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AndrewG.Burton,BVSc,DACVP,ClinicalPathologist
IDEXXLaboratories,Inc.
NorthGrafton,Massachusetts,USA
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评估血小板的方法
眼观血涂片是准确评估血小板的重要部分。血小板（尤其是猫的血小板）在静脉穿刺时容易活化，导致凝集甚至形成血凝块，从而造成血小板浓度假性偏低（假性血小板减少症）。应始终评估血涂片以确认血小板浓度并评估血小板形态，这可能为潜在疾病或治疗效果提供重要线索。
混合均匀的EDTA抗凝血是评估血小板的首选样本。
为尽量减少静脉穿刺时的血小板活化，建议使用适合动物的最粗静脉和针头采血；但经验丰富的抽血者对猫进行颈静脉穿刺时，针头粗细可能不会对血小板凝集和浓度产生重大影响。此外建议在不调整针头方向的情况下做无创伤静脉穿刺。EDTA管应按照厂商指导进行加样，加样后立即轻轻上下倒置10次，以确保样本充分混合。应检查管内是否有明显的血凝块，可用棉签的木质端搅拌样本，以进一步评估是否有血凝块。
精心制备的高质量血涂片对于准确评估血小板浓度和形态至关重要。血涂片应使用新鲜全血或混合均匀的EDTA抗凝血。应使用低倍和高倍物镜评估血涂片。在低倍镜下，浏览血涂片的羽状缘和体部，观察有无大块血小板凝集或纤维蛋白凝块。血小板计数和血小板形态学评估在1000倍放大。
血小板浓度可通过没有血小板凝集或血液凝集的制备良好的血涂片上估算。为了进行估算，可在100倍物镜视野中统计单细胞层的血小板数量。重复此步骤5-10次，将统计的血小板数除以检查的视野数，得出平均每个100倍物镜视野的血小板数量。单细胞层的一个血小板约代表15000个血小板/μl。因此将每个100倍物镜视野中血小板的平均数量乘以15000，即可得出血小板的估计值。
血小板凝集
形态外观
血小板减少症的特征是没有任何血小板凝集和在试管内没有任何血凝块的情况下，单细胞层血小板数量减少（犬猫每100倍物镜视野通常少于10个血小板）（图19.2）。注：可能有必要通过干净静脉穿刺采集的新鲜全血制备的血涂片进行评估，以避免血小板凝集影响判读。
临床考虑因素
血小板减少必须通过血涂片评估来验证，以排除血小板凝集的可能。如果确认存在血小板减少，有四种主要机制可能导致病理性血小板减少。注：单个动物血小板减少可能由多种机制导致：
● 破坏：最常见的是免疫介导性血小板减少症（ITP）。对于犬猫，ITP比其他机制更容易导致严重的血小板减少（血小板<10000-30000/μl）。
● 骨髓生成减少：考虑药物/毒素暴露，包括化疗药和雌激素（内源性或外源性）等；传染病（包括犬立克次体病和猫逆转录病毒病）；肿瘤；以及骨髓纤维化。
● 血小板消耗：DIC、蛇毒、血管炎、肿瘤和出血。
● 脾隔离：可能与接触药物/毒素以及浸润性疾病和脾功能亢进有关。
血小板减少常表现为自发性出血，尤其是引起皮肤瘀斑和粘膜出血（图19.3）。血小板浓度为40000/μl时，经常会出现自发性出血；但血小板减少症的出血倾向具有非均匀性，即有些病例可能会在更高浓度时出现，而有些病例血小板浓度低于30000/μl时也不会出现自发性出血。
图19.1血涂片，猫，100倍物镜。大量血小板凝集。
血小板减少
形态外观
通常出现在玻片的羽状缘，但也可能出现在血涂片的体部。血小板团块的大小不一，有的很小（3-5个血小板），有的则由数十个甚至数百个血小板凝集而成（图19.1）。
临床考虑因素
● 假性血小板减少症的常见原因（猫血液样本中高达71%）。
● 应使用棉签的木头端来评估血样中是否有血凝块。
● EDTA是评估血小板的首选抗凝剂。对于犬，枸橼酸盐比EDTA更容易发生凝集。与室温保存的样本相比，冷藏样本（4°C）更容易发生凝集，无论使用哪种抗凝剂。犬极少发生EDTA依赖性假性血小板减少症。
● 血样试管中的血小板凝集会随着时间推移而解离，24小时后重新检测有血小板凝集的样本可能会得到更准确的浓度。
图19.2血涂片，犬，100倍物镜。血小板减少。注意视野内的单个血小板。
图19.3因免疫介导性血小板减少症导致的明显血小板减少（血小板浓度<5000个/μl）的犬出现粘膜出血和瘀斑。
血小板增多
形态外观
血小板增多症患者的血涂片中单细胞层血小板数量增多，每个100倍物镜视野中的血小板通常超过50个（图19.4）。血小板通常形态规则，也可能出现血小板凝集。注：血小板浓度处于参考范围内的血小板凝集可能会掩饰血小板增多—一定要将自动血液分析仪测得的血小板浓度与血涂片评估的凝集程度综合分析。
临床考虑因素
血小板增多本身通常不会导致临床症状或疾病，但潜在病因可能会导致临床症状或疾病。血小板增多分为原发性和继发性，继发性血小板增多比原发性更常见。
原发性血小板增多症
● 骨髓增生性疾病，骨髓血小板产生异常增多。
继发性血小板增多症
● 肿瘤：通常是导致犬血小板增多的最常见原因。癌（尤其是移行细胞癌）和圆形细胞瘤（尤其是淋巴瘤和肥大细胞瘤）最常见。急性巨核细胞白血病病例中也可能出现血小板增多。
● 炎症：主要由IL-6介导。通常与犬的免疫介导性疾病有关。
● 缺铁性贫血：缺铁似乎可通过独立于促血小板生成素（TPO）的过程来增加血小板生成。
● 脾收缩或脾切除：循环中30%的血小板储存在脾脏中。脾收缩（如肾上腺素兴奋）可引起一过性血小板增多症，并在数分钟至数小时内消退。脾切除术也可能导致血小板增多，通常在术后2-3个月内消退。因脾脏肿块而进行脾脏切除术的术后继发血小板增多与犬高凝血状态有关。
● 药物接触：包括长春新碱、糖皮质激素和肾上腺素。
血小板增多症还可能与假性高钾血症有关，假性高钾血症的特点是血清中钾浓度的升高大于血浆中钾浓度的升高，这是因为血小板在凝集过程中释放了钾。
图19.4血涂片，犬，100倍物镜。血小板增多。
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