方法清单：
MB2.1
Direct Immunofluorescence
描述：通过荧光标记抗体直接检测组织中的抗原。
备注：常用于免疫组织化学。
操作过程：将荧光标记的抗体应用到组织切片上，孵育并洗涤后，通过荧光显微镜观察荧光信号。在紫外光照射下，标记抗体与组织中的抗原结合，产生荧光。
Indirect Immunofluorescence
描述：使用未标记的初级抗体和标记的次级抗体检测抗原。
备注：提高检测灵敏度。
操作过程：首先将未标记的初级抗体应用于样品，与抗原结合。然后加入荧光标记的次级抗体，次级抗体与初级抗体结合。孵育后，清洗多余的抗体，通过荧光显微镜观察。
Flow Cytometry
描述：使用荧光标记和流式细胞术检测和分类细胞表面标志物。
备注：可以同时分析多个表面分子。
操作过程：将细胞表面标记上荧光抗体，然后将细胞通过流式细胞仪。细胞通过激光照射，荧光信号和细胞的大小、颗粒度被检测并记录。根据荧光强度和其他参数对细胞进行分类和分析。
ELISPOT Assays
描述：使用ELISPOT法检测分泌特异性抗体的B细胞或分泌细胞因子的T细胞。
备注：可用于单个细胞水平的检测，灵敏度高。
操作过程：将B细胞或T细胞铺在包被抗原或抗细胞因子抗体的板子上，分泌的抗体或细胞因子会结合到板上的抗原或抗体。加入酶标记的次级抗体，孵育后加入显色剂（如铬原），通过染色的斑点观察和定量抗体分泌的细胞数目。
MB2.2
Density-Gradient Separation of Lymphocytes
描述：通过Ficoll梯度离心分离血液中的淋巴细胞。
操作过程：将血液样本与Ficoll分离液混合后进行梯度离心。红细胞和粒细胞沉淀在试管底部，淋巴细胞在上方的界面形成一层。收集淋巴细胞层，进一步进行纯化以去除其他杂质。
Immunomagnetic Beads Separation
描述：通过抗体标记的磁珠分离阳性和阴性细胞。
备注：适合高效分离特定细胞群体。
操作过程：用特定抗体标记磁珠，抗体与细胞表面抗原结合。将细胞混合物通过磁性分离器，阳性细胞与磁珠结合并固定，阴性细胞则被分离出来。可通过洗涤和磁性分离多次净化细胞。
MB3.1
Recombinant Antibodies for Human Therapy
描述：通过噬菌体展示技术或哺乳动物细胞系表达Fv抗体或全长抗体。
备注：用于生产单克隆抗体。
操作过程：利用噬菌体展示技术，将编码抗体片段的基因插入噬菌体载体中，通过噬菌体展示筛选抗原特异性的抗体片段。然后，将这些抗体片段转入哺乳动物细胞系，进行扩增表达，最终生产全长抗体或抗体片段。
MB3.2
Immunoassays for Antibodies and Antigens
描述：使用放射性标记或酶标记的方法检测抗体或抗原。
备注：用于临床诊断中的抗体/抗原定量。
操作过程：将抗原或抗体吸附到固相载体上，加入标记抗体（如放射性或酶标抗体）进行反应。未结合的标记物洗掉后，通过放射计数器或酶反应显色系统定量检测结合的抗体或抗原。
MB3.3
Immunoblotting and Immunoprecipitation
描述：通过免疫印迹或免疫沉淀分析抗原的数量和特性。
备注：检测抗原的相对丰度。
操作过程：将蛋白质样品通过电泳分离，转移到膜上，加入特异性抗体与目标抗原结合。随后使用放射性或酶标记的次级抗体进行显色，显示目标蛋白的位置和丰度。免疫沉淀法则通过结合抗原-抗体复合物的沉淀来分析抗原。
MB4.1
Assays for Complement Pathways
描述：检测补体途径的活性和各个成分的功能。
备注：常用于血清和免疫检测。
操作过程：将抗体结合的红细胞加入样品，通过溶血反应检测经典补体途径和替代补体途径的活性。根据溶血程度计算补体活性（CH50或AH50）。
MB8.1
T Cell Line Assays
描述：检测T细胞对抗原的反应，通过DNA合成前体来测量其增殖。
备注：常用于淋巴组织细胞的反应性评估。
操作过程：将分离的淋巴细胞与抗原溶液混合孵育，16小时后加入3H-胸苷标记DNA合成。使用放射性计数检测细胞增殖情况，评估T细胞对抗原的反应。
MB9.1
Measuring Antibody Production - PFC and ELISPOT
描述：通过PFC法和ELISPOT法检测抗体分泌的B细胞。
备注：可同时检测B细胞和T细胞。
操作过程：PFC法：将脾细胞与抗原敏化的红细胞混合，细胞裂解形成斑块，计算斑块的数量。ELISPOT法：将细胞孵育在包被抗原的板上，加入酶标抗体检测分泌的抗体，通过显色反应检测抗体分泌细胞。
MB25.1
Assays for Circulating Immune Complexes
描述：检测循环免疫复合物，使用PEG沉淀或C1q结合检测方法。
备注：用于检测循环中的免疫复合物。
操作过程：将样品与聚乙二醇（PEG）混合，复合物沉淀后洗涤和重溶。使用C1q放射免疫分析，结合C1q检测复合物，加入放射性标记抗体定量检测。
END
道阻且长，行则将至
行而不辍，未来可期
