背景：肉毒毒素注射虽然十分普及，但关于反复使用后注射针头尖端是否以及如何变形的研究十分匮乏。
目的：研究在面部肉毒毒素注射过程中，使用三种常用针头规格（30G、31G和32G）进行连续注射（3次、5次和10次，次 = pass）后，针头尖端的变形程度。
方法：针对四种不同的美容适应症进行肉毒毒素注射。每次注射后，使用飞利浦XL-30扫描电子显微镜对针头进行成像。图像使用ImageJ图像分析软件进行处理。
结果：供研究了45个针头尖端。比较不同面部注射区域，注射10次后针头尖端的变形百分比存在统计学显著差异（p=0.044）；其中，眉间注射后的针尖受损最大（38.4%），其次是外眦（27.9%）、前额（27.5%）和中面部（23.1%）。无论目标面部区域，3次注射后的平均针头变形百分比为14.8%，5次注射后为19.6%，10次注射后为29.2%，p<0.001。针头尺寸越小，受损百分比越小。
结论：建议5次注射后更换针头，以减小针头变形，提高注射精度。
图1. 电子显微镜成像，30G针头：对照（左），10次眉间注射后（中），针头尖端表面受损区域用红色框标出（右）。
针尖受损百分比：是一个用于量化针头尖端在多次注射后发生变形程度的指标，它通过对变形区域进行面积测量和百分比计算得出，并进行了标准化处理和统计分析。
注射次数（pass）界定：使用同一个针头在患者面部的同一区域进行的单次插入和注射操作。
图4. 电子显微镜成像，30G针头，经过5次中面部注射。
讨论
电子显微镜成像技术已广泛应用于多种医疗环境中的针头研究，包括针灸、牙科手术和脊髓麻醉等。据作者所知，本研究是首次利用电子显微镜成像技术探究面部肉毒毒素注射后针头变形的已发表研究。研究结果显示，无论针头大小，多次注射后，针头尖端均会发生越来越明显的变形。电子显微镜能够检测到肉眼无法观察到的针头尖端微观结构损伤。
统计分析显示，治疗眉间纹（GFL）导致的针头尖端机械损伤最为显著。这可能是因为治疗眉间纹需要通过光滑皮肤将肉毒毒素注射到致密肌肉中。相比之下，治疗鱼尾纹（LCL）和额横纹（FHL）注射层次较浅，且针对的肌肉组织较为松散；而用于改善肤质的中面部注射则针对真皮层。
就针头尺寸而言，观察到最小的32G针头尖端变形程度最小（包括变形百分比和受损区域表面积），其次是31G和30G针头。尽管这一趋势未达到统计显著性，但仍值得注意，因为人们通常会认为表面积最小的针头最不可能承受皮肤穿透时的机械损伤和剪切应力。因此建议，肉毒毒素注射时使用直径较小的针头。
基于这些发现，建议进行面部肉毒毒素治疗时，在3-5次注射后更换针头。通过更换针头，可以减少穿透皮肤所需的力度，从而提高注射精度。为确保安全和效率，这可能需要将肉毒毒素分装到几个带有针头的不同注射器中。有人可能认为，重复使用同一针头可以节省成本并减少环境负担。但鉴于本研究所显示的针头损伤程度，还是建议在3-5次插入后使用新针头。随着肉毒毒素用于改善肤质的超适应症治疗日益增多，本研究的结果在临床上的重要性日益凸显。已有报道显示，通过在面部以网格状分布进行多次小剂量（约0.05mL）皮内肉毒毒素注射，可以改善毛孔大小、油性皮肤、痤疮/酒糟鼻和多汗症等问题。但相关治疗方案均未提供关于注射者在治疗过程中应多久更换一次针头的指导。
肉毒毒素注射深度的精确性可以对治疗效果产生影响。例如，一项关于额横纹（FHL）的半脸治疗研究显示，深部肌肉内注射对面部运动的影响更为显著，而浅部注射对额肌的影响较小。将变形的针头刺入皮肤所需的力量增加，会妨碍注射者对针头尖端放置深度的精确控制。在治疗眉间纹时，如果使用钝化的针头，注射者可能会不小心将针头推得更深，从而将药物输送到交错的额肌或提上睑肌中。
值得注意的是，用作参照的新针头在未进行任何皮肤注射前就已显示出一定程度的变形。这可能是由于针头生产、运输和处理过程中对针头表面造成了一些微小损伤。当然，这超出了医疗专业人员的控制范围，但也是考虑多次注射对针头完整性影响的另一个理由。
本研究的局限性在于，并未选择在同一患者身上完成所有注射，而是选择用于多名患者的针头。虽然这种做法可能会增加皮肤厚度方面的变异性，但更切合实际。更重要的是，从多名患者处收集针头（而非在高度控制的实验室环境中）更能真实反映大业务量临床美容实践中的日常操作环境。另一项不足是，受研究经费所限，分析的针头数量较少。此外，本研究未测量患者的客观疼痛评分，这无疑是未来研究的一个方向；据推测，使用同一针头进行多次注射会增加患者的不适感。
本研究结果支持了一个显而易见的事实——针头穿刺患者皮肤的次数越多，所受到的机械损伤就越大，针头的材料完整性就越差。据作者所知，本研究首次利用电子显微镜为肉毒毒素注射后针头尖端变形提供客观证据。当注射部位在肌肉内且连续穿刺超过三次时，对针头的机械损伤最为严重。本研究旨在提示注射人员认识到肉毒毒素注射对针头变形的影响，考虑重复使用针头对临床操作的影响，特别是对注射精度的影响。
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