广东工业大学孙建霞教授、暨南大学理工学院白卫滨教授在Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题目为“Covalent Interactions of Anthocyanins with Proteins: Activity-Based Protein Profiling of Cyanidin-3-O-glucoside”研究论文（花青素与蛋白质的共价相互作用：基于活性的花青素-3-O-葡萄糖苷蛋白质分析）。摘要： 花青素是一种常见的天然色素，具有多种生理活性，传统观点将其作用的分子机制归因于非共价相互作用影响信号通路。然而，这忽略了其苯并吡喃骨架的性质，该骨架易与蛋白质的富电子基团发生反应。本文，我们利用基于活性的蛋白质分析技术，通过之前的合成路线对花青素-3-O-葡萄糖苷 (C3G) 进行修饰，并制备了共价结合探针 (C3G-Probe) 和非共价光亲和探针 (C3G-Diazirine)。通过比较两种探针与整个HepG2细胞蛋白质组的标记情况，发现了C3G与蛋白质的共价结合特性。我们进一步探索了其在HepG2和HeLa细胞中的靶蛋白和富集途径。Western印迹分析进一步证实了C3G与四种靶蛋白的共价结合：胰岛素降解酶，金属阳离子转运体ZIP14，精子细胞核周RNA结合蛋白和胱抑素-B。通路分析显示，C3G 的共价靶标集中在代谢通路和几种核糖核蛋白复合物中，这些复合物也同时富集。这项研究的结果为天然活性分子 C3G 与蛋白质的相互作用提供了新的见解。研究结果：Figure 1. C3G fishing protein targets and probes characteristics based on ABPP.基于 C3G 的活性探针的合成Figure 2. Synthetic routes of C3G-Probe and C3G-Diazirine.C3G/C3G-探针共价结合靶蛋白Figure 3. Labeling protein effects of the two probes and the binding conditions of C3G-Probe.C3G探针的生物活性和原位分布Figure 4. Comparative verification of the properties of C3G-Probe and C3G.C3G探针在HepG2细胞中的靶蛋白鉴定Figure 5. Identification of covalent targets of C3G-Probe in HepG2 cells.HeLa 细胞中 C3G 探针的靶蛋白鉴定Figure 6. Identification of covalent targets of C3G-Probe in HeLa cells.C3G 探针蛋白命中的通路分析Figure 7. Pathway analysis and binding mode of C3G labeled proteins.原文链接：https://doi.org/10.1021/acs.jafc.4c03869
