单位|东莞市中西医结合医院
有核红细胞(NRBC),就是指那些尚未脱核的红细胞。生理性情况下,出生一周以内的新生儿外周血可见少量,而正常人外周血中基本不会出现有核红细胞。
当出现病理性情况,如溶血性贫血,骨髓增生性疾病,急、慢性红白血病时,人体外周血中才可见有核红细胞。
患儿,女,8小时,2024年3月26日因“发现气促1小时”入院。
目前考虑诊断:中医诊断:初生儿喘促(吸入秽气)。西医诊断:1、新生儿肺炎;2、新生儿病理性黄疸。
入院后行第一次“全血细胞分析+网织红细胞计数”,发现白细胞(WBC)计数异常增高,为62.79×10^9/L,DIFF通道散点图异常,淋巴细胞、单核细胞通道融合,见图1。
图1 全自动血液细胞分析仪A检测结果原始图
我们对该标本进行涂片镜检,发现低倍镜视野中的红细胞之间分散着大量有核的白细胞?
因为低倍镜下无法看清细胞微细结构,选择一个区域升高倍数观察,高倍镜下可见大量有核红细胞(中幼红细胞、晚幼红细胞),见图2、图3。
图2 血涂片低倍镜20×(瑞-吉染色)
图3 血涂片高倍镜100×(瑞-吉染色)
1)有核红细胞(中幼红、晚幼红);2)淋巴细胞。
对该标本采用两种方法进行校准:1)人工镜检,通过有核红细胞校准公式校正;2)使用全自动血液细胞分析仪B,有核红细胞通道校准。
1、人工镜检结果,见表1。
表1 人工镜检结果
根据有核红细胞校准公式:。
(Y为白细胞分类计数时,100个白细胞中有核红细胞的数量);计数得出校正后白细胞数应为:26.83×10^9/L。
2、使用全自动血液细胞分析仪B,有核红细胞通道校准,见图4、图5。
图4 全自动血液细胞分析仪B检测结果原始图
图5 嗜碱及有核红细胞散点图(1、NRBC区域,2、WBC区域)
全自动血液细胞分析仪B分析结果显示,该标本白细胞计数为28.42×10^9/L,有核红细胞绝对值(NRBC#)计数为39.904×10^9/L,有核红百分比(NRBC%)为140.41/100WBC。
嗜碱及有核红细胞散点图WNB显示,左侧NRBC区域出现一大团阴影。人工镜检结果与全自动血液细胞分析仪B测定结果基本一致,仪器法与手工法偏差(%)≤7.5%。
最终采用手工录入WBC人工分类结果和仪器法白细胞计数结果审发报告。
1)根据厂家提供的全自动血液细胞分析仪B操作手册可知,检测有核红细胞的线性范围:NRBC#为0.00至20.00×10^9/L,NRBC%为0.0至600.00/100WBC。
为了验证该结果的可靠性,我们再对该标本进行以1:1的方式稀释,取得检测结果见图6。
图6 全自动血液细胞分析仪B检测稀释标本原始结果(1:2)
我们发现稀释后的标本乘以稀释倍数后,NRBC计数为41.588×10^9/L。
稀释模式NRBC%为143.51/100WBC,全血模式NRBC%为140.41/100WBC,结果基本吻合。
2)后续追踪该患者情况,2024-3-28下午行第二次血常规检测,全自动血液细胞分析仪A检测结果,见图7。
图7 全自动血液细胞分析仪A检测该患者3月28日血常规原始结果图
患者白细胞计数下降至15.98×10^9/L,白细胞五分类正常。2024-03-29我们使用全自动血液细胞分析仪B复检该患者3月28日的血常规标本,检测结果见图8。
图8 全自动血液细胞分析仪B检测该患者3月28日血常规原始结果图
两天结果比较见表2(全自动血液细胞分析仪A为国家室间质评通过靶机)。
表2 全自动血液细胞分析仪A、B检测患者3月28日血常规结果比对表
我们再次对该标本涂片进行瑞吉染色,与3月26日的人工镜检结果对比,发现镜下有核红细胞明显减少,1-3/HP,与仪器检测的结果符合,见图9、图10。
图9 血涂片低倍镜20×(瑞-吉染色)
图10 血涂片高倍镜100×(瑞-吉染色)
3)黄海丽等研究表明[1],全自动血液细胞分析仪稳定性试验结果显示,血常规标本在48h内测定结果稳定,即使日常工作中标本未能及时送检,也不影响NRBC的检验结果。
该病例3月28日送检的血常规标本,在28日采用全自动血液细胞分析仪A的检测结果与29日采用全自动血液细胞分析仪B检测的结果比较;
(全自动血液细胞分析仪A、B仪器间可比对实验通过,偏差要求:WBC不超过±7.5%、RBC不超过±3%、HGB不超过±3.5%、PLT不超过±12.5%、HCT、MCV不超过±3.5%)[2],
我们发现白细胞比对不通过,CV>7.5%,主要是因为有核红细胞干扰,发现两者最大的差异表现在淋巴细胞计数。
全自动血液细胞分析仪B通过特殊试剂成分的作用裂解红细胞,DIFF通道通过识别白细胞的体积、大小、复杂程度以及核酸含量,把信号差异处理成细胞的三维空间,实现了主要白细胞亚群区分,而WNB通道则实现了嗜碱性粒细胞、有核红细胞分类。
淋巴细胞体积较小,核质比高,而核酸含量较少。有核红细胞通过WNB通道溶血素作用形成裸核,其大小与淋巴细胞接近,产生的荧光信号与白细胞产生的荧光信号相似,在DIFF/WNB通道干扰淋巴细胞、单核细胞分类,造成白细胞计数的假性增高及淋巴细胞计数假性增高。
全自动血液分析仪检测NRBC具有操作简单、重复性好等优点,能有效避免NRBC对检验结果的干扰。
目前我国对NRBC检测缺乏有效的实验室质量控制,同时市面上部分型号全自动血液分析仪可能不具备NRBC检测功能,所以全自动血液细胞分析仪仍无法取代显微镜手工镜检。
当血液中存在大量NRBC,白细胞分类受到严重干扰时,仍需要手工纠正白细胞计数[3]。
而人工镜检计数往往受技术人员的能力水平、主观因素、观察区域(部位)等因素影响,其操作复杂。重复性差,非常不易标准化。
人工镜检联合全自动血液分析仪检测NRBC能够减少检测的误差,为临床疾病诊断与治疗提供准确的检测数据。
修改后的案例标题跟案例内容仍然是词不达意,“过山车”是有忽高忽低的一种落差,而本案例中白细胞从高到低,是呈现降低趋势的。
患者为急性呼吸系统疾病,引起RBC代偿性增加,导致RET、NRBC急剧增加,经消炎解痉等治疗,呼吸得以改善,NRBC自然会下降;
案例分析中“白细胞计数迅速从62.79×10^9/L下降至15.98×10^9/L”,比较无意义,直接描述当日的WBC结果便可。
案例经过主要描述对WBC偏差的纠正措施,案例分析主要对全自动血细胞分析仪检测NRBC可靠性和稳定性的验证,通过对比A、B通道结果,反映出全自动血细胞分析仪对NRBC的应用效果;
但案例总结中未对全自动血细胞分析仪的应用效果作出说明,所以应在案例总结中着重强调,并与手工计数、人工镜检相辅相成,从而通过单个案例反映整体。
本案例立意尚新,但标题与案例内容不统一,使主题不明确、逻辑稍显混乱,应修改标题加以纠正,可更改为类似“白细胞计数急剧增加元凶之-----有核红细胞”的标题。
参考文献
[1]黄海丽,刘小柳,肖昭君,邓玉容,张秀明.BC-6900全自动血液细胞分析仪检测外周血有核红细胞的准确性分析[J].检验医学与临床,2021,(05):607-610.
[2]中华人民共和国卫生部.WS/T406 :临床血液学检验常规项目分析质量要求,2024.
[3]何逸琳,边春红,郭胜香,郑文伟,王荣祺.17例有核红细胞存在对白细胞计数干扰的原因分析[J].标记免疫分析与临床,2022,(03):535-540.
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编辑:李玲 审校:陈雪礼