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WNT 信号通路靶向治疗的药物研发进展

文摘 2024-10-22 06:35 上海

WNT 信号通路在疾病发生发展中起着重要重要那，目前靶向 WNT 信号通路的药物研发进展如何呢？本文将详细介绍 WNT 信号通路作用机制与药物研发和临床进展。

1. Wnt 信号通路发现背景

20 世纪 80 年代初，当果蝇的重要发育基因wingless被发现时，Wnt 信号传导首次被发现。同时， Int-1 （一种哺乳动物wingless同源基因）在鼠乳腺肿瘤病毒诱导其转录激活时被确定为恶性肿瘤的驱动基因。通过wingless和Int-1，创建了一个组合名称“Wnt”。自发现以来的四十余年里，Wnt 介导的信号传导已被广泛研究，揭示了其在调节多种细胞过程中进化上保守的作用，包括胚胎发育、组织稳态和细胞命运决定。

Wnt 信号传导由 Wnt 配体、卷曲受体（FZD 家族）、辅助受体、β-catenin破坏复合物、β-catenin/转录伙伴和其他调节成分组成。Wnt 是一种分泌配体，通过其受体和下游效应器介导自分泌和旁分泌信号转导。Wnt配体/受体的细胞内下游信号传导根据其依赖性大致分为β-catenin依赖性信号传导（也称为经典Wnt信号传导）和β-catenin非依赖性信号传导（也称为非经典Wnt信号传导） β-catenin是Wnt 信号传导的中心效应子（图 1）。然而，由于 Wnt 信号传导的冗余性和复杂性，在许多生物学背景下，精确的工作 Wnt 配体/受体对仍然难以捉摸。

下面简要描述了 Wnt 信号转导，对其的理解在靶向策略的开发中起着关键作用（图 1）。

图1. Wnt信号传导及其在癌症中的改变。

1.1. Wnt 配体和受体

迄今为止，在哺乳动物系统中已鉴定出19种分泌型Wnt配体和超过18种Wnt受体/共受体。Wnt 配体及其受体/共受体的不同组合在不同的生理环境中发挥作用。Wnt 配体是脂质修饰的糖蛋白。Wnt 的细胞外运输需要棕榈酰化，这是一种由蛋白质丝氨酸 O-棕榈酰转移酶PORCN介导的脂质修饰。棕榈酰化的 Wnt 配体与 Wntless 结合，并从高尔基体转运至细胞膜进行分泌。分泌的 Wnt 被 FZD 受体家族识别。这些 G 蛋白偶联 FZD 受体充当主要 Wnt 受体并在细胞内转导 Wnt 信号。人类中有十种 FZD 受体。此外，LRP5/6 结合 FZD 并充当典型的共受体。此外，还存在多种 Wnt 信号调节剂，RNF43、ZNFR3 是跨膜 E3 连接酶，通过诱导 FZD 受体的溶酶体降解，充当 Wnt 信号传导的负调节因子。相反，配体 R-spondins (RSPO 1-4) 充当 Wnt 信号传导增强剂。R-spondins 与LGR4-6 和 RNF43/ZNFR3 的复合物结合。这种相互作用可防止 RNF43/ZNFR3 介导的 FZD 溶酶体降解并维持 Wnt 信号转导。Norrin 配体也会触发 β-连环蛋白依赖性 Wnt 通路。尽管 Norrin 是一种胱氨酸结样生长因子，但它通过与 FZD4、Lrp5/6 和 Tetraspanin-12 相互作用来激活 Wnt 信号传导。

1.2. β-catenin依赖性信号传导

与β-catenin非依赖性通路相比，β-catenin依赖性Wnt信号通路得到更多阐明（图1）。β-catenin 是一种与钙粘蛋白（细胞-细胞连接蛋白）的细胞质结构域相关的蛋白。在没有 Wnt 配体刺激的情况下，没有 E-钙粘蛋白结合的细胞质 β-catenin的细胞内水平非常低。β-catenin破坏复合物严格控制细胞质 β-连环蛋白的水平。破坏复合物由AXIN、APC、CK1、GSK3β和βTrCP 组成。在没有 Wnt 配体的情况下，破坏复合物的 GSK3β 和 CK1 分别在 Ser45 (CK1) 和 Thr41/Ser37/Ser33 (GSK3β) 残基处磷酸化 β-catenin。磷酸化的 β-catenin随后被 E3 连接酶 βTrCP 泛素化，并被泛素介导的蛋白酶体系统降解。在 Wnt 配体刺激后，AXIN 与 LRP5/6 的磷酸化胞质尾部和 Dvl 结合。这种蛋白质相互作用将 β-catenin破坏复合物从细胞质隔离到细胞膜，并防止破坏复合物介导的 β-catenin降解。细胞质中积累的β-连环蛋白易位至细胞核，并与转录因子TCF或LEF1形成复合物，取代Groucho和CtBP辅阻遏物。β-catenin/转录因子复合物与共激活子（CBP、p300）结合，用于多种下游基因的转录激活，包括 c-Myc、Axin2、CCND1 和 CD44。

1.3.不依赖 β-连环蛋白的信号传导

在不依赖 β-连环蛋白的信号传导中，Wnt/受体相互作用的细胞内下游信号传导不是由 β-连环蛋白介导，而是由各种细胞信号传导模块介导，例如 RAC1-JNK、RHOA-ROCK 和 PLC-IP3-Ca 2+ （图1）。在 Wnt/PCP 通路中，将 Wnt 配体与 FZD 结合会激活小 GTP 酶 RHOA 和 RAC1。因此，这些信号分别触发 ROCK 和 JNK 的激活。Wnt/PCP 信号传导引导细胞极性以诱导细胞不对称，这对于各种发育过程至关重要。在 Wnt/Ca 2+通路中，Wnt 配体-FZD 的形成会激活磷脂酶 C (PLC)，从而从细胞内储存中释放 Ca 2+ 。Ca 2+水平升高会诱导蛋白激酶 C、蛋白激酶 II 和钙调神经磷酸酶的激活。

2. 癌症中 Wnt 信号传导的改变

异常的 Wnt 信号传导与多种癌症的肿瘤发生有关（图 1）。例如，在超过 90% 的结直肠癌 (CRC) 患者中观察到 Wnt 信号传导的基因突变，这是众所周知的癌症驱动改变。Wnt 信号传导的基因改变主要通过APC、ZNRF3 、CTNNB1（β-catenin）、 AXIN1和RSPO中的基因突变发生。此外，在Wnt信号传导基因中也观察到过表达、下调和拷贝数变化（图1）。值得注意的是，在大多数癌症中，Wnt 信号传导的改变主要与 Wnt 信号传导激活的方向有关。此外，重要的是，抑制Wnt信号传导的过度激活在许多临床前模型中显示出优异的肿瘤抑制效果。

在结直肠癌（CRC）中，经常观察到APC突变缺失和CTNNB1激活突变。APC的突变频率约为60~80%， CTNNB1的突变频率约为5~10%。APC和CTNNB1的突变通过诱导β-连环蛋白的稳定而导致Wnt信号传导过度激活，从而引发肠道肿瘤。此外，在CRC患者中发现8~13%的RNF43突变。ZNRF3/RNF43的突变使癌症对 Wnt 配体高度敏感，导致 Wnt 信号传导过度激活并促进肿瘤发生。

在胃癌（GC）中，检测到 13~22% 的APC突变。RNF43在 4.3% 的 MSS（微卫星稳定）亚型（约 20% 的 GC 患者）和 54.6% 的 MSI（微卫星不稳定）亚型（约 80% 的患者）中观察到突变，并且被认为是关键驱动突变。除了 Wnt 信号传导突变外，还在胃癌中观察到Wnt1和Wnt6的过度表达。事实上，在胃癌发展的两个主要易感因素CDH1突变（编码 E-钙粘蛋白）和幽门螺杆菌感染中也观察到了 Wnt 信号激活。这些结果表明 Wnt 信号传导参与胃癌的肿瘤驱动和促进作用。

在肝细胞癌（HCC）中，Wnt信号通路中几乎50%的突变是激活突变。大约 20~25% 的CTNNB1 、约 10% 的AXIN1和约 3% 的AXIN2发生突变。此外，FZD3、FZD6 和 FZD7 受体、Wnt 3、Wnt4、Wnt 5A 配体和调节剂 RSPO2 在 HCC 中经常过度表达或扩增。

除了 Wnt 信号传导的致癌作用之外，特定类型癌症的 Wnt 信号传导中的许多遗传改变不会驱动肿瘤发生，而是在癌症进展过程中发挥肿瘤促进作用。在肺癌中， CTNNB1和APC基因的突变并不常见。然而，Wnt 信号传导的过度激活与肿瘤形成、复发和不良预后相关。胰腺导管腺泡细胞癌（PDAC）在RNF43中表现出大约 4~10% 的突变，在APC和CTNNB1中表现出 <1% 的突变。

3. 癌症中 Wnt 信号传导的靶向策略

目前的Wnt靶向策略根据Wnt信号传导中的靶点位置可分为四类：靶向Wnt配体、靶向Wnt受体、靶向破坏复合物和靶向β-连环蛋白/转录因子。

描述当前的 Wnt 靶向策略以及最近的更新(至2023年)，以及涉及每种策略的临床试验（表 1和表 2以及图 2 ）。

表1. 靶向WNT 的药物、靶标、适应症和临床试验。

表 2. 针对 Wnt 信号传导的临床前药物。

3.1.靶向 Wnt 配体

靶向某些癌症中的癌症特异性 Wnt 配体可能是提高癌症治疗特异性的绝佳方法。然而，Wnt 配体经常发挥冗余作用，并且在每种癌症背景下，哪些 Wnt 配体是必需的尚未完全了解。此外，在大多数情况下，靶向 Wnt 配体可能没有多大帮助。这是因为Wnt信号传导的突变主要发生在Wnt配体的下游。

图 2. Wnt 信号调节剂在癌症治疗的临床试验中。有前景的临床药物及其靶标也被特别标记出来。

事实上，PORCN 抑制剂 LGK974（ WNT974）通过抑制 Wnt 的棕榈酰化来阻止 Wnt 的分泌，并显示出对肺肿瘤发生和转移性 CRC 进展的显著抑制。RXC004 在胰腺癌异种移植物和胃癌 PDX 模型中抑制肿瘤生长。ETC-159 抑制所有 Wnt 配体的分泌和活性。

可溶性 Wnt 调节剂也可能是 Wnt 靶向治疗的良好靶标。SFRP 抑制 Wnt 信号通路。SFRP 具有与 FZD-CRD 同源的富含半胱氨酸结构域 (CRD)。该结构域作为 SFRP 与 Wnt 配体竞争性结合，从而抑制 Wnt 信号传导。V3Nter 是一种 SFRP 衍生的多肽，与 Wnt3A 结合并抑制 CRC 中的 Wnt 信号传导。然而，使用 SFRP 的 Wnt 靶向疗法尚未在临床试验中进行测试。

另一种可溶性 Wnt 调节剂DKK的靶向已在临床试验中证明更有前景。DKN-01 是一种人源化抗体，可与 DKK1 结合，抑制癌症进展 [。目前正在进行 DKN-01 单药治疗和联合治疗多种癌症类型的 1 期和 2 期临床试验，如结直肠癌、胃癌、子宫内膜癌和肝癌（ NCT05480306 、 NCT04057365 、 NCT03395080和NCT03645980 ）。

3.2.靶向 Wnt 受体

在 Wnt 信号成分下游含有突变的癌症中，靶向 Wnt 受体具有挑战性。然而，细胞表面受体相对容易开发抗体，这使得它们成为有吸引力的药物靶点。此外，针对癌症特异性 Wnt 受体的抗体可以提供更高的特异性和更少的副作用。此外，Wnt受体特异性抗体可应用于Wnt生态位的单一疗法以及与现有抗癌药物的联合疗法。在这里，将介绍使用受体特异性抗体或临床试验可能更适合治疗应用的案例（表1 ）。

目前有相当数量的 FZD 靶向抗体正在进行临床试验（表 1 ）。单克隆抗体 (mAB) OMP-18R5 与 5 个 FZD 受体（FZD1、FZD2、FZD5、FZD7 和 FZD8）结合并阻断经典 Wnt 通路。这种 OMP-18R5 mAB 可抑制结肠癌细胞、乳腺癌细胞和胰腺癌细胞的肿瘤生长。OMP-18R5 正在 1 期临床试验中进行测试。OTSA-101是一种靶向FZD10的单克隆抗体，处于肉瘤的1期临床试验中。Fc 融合蛋白 OMP-54F28 具有 FZD8 的胞外 N 端富含半胱氨酸结构域 (CRD)。通过充当 FZD8 的竞争者，OMP-54F28 抑制 Wnt 配体信号传导。测试 OMP-54F28 正在进行各种实体瘤的 1 期临床试验，包括肝癌、卵巢癌和胰腺癌。

抑制天然或癌症特异性 RSPO 也可能是 Wnt 信号传导的治疗靶点。OMP-131R10（Rosmantuzumab）是一种靶向R-spondin 3（RSPO3）的单克隆抗体，现已完成针对晚期实体瘤或复发肿瘤的1期临床试验（ NCT02482441 ）。

3.3.针对 β-连环蛋白破坏复合物

β-连环蛋白破坏复合物由 APC、CK1、AXIN 和 GSK3β 组成，在控制细胞质和核 β-连环蛋白的浓度方面发挥着至关重要的作用。在多种癌症中发现了破坏复合物成分的功能丧失突变。因此，癌症治疗需要恢复破坏复合物或增强其功能。

CK1 和 GSK3β 磷酸化 β-连环蛋白，随后诱导 β-连环蛋白泛素化和蛋白酶体降解。因此，激活CK1和GSK3β可以增强破坏复合物的功能。Pyrvinium 是 FDA 批准的药物，最初用作有效的蛲虫驱虫药。后来，人们发现Pyrvinium通过增强CK1激酶活性来抑制Wnt信号传导。SSTC3是一种临床前CK1小分子激活剂，比现有的CK1激活药物具有更好的药代动力学。CCT031374 是一种 GSK3β 临床前激活剂，可通过诱导野生型 β-catenin 降解而充当 Wnt 信号传导抑制剂。

Sulindac 是 FDA 批准的非甾体抗炎药。后来，Sulindac 通过与 Dvl 的 PDZ 结构域结合，阻断细胞膜上的破坏复合物，表现出对 Wnt/β-catenin 通路的抑制作用。其他与Dvl的 PDZ 结构域结合的小化学物质也正在进行临床前测试。

增强复合物介导的 β-连环蛋白降解破坏的另一种方法是稳定 AXIN。端锚聚合酶属于聚 ADP-核糖聚合酶家族，可诱导 AXIN 的蛋白酶体降解。因此，端锚聚合酶抑制显着增加了 AXIN 蛋白的稳定性。各种端锚聚合酶抑制剂，包括IWR-1、G007-LK、JW55、JW74和XAV939，已在临床前研究中进行了评估。E7449是聚合酶PARP1/2和端锚聚合酶（TNKS）1/2的抑制剂，正在进行针对晚期实体瘤的1期和2期临床试验（ NCT03878849和NCT01618136 ）。

H+ -ATP酶介导溶酶体的囊泡酸化。溶酶体的这种酸化是 Wnt 受体/辅助受体和 APC 的溶酶体降解所必需的，这会过度激活 Wnt/β-连环蛋白信号传导。大量 v-ATP 酶抑制剂正在进行 2 期临床试验。

靶向细胞内蛋白质复合物非常具有挑战性。此外，由于大多数Wnt相关癌症携带APC突变，因此增强破坏复合物的功能是不可能的。此外，通过 v-ATP 酶抑制剂增强破坏复合物可能会导致由全溶酶体抑制引起的广泛潜在副作用。

3.4.靶向 β-Catenin 及其转录复合物

β-连环蛋白通过与其转录伙伴 TCF/LEF 形成复合物，充当中央转录激活剂。β-连环蛋白还招募共激活剂，例如 cAMP 反应元件结合蛋白 (CBP) 和 p300。这些因子的相互作用对于 β-catenin 转录反应的完全激活至关重要。因此，阻断这些相互作用可能是抑制 Wnt 信号传导的策略。

ICG-001 及其类似物 PRI-724 干扰 β-连环蛋白和 CBP 之间的相互作用。事实上，PRI-724 在肝纤维化模型中阻断了 β-连环蛋白/CBP 相互作用。PRI-724在晚期实体癌中的测试目前正在进行中，并且1期临床试验已经完成。BCL9 (SAH-BCL9) 的稳定 α 螺旋阻碍 β-连环蛋白和 BCL9（一种转录共激活因子）之间的相互作用。

然而，理解蛋白质之间的特定相互作用非常困难。此外，寻找阻止这种相互作用的化学物质是另一个障碍。尽管存在诸多限制，但几种小分子化合物正在进行前期或临床试验，并且新的小分子化合物不断出现。

3.5.当前针对 Wnt 信号转导的注意事项

尽管临床试验正在进行中，但在针对 Wnt 信号通路时，仍会对组织稳态和再生产生毁灭性的不利影响。因此，Wnt信号靶向治疗在癌症治疗中具有良好的前景，但也存在很高的风险。在这种情况下，有效抑制一般 Wnt 信号传导可能不是一个聪明的方法。较低剂量以及与其他抗癌疗法的联合治疗可能为Wnt靶向疗法提供替代且合理的方法。此外，针对支持 Wnt 的癌症生态位可能比针对 Wnt 的单一疗法更有益。

正如其他地方所提到的，与化学药物相比，针对抗体的 Wnt 配体和受体可以赋予癌症治疗特异性，并且引起更少的副作用。然而，很难识别每种癌症背景下的特定配体和受体。此外，这些策略对于大多数Wnt配体和受体下游携带APC或CTNNB1突变的Wnt突变癌症无效。同样，针对细胞内破坏复合物对于这些 Wnt 突变癌症也不是非常有益。

4. 癌症中 Wnt 信号传导的新靶向策略

尽管 Wnt 靶向领域存在许多限制，但新的试验仍在不断进行。此外，有前景的 Wnt 信号传导靶向药物（例如 DKK1 和 FZD 靶向抗体）的临床试验正在进行中。因此，开发第一个Wnt靶向药物的希望仍然存在。此外，正在开发新的先进技术，将“不可成药”蛋白质转变为“可成药”蛋白质。接下来，将介绍了利用最新尖端技术的新一代 Wnt 靶向策略（PROTAC、ADC 和 ASO）。

4.1.基于 PROTAC/分子胶的 Wnt 信号传导靶向

4.1.1 PROTAC

由于PROTAC是基于事件驱动来工作，因此PROTAC的工作剂量非常低，即纳摩尔浓度。因此，与传统抑制剂相比，PROTAC有望具有低毒性和高选择性。在使用 PROTAC 的 Wnt 靶向癌症治疗中，β-连环蛋白是一个有吸引力的细胞内靶点。xStAx-VHL 是一种 PROTAC 靶向 β-连环蛋白，由 xStAx 和 VHLL 组成（图 3和表 3 ）。xStAx 是一种与 AXIN 的 β-连环蛋白结合域高度相似的肽。xStAx-VHL 在细胞系和 APC −/−类器官中诱导剂量依赖性且持久的 β-连环蛋白降解。此外，xStAx-VHL 抑制 CRC 异种移植物和 APC Min/+驱动的肠道肿瘤的生长。

图 3. 通过最新技术靶向 Wnt 信号通路

表3. Wnt 信号传导靶向药物使用最新技术（PROTAC、ADC 和 ASO）。

4.1.2.分子胶

诱导或稳定两种不同蛋白质之间新相互作用的小分子称为“分子胶”。一些分子胶，例如 PROTAC，通过诱导 E3 连接酶和靶蛋白之间新的相互作用来促进靶标的降解。此外，分子胶可以补充PROTAC，在类药性方面比PROTAC更具优势。在这种背景下，最近的一项研究报告了β-连环蛋白的分子胶。通常，突变的 β-连环蛋白不能与天然 E3 连接酶 β-TrCP 结合。然而，β-连环蛋白的分子胶NRX-252114 恢复了相互作用并诱导突变的β-连环蛋白的蛋白酶体降解。

4.1.3.其他蛋白质降解技术

最近，已经开发了各种蛋白质降解技术，例如PROTAB（蛋白水解靶向抗体）、AUTOTAC（自噬靶向嵌合体）和LYTAC（溶酶体靶向嵌合体）。这些新平台可在不久的将来用于癌症治疗的 Wnt 靶向策略。

事实上，最近的一项研究展示了一种新的靶向策略 PROTAB，它使用 Wnt 信号传导组件。PROTAB 是一种抗体，通过连接跨膜 E3 连接酶 ZNRF3（Wnt 信号传导的负调节因子）来诱导细胞外靶受体的蛋白水解。ZNRF3-HER2 PROTAB 诱导 CRC 细胞 (SW48) 和 SW48 异种移植模型肿瘤中 HER2 的降解。此外，ZNRF3-HER2 PROTAB 在 CRC 类器官中显示出肿瘤特异性降解。尽管该平台不直接靶向 Wnt 信号传导区室，但它可能适合靶向 Wnt 通路的膜受体。

4.2.基于抗体-药物偶联物 (ADC) 的 Wnt 信号传导靶向

抗体药物偶联物（ADC）由单克隆抗体（mAB）、细胞毒性药物（有效载荷或弹头）和化学接头组成。ADC 诱导抗体结合的抗原表达细胞的凋亡。ADC 结合了单克隆抗体和细胞毒药物的优点，可以更精确、更有效地靶向和消除靶细胞。

Septuximab vedotin (F7-ADC) 是一种针对 FZD7 的 ADC （图 3和表 3 ）。它包含人 FZD7 抗体和微管抑制药物单甲基 auristatin E (MMAE)。卵巢浆液性囊腺癌过度表达 Wnt 受体 FZD7 。因此，FZD7 可能是卵巢浆液性囊腺癌中的肿瘤特异性抗原。事实上，Septuximab vedotin (F7-ADC) 可杀死卵巢癌细胞，且在体外和体内均无毒性。

PTK7 涉及 Wnt 和 VEGF 信号传导，与癌症驱动和抑制相关。在Wnt途径中，PTK7是Wnt配体的共受体。WNT2A 与 FZD7 和 PTK7 的二聚体结合。WNT2A、FZD7 和 PTK7 的相互作用抑制经典 Wnt 通路，而 WNT5A、ROR2 和 PTK7 的相互作用激活 Wnt/PCP 通路。靶向 PTK7 可能适合特异性靶向癌症中的 Wnt 反应 CSC。PF-06647020 是一款针对 PTK7 的 ADC。PF-06647020 可有效递送抗癌药物，并在多种癌细胞系和 PDX（NSCLC、OVAC 和 TNBC）中显示出抗癌作用。PF-06647020针对晚期实体瘤的1期临床试验已完成。

最近开发了针对 LGR5 的 ADC LGR5–MC-vc-PAB–MMAE 和 LGR5–NMS818。这些靶向 LGR5 的 ADC 靶向表达 LGR5 的肿瘤起始细胞或癌症干细胞 (CSC) 群体。这些细胞对 Wnt 信号传导高度敏感，对于肿瘤进展至关重要。尽管这些 ADC 不直接抑制 Wnt 通路，但它们会杀死 CSC 等 Wnt 应答细胞。此外，这些靶向 LGR5 的 ADC 可以显著抑制体内肿瘤的生长和复发。

4.3.基于寡核苷酸的 Wnt 信号转导靶向

寡核苷酸是新兴的治疗方法，使用经过化学修饰的小核苷酸（15-30 bp），主要调节靶基因的转录。这些小寡核苷酸疗法有多种形式，例如微小RNA (miRNA)、反义寡核苷酸(ASO) 和短干扰RNA (siRNA)。此外，许多新型寡核苷酸、修饰和递送系统正在不断开发。因此，寡核苷酸疗法有望很快应用于癌症治疗，其中可能涉及靶向Wnt信号传导。

4.3.1. MicroRNA 和 siRNA

miRNA 和 siRNA 由短序列组成，通过部分碱基配对来靶向 RNA 。在前列腺癌中，miR-15a 和 miR-16-1 据报道是肿瘤抑制因子，并下调前列腺癌细胞中的 Wnt3a。TargomiR 是含有基于 miR-16 的模拟 microRNA（有 23 个碱基对）的小细胞，并靶向细胞表面的 EGFR 和 Wnt3a 。TargomiRs 已完成治疗复发性恶性胸膜间皮瘤和非小细胞肺癌的临床试验（第 1 期， NCT02369198 ）。这些 miRNA 和 siRNA 并不直接靶向 Wnt 信号通路。

4.3.2.反义寡核苷酸

反义寡核苷酸 (ASO) 是由 16-22 个碱基组成的单链 DNA 类似物。ASO 与靶 RNA 序列结合并通过各种机制控制其表达（图 3 ）。最近，2'-O-甲氧基乙基（2'-MOE）和锁核酸（LNA）等核糖取代提高了靶标结合的稳定性和准确性。重要的是，各种反义寡核苷酸（ASO）最近已获得 FDA 批准。

几种间接或直接靶向 Wnt 通路的 ASO 正在进行临床前研究。据报道，LNA 修饰的 ASO 是 Wnt 通路的间接靶向 ASO。

2'-O-甲氧基乙基嵌合 ASO 直接靶向 β-连环蛋白。使用这种针对 β-连环蛋白的 ASO 治疗显示，高脂肪喂养的 C57BL/6 小鼠肝脏和白色脂肪组织中 β-连环蛋白的表达出现了特异性下降（图 3和表 3 ）。这些数据表明，β-连环蛋白的特异性靶向在体内模型中是可行的。

5. 结论和未来展望

尽管Wnt信号传导对肿瘤发生的贡献是显而易见的，并且Wnt信号传导抑制在临床前模型中显示出显著效果，但还没有Wnt信号传导靶向药物在癌症或其他疾病中被证明在临床上取得成功。主要原因可能是Wnt信号传导负责广泛的生理调节。此功能可能会因治疗而引发多种副作用。此外，可能是因为Wnt靶向治疗本身并没有比传统抗癌药物具有显著的益处。因此，最近的 Wnt 靶向方法侧重于提高治疗特异性、最大限度地减少副作用以及弥补安全剂量 Wnt 靶向药物有效性较低的联合疗法。

除了这些努力之外，Wnt靶向治疗还结合了PROTAC/分子胶、ASO和ADC等最新的靶向策略。采用这些技术并从过去和当前的 Wnt 靶向试验中积累有关作用机制的知识，使得新一波的 Wnt 信号靶向疗法成为可能。

参考：PMC10136927

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