网织红细胞计数
1.网织红细胞(Ret,RET)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,属于尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA),经活体染色(新亚甲蓝【WHO推荐】、煌焦油蓝、中性红等染料)后,形成核酸与碱性燃料复合物,呈深染的颗粒状或网状结构。
操作方法:
显微镜法:
2滴染料加2滴血,混匀,37℃放置15-20分钟,制片后,至少计数1000个红细胞内网织红细胞的百分比或分数。
注意:染色温度应控制在37℃,室温25℃Ret检出率明显低于37℃。染液与血液以1:1为宜,严重贫血时,可适量增加血量。
参考值:网织红细胞计数参考值:显微镜计数法成人:0.008-0.02或(25-75)×109/L,新生儿0.02-0.06。
仪器法:用荧光染料使网织红细胞内RNA着色,用流式细胞术(FCM)得到网织红细胞数。
网织红细胞Ret参数
Ret%:网织红细胞比率
Ret#:网织红细胞绝对值
LFR:低荧光网织红细胞
MFR:中荧光网织红细胞
HFR:高荧光网织红细胞
IRF:未成熟网织红细胞,=MFR+HFR, IRF是骨髓移植成功最早、最灵敏的指标
注意,荧光越高,表示网织红细胞含核酸越多,细胞也就越幼稚
RPI:网织红细胞生成指数
RMI:网织红细胞成熟指数,RMI=(MFR+HFR)/LFRx100
RMI减低,提示骨髓衰竭和造血无效,见于巨幼细胞性贫血
血细胞分析仪的干扰因素:
1 RBC: 假阴性:冷凝集素、EDTA依赖性凝集
2 PLT降低:血小板聚集、血小板聚集现象
网织红细胞分型根据不同发育阶段分为4型
Ⅰ型(丝球型),红细胞充满网状物,见于骨髓。
Ⅱ型(网型),红细胞网状物结构松散,见于骨髓。
Ⅲ型(破网型),红细胞网状物结构稀少,呈不规则枝点状排列,见于外周血。
Ⅳ型(点粒型):红细胞内为分散的细颗粒、短丝状网状物,见于外周血。
【记忆】网织红细胞里面的网状物是残存的嗜碱性物质RNA,从I- Ⅳ型肯定是越来越少。从IV-I,记成【点破网球】
临床意义:判断骨髓红细胞造血情况(再障的诊断标准之一是网织红细胞计数常低于0.005,绝对值低于15´109/L);观察贫血疗效(用药3-5d后网织红细胞开始上升,7-10d达高峰,2周左右,网织红细胞逐渐下降,表明治疗有效);骨髓移植后监测;网织红细胞生成指数(RPI)。