最近有同学要做微生物相关的实验,想要从微生物群体中分离出目的菌。这个正好也是微生物基础知识的一部分,就提前在这里进行讲解。
平板画线法
用无菌接种环或接种针在平板上划线,使接种环上的菌液逐渐稀释,最终在划线上分散出单个细胞,形成单菌落。
目前临床上最常用的就是分区画线法。因为原始样本(痰、脓汁等),杂菌较多,需要分离出单个菌落。这个实际操作时的要点就是,从第一区到第二区时,一定要进行接种环灼烧,下一区和上一区要交上3-5根线。
涂布接种法
将待分离的微生物悬液涂布在固体培养基表面,通过稀释度使微生物菌落单个分离。简单版涂布法用于药敏试验,另外咱们做血培养仪性能验证时,需要往瓶里加一定浓度的细菌悬液,那么细菌浓度到底准不准,也是通过这个涂布法进行确认的。
斜面接种法:
单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性
液体接种法:
注意你接种的地方,后面一定要有培养基覆盖。以前就出现过将细菌接到高的水位了,导致第二天不长细菌。
倾注平板法:
将标本经适当稀释后,取1ml或0.1ml,置于无菌平皿内,倾入已溶化并冷却至50℃左右的适合培养基15ml,混匀,待凝固后,倒置平板,于35~37℃孵育24小时后,计数培养基内菌落数,乘以稀释倍数,即可计算出被检物中的细菌数。
倾注平板法,菌落不止会长在培养皿的表面,培养皿的内部也会生长。