2024年12月29日，发表在《Tropical Journal of Natural Product Research》上的一项研究在体内和计算机模拟中检验欧芹叶馏分作为抗脱发剂的活性。在体内研究了欧芹叶馏分刺激毛发生长的能力，使用 LC-MS 分析了馏分的化学成分，并在计算机模拟中研究了化合物与雄激素受体结合的能力。
此前，西班牙已根据经验使用 Petroselinum crispum 叶子来治疗脱发，Petroselinum crispum 的潜在抗脱发作用已通过计算机模拟进行了研究。使用 KNApSAcK 网站进行的化合物追踪已从 Petroselinum crispum 中鉴定出总共 24 种化合物，其中 6 种化合物被证明与雄激素受体结合并与二氢睾酮竞争。需要进一步研究以更详细地调查欧芹叶作为抗脱发剂的潜力。
研究设计：
用 96% 乙醇浸渍法提取欧芹（Petroselinum crispum）叶子干粉 (1 kg)。提取 1 千克叶子干粉得到 100 克提取物（10% 产率）。液液萃取后得到 214 克乙酸乙酯提取物（21.5% 产率）。馏分的分馏得到 20 个馏分，经薄层色谱分析后可得到 7 个最终馏分（P1、P2、P3、P4、P5、P6 和 P7）。
毛发生长促进活性测试采用 Tanaka 的方法进行。将兔子背部的毛发剃成十个方格，右侧五个，左侧五个，用记号笔引导。每个方格大小为 2 x 2 cm2，彼此间隔 1 cm。
将兔子分成 10 组，处理如下：P1 涂抹组分 1 (15%)，P2 涂抹组分 2 (15%)，P3涂抹组分 3 (15%)，P4 涂抹组分 4 (15%)，P5 涂抹组分 5 (15%)，P6 涂抹组分 6 (15%)，P7 涂抹组分 7 (15%)，KN 涂抹Na-CMC (阴性对照)，KP 涂抹米诺地尔 (阳性对照)，KNF 作为正常对照，不进行任何处理。用刷子将测试样品制剂涂抹在兔子背部两次。在三个星期内，每天早上和傍晚在兔子背部涂抹。在第 3、6、9、12、15、18 和 21 天测量毛发长度，在第 22 天测定毛发重量。
研究结果：
1、对毛发重量的影响
欧芹叶乙酸乙酯馏分在治疗 21 天后对毛发长度的影响如表 2 和图 9 所示。
第 21 天，与 KNF（阴性对照）和 KN（正常对照）组相比，P2、P3、P4、P5、P7 和 KP（米诺地尔阳性对照）组兔子的毛发长度显著增加。这表明这些馏分具有促毛发生长作用。
用欧芹叶乙酸乙酯不同馏分治疗兔子的毛发长度
其中，馏分 P2 和 P4 表现出最高的促毛发生长作用，这两组的毛发长度分别为 1.10 ± 0.02 毫米和 1.23 ± 0.01 毫米。这些值与 KP（米诺地尔阳性对照）组获得的值相当，后者的毛发长度为 1.16 ± 0.02 毫米。
用欧芹叶乙酸乙酯不同馏分治疗兔子的毛发长度
2、对毛发重量的影响
表 3 和图 10 显示了用欧芹叶的乙酸乙酯级分处理后兔子的毛发重量。处理 21 天后，P1、P2、P4、P5、P7 和 KP （米诺地尔阳性对照）组与 KNF （阴性对照）组相比，毛发重量显著增加。
用欧芹乙酸乙酯部分处理后的兔子毛发重量
用欧芹乙酸乙酯部分处理后的兔子毛发重量
这表明 P1、P2、P4、P5 和 P7 级分具有促进毛发生长的活性。同样，P2 和 P4 馏分的毛发重量最高，分别为 0.125 ± 0.02 g 和 0.10 ± 0.02 g，与 KP （米诺地尔阳性对照）组兔子的毛发重量（0.091 ± 0.01 g）没有差异。
米诺地尔和部分馏分化合物与雄激素受体的结合能比
进一步计算机模拟研究了这些馏分。通过 LC-MS 分析鉴定的化合物与雄激素受体进行分子对接。馏分 2（P2）和 4（P4）中化合物最佳构象的分子对接预测以及结合能比。
化合物Paeonilactone C1和米诺地尔与雄激素受体活性位点的分子互作图
研究发现，欧芹叶的馏分 2 和 4 中有 3 种生物活性化合物在对接中的得分低于天然配体（米诺地尔），还有一种化合物的得分高于天然配体（产生的结合能越低，配体-受体复合物的稳定性越高）。
研究结论：
本研究证实了欧芹叶的乙酸乙酯馏分具有促进毛发生长的活性，其中馏分 2 和 4 表现出最高的促进毛发生长的活性，可与标准抗脱发药物米诺地尔相媲美。
液质联用分析仪（LC-MS）分析从馏分 2 和 4 中鉴定出许多化合物，其中化合物芍药内酯-C1 在计算机模拟中显示出与雄激素受体的最小结合能比（最大亲和力）。有鉴于此，欧芹叶某些馏分可以开发成生发剂，用于治疗和/或预防脱发。
参考文献：Hasanuddin, S., Agustina, Gozali, D., Arba, M., Mustarichie, R., & Isrul, M. (2024). In Vivo and In Silico Evaluation of Petroselinum crispum Leaf Fractions as Anti-Alopecia. Tropical Journal of Natural Product Research (TJNPR), 8(12), 9537 – 9546.
