三、血红蛋白测定
1.氰化高铁血红蛋白HiCN测定法原理:血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白,再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物-氰化高铁血红蛋白,其在540nm处有一吸收峰。但其致命弱点是氰化钾试剂有剧毒,使用管理不当可造成公害。存放HiCN转化液的容器应为:棕色玻璃瓶,不能储存在塑料瓶中,会导致CN-下降,也不能在0℃下保存,会使试剂失效。废液应该用水稀释后,加入次氯酸钠,放置15h以上,CN-变成CO2和N2,再排入下水道。
(1)血红蛋白WHO、ICSH推荐的参考方法:HiCN(氰化高铁血红蛋白测定法)
(2)不能检测HbS
(3)吸光度540nm。HiCN在540nm处的吸光度与溶液浓度呈正比,根据测得吸光度可求得待测标本中Hb浓度。
SDS测定法(十二烷基硫酸钠血红蛋白):除SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS作用,生成棕红色化合物。用分光光度计测定538nm处吸光度,经换算可达到血红蛋白浓度。但由于摩尔消光系数尚未最后确认,所以不能直接用吸光度计算Hb浓度。
2在正常情况下,99%Hb的铁原子呈Fe2+状态,称为还原Hb,1%呈Fe3+状态,称为高铁血红蛋白,只有Fe2+状态的Hb才能与氧结合,称为氧合血红蛋白。
【拓展】在吸收和形成血红蛋白时为Fe2+,其余为Fe3+
【记忆】男男打架是武斗,受伤了打120,女的吵架是文斗,斗嘴,打110。
新生儿170,星期(新7)。
血红蛋白测定的质量控制
异常血红蛋白、高脂血症、白血病计数超过30´109/L、脂滴等可产生浊度,干扰Hb测定。
血红蛋白测定的临床意义
血红蛋白意义与红细胞计数类似,但在贫血程度的判断优于红细胞计数。比如发生大细胞性贫血或小细胞低色素贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对增高,小细胞低色素贫血的血红蛋白减低,但红细胞计数可正常。
四、红细胞形态检查
1红细胞形态参考值:瑞氏染色血涂片成熟红细胞形态为双凹圆盘形,细胞大小一致、平均直径7.2μm,淡粉红色,中央1/3为生理性淡染区,胞质内无异常结构。
2.红细胞大小改变:
(1)小红细胞:直径<6μm。正常人偶见。见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、遗传性球形细胞增多症。
(2)大红细胞:直径>10μm。见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血等。
(3)巨红细胞:直径>15μm。巨幼细胞性贫血。
(4)红细胞大小不均:红细胞间直径相差一倍以上。见于严重的增生性贫血(如巨幼细胞性贫血)。
3.红细胞内血红蛋白含量改变
(1)正常色素性:红细胞呈淡红色,中央有生理性浅染区。见于正常人、急性失血、再生障碍性贫血和白血病等。
(2)低色素性:中央生理性浅染区扩大,成为环形红细胞。见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血、某些血红蛋白病。
(3)高色素性:红细胞中央浅染区消失,整个红细胞染成红色,胞体增大,见于巨幼细胞性贫血。
(4)多色性:是尚未完全成熟的红细胞,胞体较大,胞质内尚存少量嗜碱性物质(RNA),红细胞染成灰红色或淡灰蓝色。见于正常人(极少)、骨髓造红细胞功能活跃(如溶血性或急性失血性贫血)。
(5)细胞着色不一:同一血涂片同时出现低色素、正常色素性两种细胞,又称双形性贫血,见于铁粒幼红细胞性贫血。
4.红细胞形状改变
(1)球形红细胞:遗传性球形红细胞增多症(红细胞膜异常,渗透脆性试验)
(2)椭圆形红细胞:遗传椭圆形红细胞增多症(可达25%-75%),大细胞性贫血(可达25%),正常人约占1%,不超过15%
(3)靶形红细胞:珠蛋白生成障碍性贫血
(4)镰形红细胞:HbS
【记忆】榴莲,榴—硫,莲—镰
(5)泪滴形细胞:骨髓纤维化
【记忆】泪腺,腺—纤
(6)棘红细胞:见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症
(7)裂红细胞:见于DIC、严重烧伤
【注意】与白血病时白细胞裂孔现象的区别
(8)缗钱状红细胞:多发性骨髓瘤MM
【记忆】MM爱钱
【拓展】多发性骨髓瘤的特异性细胞:火焰状瘤细胞【记忆】火辣的MM。联系在一起就是火辣的MM爱钱。
(9)有核红细胞:严重的溶血性贫血,造血系统肿瘤,骨髓纤维化,脾切除等
(10)新月形红细胞:见于某些溶血性贫血(比如PNH)
【记忆】月亮下睡觉
(11)口形红细胞:见于口形红细胞增多症
(12)红细胞形态不整:见于某些感染、严重贫血、巨幼细胞性贫血