背景：使用吡虫啉莫西克丁滴剂（AdvocateW for Cats、Bayer Animal Health GmbH、Leverkusen、Germany）对40只自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的非洲侏儒刺猬进行治疗，对其作用效果和安全性进行试验研究。
方法：将20只刺猬分为3个试验组（0.1、0.4和1.6ml/kg b.w.）和1组未经处理的对照组，每组有5只刺猬，以便确定每组刺猬的最佳药物剂量。另外20只自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的刺猬随机分为试验组和对照组，每组10只，使用0.1ml/kg剂量进行治疗，在使用药物后的第0、3、9、16、30天，分别计算13个身体部位活的螨虫数量。
结果：治疗前，外耳道螨虫密度最高，其次是背侧，体表腹侧螨虫密度最低。按照猫的使用推荐剂量，0.1ml/kg的使用剂量是最符合刺猬的。治疗组的刺猬在用药后第3天起均未出现活的螨虫。在整个研究期间，没有观察到诸如共济失调、精神沉郁、恶心和体重波动等副作用。
结论：本试验表明，吡虫啉莫西克丁滴剂按照0.1ml/kg的剂量使用，有助于控制刺猬的螨虫（Caparinia tripilis）感染。
关键词：非洲侏儒刺猬、四趾刺猬、螨虫（Caparinia tripilis）、莫昔克丁、吡虫啉
背景
Caparinia tripilis是螨虫的一种，1889年首次在英国报道[1]，是刺猬皮肤病最重要的病因之一[2]。被感染动物的耳朵出现鳞屑，受感染部位的皮肤变厚。螨虫（Caparinia tripilis）会给宿主带来烦恼，表现出瘙痒症状，它们经常坐在地上，试图用后爪抓挠被感染的区域。感染后期皮肤表面出现干痂，干痂变厚、折叠，甚至可能开裂。当病变恶化，会发生出血，刺可能会脱落，被感染的刺猬最终变得丧失能力，不能正常卷起[3]。刺猬螨虫的生命周期包括卵、幼虫、第一若虫、第二若虫（没有显示出性别的双性体）、雄性成虫或雌性成虫[3]。研究表明，螨虫（Caparinia tripilis）完整的生命周期大约需要三周[3]。通过生殖器吸盘，雄性成虫和雌性第二若虫形成一对附着体，这种状态基本是永久性的，直至雌性成虫从第二若虫蜕皮中脱出为止。4月龄的幼年动物身上就可能发现严重螨虫（Caparinia tripilis）感染，严重感染可能会导致动物死亡[3]。因此，受感染的刺猬必须被隔离治疗，对感染螨虫（Caparinia tripilis）的刺猬治疗包括有机磷药浴、伊维菌素注射剂和双甲脒喷雾[4、5]。经有机磷药浴治疗后，皮肤病得到改善，情况没有复发[4]。然而，有机磷杀虫剂中毒是该类杀虫方式导致重大发病和死亡的主要原因。有机磷中毒的临床综合征差异很大，从经典的胆碱综合征到弛缓性瘫痪，甚至顽固性癫痫发作[6]。虽然伊维菌素每21天肌肉注射一次，能够减轻螨虫（Caparinia tripilis）感染刺猬引起的临床症状，但不能完全消除螨虫。另外还有两种方法，一是使用0.03%的双甲脒冲洗，每7天一次清除寄生虫[5]。另一种方法是使用1%拟除虫菊酯也被证明是有效的[7]。
莫昔克丁是一种大环内酯类药物，是一种有效的广谱杀虫剂，对多种线虫、昆虫和螨虫均有杀虫活性。1989年，它首次在阿根廷作为一种牛的注射制剂进行商业化使用，已被广泛用作一种广谱抗寄生虫药物，用于多种哺乳动物，包括食用动物和伴侣动物[8]。据报道，莫昔克丁的亲脂性是伊维菌素的100倍，在牛治疗28天后，脂肪组织中莫昔克丁的浓度比血浆中检测到的浓度高90倍[9、10]。莫昔克丁的高亲脂性可能对生活在动物皮肤表面的寄生螨虫更有效。最近的试验研究证实了吡虫啉莫西克丁滴剂对犬[11]和猫[12]的耳螨病有效。吡虫啉莫西克丁滴剂对感染猫的猫栉首蚤也有高效的杀虫作用[13]。因为其使用方便，该配方也可用于异宠动物的寄生虫控制，可以有效治疗雪貂的耳螨感染[14]。然而，对刺猬螨虫（Caparinia tripilis）感染的疗效和副作用尚未被研究。本研究的目的是评价吡虫啉莫西克丁滴剂对刺猬的有效性和安全性。
材料与方法
1. 试验动物
2010年11月，从韩国光州当地一家宠物店获得了40只自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的非洲侏儒刺猬（雄性13只，雌性27只，平均体重SD，305.6±111.2 g）。研究人员还对刺猬的性别、体重和颜色进行了简要记录。在试验前的最后6个月里，没有一只刺猬使用过体外杀虫剂。在试验期间，这些刺猬被单独关在笼子里。所有动物都被饲养在同一房间内，温度为25.0±，2.0°C，相对湿度为80%，并在整个试验期间给予常规的商业化刺猬食物。昌南国立大学动物护理和使用委员会批准了本研究中使用的方案，并按照动物实验指南对动物进行了护理。
为了进行寄生虫学鉴定，我们收集了严重感染动物的皮肤刮取样本，并保存在70%的甲醇中。用Downs PVA溶液将螨虫（Caparinia tripilis）装在载玻片上，连续几天，直到内脏变为透明[15]，并根据Laurence观点[16]，对成年雄性的形态进行鉴定。
2. 试验药物
为了治疗刺猬的螨虫（Caparinia tripilis）感染，使用吡虫啉莫西克丁滴剂（AdvocateW for Cats、Bayer Animal Health GmbH、Leverkusen、Germany）。
3. 试验设计
实验一：刺猬的最佳药物剂量的测定
通过使用微软软件MicrosoftW Excel生成的随机处理分配计划，随机将15只刺猬分配到试验组，5只被分配到未处理的对照组。治疗组分为3个亚组，每组5只刺猬，接受3个不同剂量的试验药物水平。治疗组给予不同剂量的试验药物（0.1、0.4、1.6ml/Kg b.w.）。第0天，使用吸管在每只刺猬的中背侧区域的皮肤，计算螨虫（Caparinia tripilis）数。对照组给予相同等量的0.1%苯甲醇。0.1ml/kg剂量水平时，含吡虫啉10mg，莫昔克丁1mg。
药物效果的主要评价标准是在宿主动物身体上没有发现任何发育阶段的活螨虫，包括幼虫、若虫和成虫。没有试图区分性别，因为若虫和成虫阶段特别难以区分[15]。如果螨虫是运动的并保持完整身体形态，就被认为是活的。本研究未采用常规皮肤刮片和光镜检查法对螨虫进行计数，因为给药杀死的死螨虫可能在氢氧化钾溶解后的光镜检查中，被错误地计为活螨。同样，由于试验药物的杀卵能力不能通过卵镜检检查或显微镜检查轻易测定其杀卵能力。虽然没有螨虫（Caparinia tripilis）的记录，但与螨虫（Caparinia tripilis）有密切相关的螨虫卵平均需要4天（72-107小时）才能孵化，温度保持在35°C，相对湿度80%[17、18]。因此，如果确保该试验药物的杀幼虫效果在治疗后至少持续一周，则认为能够成功的控制螨虫虫卵。在给药前的第0天，使用检耳镜在每只动物的13个身体区域（6个背侧包括背颈、左右胸背侧、左右腰椎、骶骨区，5个腹侧包括左、右胸、左、右腹和腹股沟区，和两侧外耳）进行30秒的观察，从而计算出总的活螨数量。计算每个区域在体表约0.5cm2处的螨虫数。第3天，采用与第0天相同的方法计数活螨虫数。每只刺猬都用同一个体重秤称重，以观察每次检查时的体重变化。
实验二：疗效评价
通过使用微软软件MicrosoftW Excel生成的随机处理分配计划，将10只自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的刺猬随机分配到治疗组，另外10只随机分配到未治疗的对照组。在给药前，对所有20只刺猬中活螨数量的计算方法与试验一相同。治疗组在第0天使用猫用Advocate（Bayer Animal Health GmbH、Leverkusen、Germany），以0.1ml/kg的剂量在刺猬中背侧的皮肤给药。试验期间分别在第0、3、9、16、30天对所有动物进行5次检测。在13个身体区域，采用与试验一相同的方法计算活螨数。每只刺猬都用同一个体重秤称重。各治疗组第3天及治疗后的疗效计算如下：
疗效百分比（%）=
y-x
y
×100
x=观察到有活螨的刺猬数量
y=所有试验组刺猬总数量
4. 统计学分析
采用克鲁斯卡尔-沃利斯检验来评估不同身体区域之间的种群密度的差异。通过重复测量的方差分析模型来评估体重随时间测量的差异。意义水平设为p≤0.05。使用IBM SPSS统计软件19.0版（IBM Corporation, Armonk, New York, U.S.）进行统计分析。
结果
图1显示了自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的刺猬受影响皮肤的立体显微镜视图。皮肤严重的区域被鳞屑和外壳覆盖，通常会发现活卵或空的卵壳（图2）。从形态上看，成虫短小无节。雄性螨的所有腿部均具有钟形的跖节突起，而雌性螨的第三和第四对腿部则缺乏此结构。成螨雄性的腹部后端具有三叶状突起，每个突起上都有一根长刚毛（图3）。根据这些形态特征，鉴定出该螨为螨虫（Caparinia tripilis）。
图1一只被螨虫（Caparinia tripilis）严重感染的刺猬皮肤（从解剖显微镜下拍摄的照片图像）
大量的螨虫在不同的发育阶段，包括卵被显示出来。
图2从一只被螨虫（Caparinia tripilis）严重感染的刺猬身上收集的鳞屑
A.从一只被螨虫（Caparinia tripilis）感染的刺猬身上收集的低倍放大的鳞屑。鳞屑在室温下保存4周。图中显示了从卵中孵化出的幼虫。Bar=5mm。
B.是一个扩大的规模，覆盖着大部分空的卵壳。Bar=1mm。
C.是一只严重感染的刺猬的显微照片，显示了大量的卵。Bar=200µm。
图3雄性成虫和雌性成虫的光学显微照片，在雌/雄性成虫的第三对腿上都有三个长刚毛（箭头）Bar=200µm。
A.一只雄性成虫的腹侧视图。在腹部后端的两侧各有一个三叶状突起（黑色箭头），每个叶都有一个长长的刚毛。
B.雌性成虫的腹侧图。
治疗前40只刺猬的13个身体区域检测的螨虫（Caparinia tripilis）分布规律见表1。在13个体区共有2495只螨虫，平均数量为4.8±5.9只螨虫（平均± S.D.），左外耳道区螨虫密度最高（8.7±8.5），腹股沟区螨虫密度最低（0.9±1.8）。一般来说，耳朵的浓度最大（8.5±8.7），其次是背侧（6.3±5.5），腹侧区域的浓度最低（1.5±2.4）。采用Kruskal-Wallis检验（p<0.001），耳、背侧和腹侧区域的螨虫数差异显著。
表1
螨虫（Caparinia tripilis）在40只非洲侏儒刺猬（四趾刺猬）13个身体部位的分布
在给药前第0天，使用耳镜在40只刺猬的13个身体区域计算活动螨虫（幼虫、若虫和成虫）的数量。计算每个区域在体表约0.5cm2处的螨虫数。
实验一：刺猬的最佳药物剂量的测定
猫用Advocate防治刺猬螨虫（Caparinia tripilis）的最佳剂量水平见表2。使用0.1ml/kg治疗组的螨虫在第3天死亡。在5只试验动物中，只在一只动物的背颈区发现有1个活螨虫。其他治疗组的剂量分别为0.4ml/kg和1.6ml/kg，身体上任何部位均无活螨虫。第3天，对照组的平均螨虫数保持在3.7个以上，左耳密度最高，腹股沟区密度最低。即使在1.6ml/kg的剂量水平，也没有发现任何副作用，这相当于对猫的推荐剂量水平的16倍。试验2选择0.1ml/kg的剂量水平作为刺猬的最佳治疗剂量。
表2
测定吡虫啉莫西克丁滴剂治疗感染螨虫（Caparinia tripilis）的非洲侏儒刺猬（四趾刺猬）的最佳剂量水平
猫用Advocate（Bayer Animal Health GmbH、Leverkusen、Germany）含有吡虫啉莫西克丁滴剂，滴在每只刺猬的中背部。每个数字代表了用耳镜 （PiccolightW、KaWe、Berlin、Germany）观察到的5只刺猬的活螨虫的平均数量。计算每个区域在体表约0.5cm2处的螨虫数。
实验二：药物疗效评价
吡虫啉莫西克丁滴剂对螨虫（Caparinia tripilis）的长期杀虫效果见表3。试验期间未处理对照组13个身体部位螨虫的平均数量保持在4.7以上，治疗组的刺猬从治疗后第3天至试验结束均无活螨虫。因此，吡虫啉莫西克丁滴剂对刺猬感染的螨虫（Caparinia tripilis）的疗效从第3天到第30天均为100%。通过在显微镜下观察每个刺猬后背颈区域的皮肤刮片标本，观察治疗组动物未观察到活螨虫的活力，进一步证实了该药物的疗效（图4，数据未显示）。
对照组和治疗组在第0天的平均体重分别为254±88.2g和290±164.1g。在第30天，对照组的平均体重保持不变（254.0±53.8g），而治疗组的平均体重略有增加（297.0±137.1g）。对照组（p=0.830）和治疗组（p=0.198）组从第0天至第30天的体重变化均无统计学意义。在整个研究期间，对照组和治疗组均未观察到副作用，如共济失调，精神沉郁或恶心。
表3
吡虫啉莫西克丁滴剂对自然感染螨虫（Caparinia tripilis）的非洲侏儒刺猬（四趾刺猬）的治疗效果
猫用Advocate（Bayer Animal Health GmbH、Leverkusen、Germany）含有吡虫啉莫西克丁滴剂，滴在每只刺猬的中背部。每个数字都代表了用耳镜从10只刺猬身上观察到的活螨虫平均数量。计算每个区域在体表约0.5cm2处的螨数。疗效百分比（%）=（y-x）/y*100（x=每个观察日期观察到有活螨虫的刺猬数量，y=各观察日期试验组刺猬总数）。
讨论
本试验评价了吡虫啉莫西克丁滴剂（Advocate for Cats、BayerAnimal Health GmbH、Leverkusen、Germany）治疗非洲侏儒刺猬感染的螨虫（Caparinia tripilis）的有效性和安全性。虽然我们测试的药物主要是为猫使用的，但我们的结果显示，对刺猬感染的螨虫（Caparinia tripilis）也具有良好的有效性和安全性。试验一中测定的0.1ml/kg的剂量水平，也是猫的推荐剂量。即使在治疗后的第三天，治疗组中也没有在刺猬身体的任何部位发现活螨虫，这一结果持续到试验结束（30天）。在我们的研究中，在整个研究期间都没有观察到诸如共济失调、精神沉郁、恶心和体重波动等副作用。由于药物使用方便，特别是对宠物主人，这种药物似乎是一个理想的解决方案，以控制螨虫在异宠上的感染，如刺猬。
莫昔克丁是一种大环内酯类药物，其亲脂性大约是伊维菌素的100倍[10]，并且在血浆中停留的时间比伊维菌素长得多[19]。药物进入血液后，会储存在脂肪组织中，缓慢释放、代谢，并主要通过粪便排泄，同时也会在皮肤上出现，从而杀灭表皮寄生的螨虫。因此，本试验中研究猫用Advocate（吡虫啉莫西克丁滴剂）对螨虫的杀虫效果可能是由于莫昔克丁的活性，因为即使是那些位于外耳道的螨虫也被成功杀死。据报道，刺猬感染的螨虫也可用0.3mg/kg莫昔克丁皮下注射，每10天注射一次。首次治疗10天后临床症状明显改善[20]。虽然该报告没有记录治疗前后的螨虫数量，但莫昔克丁似乎对刺猬的外部寄生虫感染有效。
1889年，Michael在英国首次报道了刺猬感染螨虫，当时他将该螨虫鉴定为Caparinia tripilis。然后在德国和新西兰的刺猬身上发现了这种螨虫[2、23]，它还通过出售的宠物非洲刺猬的繁殖地被引入美国新墨西哥州[7]。在亚洲，2012年报道了来自韩国的非洲侏儒刺猬爆发了螨虫（Caparinia tripilis）感染[24]。从非洲侏儒刺猬身上传播给人类癣菌病和沙门氏菌病病例也有报道[25、26]，但是螨虫（Caparinia tripilis）似乎并不具备人畜共患性[27]。
结论
虽然刺猬作为宠物的数量已经大幅增加，但关于刺猬体外寄生疾病的控制的研究还很有限。本研究表明，0.1ml/kg 吡虫啉莫西克丁滴剂也可用于控制刺猬的螨虫（Caparinia tripilis）感染。
文章来源：Kyu-Rim Kim1† , Kyu-Sung Ahn2† , Dae-Sung Oh2 and Sung-Shik Shin1* Efficacy of a combination of 10% imidacloprid and 1% moxidectin against Caparinia tripilis in African pygmy hedgehog (Atelerix albiventris), Kim et al. Parasites & Vectors 2012, 5:158
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