背景
Sysmex XN-1000V 自动血液分析仪配备多物种软件，激光、阻抗、荧光染色和荧光流式细胞术用于分析全血的 CBC、网织红细胞计数和白细胞计数，包括 5 部分白细胞差异分析。
目标
将 Sysmex XN-1000V 与西门子 ADVIA 120 并列比较，以分析健康小鼠和大鼠的血液，可以深入了解新分析仪的性能及其在药物开发研究中的使用能力。对使用这两种分析仪和手动参考方法收集的正常小鼠和大鼠血液学数据进行方法相关性分析将有助于确定使用 Sysmex XN-1000V 分析仪生成的数据的可靠性。
方法
使用 XN-1000V 和 ADVIA 120 分析仪同时分析了健康 CD-1 小鼠和 CD Sprague-Dawley 大鼠在 EDTA-k2中采集的全血样本。本研究包括约 6-9 周龄的雄性和雌性小鼠以及约 7-9 周龄的雄性和雌性大鼠。还进行了 WBC 分类白细胞分析和红细胞压积 (PCV) 测量的手动参考方法。使用 EP Evaluator 版本 11.2（Data Innovations LLC，美国佛蒙特州南伯灵顿）进行方法比较统计分析。
结果
幼年小鼠和大鼠的大多数血液学参数实现了中等至优秀的相关性，其中大多数显示出非常好至优秀的相关性，并且对于单独分析的队列和合并的队列数据而言，偏差较低（<11.0％）。
结论
Sysmex XN-1000V 血液学分析仪提供的结果与西门子 ADVIA 120 获得的结果相当。我们发现 Sysmex XN-1000V 血液学分析仪适合用于大鼠和小鼠的药物开发研究。
用血量
一些自动血液分析仪的主要限制是需要大量的全血样本进行分析。啮齿动物（尤其是小鼠）的样本量可能非常有限，非终末静脉采血只能采集约 100 μL 全血，而尸检时的终末采血则总共只能采集 500–800 μL EDTA 全血。大鼠和小鼠采集的血液量在很大程度上取决于动物大小和静脉采血技术。在药物开发过程中，通常需要在各种平台上进行多项测试，以对每种测试样品进行全面评估（临床化学、血液学、生物标志物分析、药效学、药代动力学等）。由于有限的血液量通常无法进行所有测试，因此减少血液学仪器的样本量要求是可取的。4Sysmex XN-1000V 标准分析模式需要至少 88 μL 全抗凝血进行血液学分析，而使用西门子 ADVIA 120 进行分析所需的最低体积为 175 μL。
结果比对
在本研究中分析健康啮齿动物的血液时，Sysmex XN-1000V 表现出与西门子 ADVIA 120 一致的、可比的性能，对小鼠和大鼠的 CBC 和网织红细胞计数具有低偏差和中等至非常好的相关性。虽然在不同时间收集的动物组之间存在一些细微差异，但所有参数的相关性值总体上都在中等至优秀的范围内，大多数都在非常好至优秀的范围内。尽管高度相关，但与 PCV 相比，ADVIA 120 HCT 值对小鼠（6.7%）和大鼠（6.1%）均呈正偏差，而 Sysmex XN-1000V HCT 值对小鼠有 2.8% 的负偏差，对大鼠有 2.5% 的负偏差，相对于 ADVIA 120 HCT 值，小鼠和大鼠的负偏差分别为 9.4% 和 8.1%。
Sysmex XN-1000V 与 ADVIA 120 相比，小鼠和大鼠的 MCV 值分别为 5.7% 和 3.5%，结果也呈负偏差。这些偏差可能与这些参数的测定方法有关。Sysmex XN-1000V 通过直接测量 RBC 阻抗来确定 HCT 并计算 MCV，而 ADVIA 120 使用流式细胞术测量 MCV 并计算 HCT。Sysmex XN-1000V 和 ADVIA 120 分析仪（小鼠和大鼠分别为 4.2% 和 1.5%）之间 HGB 的持续轻微负偏差被认为是与方法有关的，因为 Sysmex XN-1000V 使用无氰化物的 SLS 试剂，而 ADVIA 120 使用氰化物高铁血红蛋白方法。
即：Sysmex XN-1000V HCT 偏小，MCV偏小，HGB偏小。
白细胞分类
（ADVIA更优）
与 ADVIA 120 的结果相比，Sysmex XN-1000V 在小鼠和大鼠样本的自动分类白细胞计数方面表现良好。虽然中性粒细胞和淋巴细胞计数显示出高相关值和低偏差值，但单核细胞计数显示出很小的相关性并且偏差百分比增加。虽然嗜酸性粒细胞计数显示出仪器之间的良好相关性，但与手动分类计数的相关性较低。健康的啮齿动物自然具有高淋巴细胞和中性粒细胞计数，而单核细胞、嗜酸性粒细胞和/或嗜碱性粒细胞的数量非常低。正如在早期 Sysmex 仪器的评估中所观察到的，啮齿动物的单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞数量低可能导致手动分类白细胞计数与两种分析仪的结果之间相关性较低和偏差增加。与仪器计数的大量细胞相比，技术人员进行手动分类白细胞计数时计数的细胞数量有限，这也是导致手动和自动仪器之间相关性较低的原因之一。用于确定白细胞分类计数的方法（包括单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量）可能在观察到的差异中起着重要作用。为了校正单核细胞计数的偏差，Sysmex 软件中配置了一个校准因子，可以进行调整以允许仪器之间更好地相关。此外，反应性淋巴细胞、未成熟粒细胞和淋巴母细胞中存在的荧光增加可能会导致 Sysmex 分析仪错误地增加单核细胞计数，从而导致与手动和西门子 ADVIA 120 计数的相关性较差。这些人群的相关值较低和偏差值较高可能是由于存在的数量少。由于分析的样本中数量极少，本研究未涉及嗜碱性粒细胞计数。
用血量
稳定性研究证实，采集后在 4°C 下保存长达 72 小时的血液样本中，可以分析 RBC、HGB 浓度和网织红细胞计数。在本研究中，我们在室温下观察到大鼠血液采集后 12-24 小时 MCV 显著增加。然而，在 4°C 下保存的大鼠血液样本中，大多数血液学分析物的变化在分析上是可接受的并且没有显示出毒理学相关性。
局限性
疾病模型和其他基因改造或治疗过的小鼠和大鼠中的评估将提供更全面的评估，更好地涵盖可报告范围，并可能有助于加强相关值。分析这些动物还可能增加健康野生型动物中存在的少量白细胞的数量和类型，例如单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。增加动物数量并在每台分析仪上对每只动物进行重复分析也可能有助于评估系统性和随机误差，并进一步评估分析仪之间的恒定和比例偏差。
结论：Sysmex XN-1000V 表现出与西门子 ADVIA 120 结果和手动显微镜分析相当的性能和可接受的相关性。在我们的研究中，Sysmex XN-1000V 易于使用，仅需少量血液样本即可用于啮齿动物，并提供了生物制药行业动物全血细胞计数中经常使用的重要信息。基于这些结果，Sysmex XN-1000V 适用于支持在多种药物开发研究中使用大鼠或小鼠进行的研究。
