如何测定乳清蛋白乳化性

文摘   其他   2023-09-20 08:00   北京  


乳化是指将两种不相溶的液体(如水和油)通过添加乳化剂使其形成均匀的混合物。

乳清蛋白是一种具有良好乳化性的蛋白质,其乳化性主要来自于其分子结构和特性,乳清蛋白分子结构具有两个重要的特点:

(1)亲水性:乳清蛋白的分子结构中含有丰富的极性氨基酸和羟基,使其具有良好的亲水性。这使得乳清蛋白能够与水相互作用并形成水合层,从而有助于分散和稳定油脂颗粒。

(2)构象变化:乳清蛋白在不同环境条件下,如pH、温度和离子强度的变化,会导致其分子结构的构象变化。这些构象变化可以改变乳清蛋白分子表面的特性,使其能够与油脂相互作用并形成乳化体系。

乳清蛋白的乳化性可以应用于食品工业和制药工业中。在食品工业中,乳清蛋白常被用作乳化剂,用于制备乳制品、沙拉酱、冰淇淋等乳化食品。在制药工业中,乳清蛋白的乳化性可以用于制备药物微乳液、乳剂等制剂,提高药物的溶解度和吸收性。
本文介绍乳清蛋白乳化性的测试方法。


01

测试原理


制备由2%的蛋白质样品(测试溶液)和植物油组成的乳化物,通过均质,使用激光粒度仪测量每个样品生成的乳化物系列的乳化粒径大小。


02

材料、试剂、设备


1)乳清蛋白1WPH 、乳清蛋白2WPI、植物油;

2)氢氧化钠和盐酸溶液;

3)均质机、激光粒度仪。


03

测试方法


  1. 制备3000mL 2%蛋白质溶液,将溶液水合30-60分钟。

  2. 将20,50,100,150和200g植物油分别称入不同的1L烧杯中。

  3. 测量样品的pH值,并用氢氧化钠或盐酸溶液调整pH至7.00,将500 mL样品溶液转移到每个含油烧杯中。

  4. 使用搅拌器/手持搅拌器将油均匀的预分散到蛋白质溶液中,然后使用均质机,依最低油含量到最高含量的顺序进行均质,将乳化物分别收集到塑料烧杯中。

  5. 将每个乳化物转移至50 mL离心管中,转移之前进行混合,样品静置1小时。

  6. 1小时后,使用激光粒度仪测量粒径,用于比较样品粒径的典型参数是体积加权平均直径D (4,3),报告为微米(μm)。


04

测定结果如何判定?


乳清蛋白与不同重量油形成乳液,测量乳液液滴粒径分布情况,并用体积平均粒径 D (4,3) 作为衡量乳液液滴聚集程度指标。

从上图可以看出,乳清蛋白1WPH与乳清蛋白2WPI相比较,乳清蛋白2WPI乳化性更好,乳清蛋白1WPH为深度水解产品,水解导致蛋白质分子量、电荷、疏水性改变,从而影响其乳化性

与乳清蛋白1WPH - 50g oil/100g oil/150g oil/200g oil的乳液相比,乳清蛋白1WPH - 20g oil乳液粒径曲线中小峰面积较大,峰值跨度变窄,峰值位置有向左平移的趋势,乳液的体积平均粒径 D (4,3) 也相对较小。与乳清蛋白1WPH - 20g oil相比,乳清蛋白1WPH - 50g oil/100g oil/150g oil/200g oil的乳液的粒径分布存在向大粒径方向迁移的现象,D (4,3) 值较大,这可能是随着油的重量变多,乳化活性不足,不能长期维持乳滴界面稳定结构,乳滴发生了聚集融合而导致粒径增大。
乳清蛋白2WPI与不同重量的油乳化后,乳液粒径曲线中小峰面积较大,峰值跨度窄,乳液的体积平均粒径 D (4,3) 也相对较小,粒径较接近。

使用均质化和光学仪器来确定蛋白质样品的相对乳化性,从而可以帮助确定配方中特定脂肪含量。此外,乳清蛋白的乳化特性与pH值、料液中的离子强度也有关,实际工作中同样需要关注。

银河路技术创新中心(MTIC)与美国希尔玛(Hilmar)联合建立的乳清蛋白应用实验室,研究乳清蛋白物性,包括热稳定性、分散性、溶解性和凝胶性的测试;及乳清蛋白在各类食品中的应用。乳清蛋白物性测试方法和高蛋白棒、蛋白胶、RTD饮料等试样制作也发布在银河路视频号,欢迎关注。


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