOF分析。每个样本共提取5000个单细胞,使用t分布随机邻居嵌入(t-SNE)算法进行分析,并根据BLCA样本中单细胞之间不同的蛋白表达模式生成t-SNE图谱。此外,使用表型算法将高维单细胞数据划分为不同的簇,每个簇都具有标记物表达模式。

文章小结

研究发现了BLCA中SCARNA12的异常改变,并阐明了其在BLCA细胞内调节生物学能力的致癌作用。(对文章数据库和分析方法感兴趣或需要生信分析服务的老师,欢迎关注小鱼一起交流)

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