可注射聚D,L-乳酸（PDLLA）是一种相对较新的皮下胶原蛋白刺激填充剂（AestheFill；REGEN Biotech，首尔，韩国），包含PDLLA微球和羧甲基纤维素。它以瓶装的冻干粉末块状供应。在注射前，需要用无菌注射水（SWFI）复溶可注射PDLLA以形成均匀悬浮液。
根据研究者过去的经验，经常使用1.5至24mL的SWFI来复溶一瓶可注射PDLLA，用于从深层注射增加体积到表层注射改善皮肤质量等多种应用。
在本文中，“Dn”表示当一瓶可注射PDLLA用“n”毫升SWFI“稀释”时悬浮液的密度。因为一瓶含有154mgPDLLA，Dn表示每1mL悬浮液中含有154/n mg PDLLA。
悬浮液被分为四个不同密度组，用于不同目的的注射：最浓（D1.5 - D3），浓（D3 - D6），稀（D6 - D12），和超稀（D12 - D24）。我们使用最浓悬浮液用于增厚目的，如下巴或鼻子的植入物；浓悬浮液用于深层皱纹矫正或大量体积增加；稀悬浮液用于浅层皱纹矫正；超稀悬浮液用于面部皮肤再生（图1）。
图1：当一瓶可注射PDLLA用“n”毫升SWFI（Dn）稀释时，悬浮液密度（mg/ml）与悬浮液的图表。因为一瓶可注射PDLLA含有154mg的PDLLA微球，所以D1.5、D3、D6、D12和D24悬浮液的密度分别为100、50、25、12.5和6.25 mg/ml。我们将100至50 mg/ml（D1.5-D3）之间的密度定义为最浓悬浮液；50至25 mg/ml（D3-D6）之间的密度定义为浓悬浮液；25至12.5 mg/ml（D6-D12）之间的密度定义为稀悬浮液；12.5至6.25 mg/ml（D12-D24）之间的密度定义为超稀悬浮液。
如何调整可注射PDLLA的密度？采用简单的“双倍连续稀释”方法。这种方法基于这样一个事实：当悬浮液的量被SWFI稀释到其2倍时，该悬浮液的密度减半。首先，我们使用真空辅助水合和来回方法来复溶可注射PDLLA成最浓悬浮液。在取出所需的最浓悬浮液量进行注射后，我们用相同量的SWFI稀释剩余的悬浮液量。密度减半，变成浓悬浮液。然后我们重复上述相同程序。我们可以最终获得稀和超稀悬浮液。
“D1.5-D3-D6-D12”是我们过去两年最常用的密度组合（图2）。还有许多其他密度组合，如“D1.7-D3.4-D6.8-D13.6”，“D2-D4-D8-D16”，“D2.2-D4.4-D8.8-D17.6”等。根据个人偏好和经验选择适当的密度组合。通常，根据患者组织缺陷的严重程度，每次注射会使用2-5瓶可注射PDLLA。一个重要的注意事项是不要过度矫正面部的任何区域。如果需要，治疗可以在1个月以上的时间间隔内重复进行。
图2：二倍连续稀释方法的一个例子。三瓶可注射PDLLA用4.5mL的SWFI复溶。因此，获得了4.5mL的D1.5悬浮液。估计使用了2.1mL的D1.5悬浮液来注射患者的下巴，然后剩下2.4mL的D1.5悬浮液。对剩余的悬浮液进行了二倍稀释，然后获得了4.8毫升D3悬浮液。总共使用了2.1mL的D3悬浮液来注射患者的鼻唇沟，然后剩下2.7mL的D3悬浮液。再次对剩余的悬浮液进行了二倍稀释，然后获得了5.4mL的D6悬浮液。使用了4.2毫升D6悬浮液来注射患者的泪沟畸形和小皱纹，然后剩下1.2mL的D6悬浮液。最后，对剩余的悬浮液进行了二倍稀释，然后获得了2.4mL的D12悬浮液。这种D12悬浮液被用来注射以改善其他面部区域的皮肤纹理。
这种二倍连续稀释方法必须与来回方法结合使用，以复溶可注射PDLLA。将多个瓶子复溶成最浓悬浮液更容易，并且更容易检查剩余量有多少。使用来回方法的唯一缺点是在将PDLLA块从瓶子转移到注射器时可能会增加污染率。因此，这一程序应由经过良好培训的专业人员在严格的无菌条件下进行。否则，二倍连续稀释是一种简单的方法，用于准备不同密度悬浮液的可注射PDLLA。
全文参考文献：
Chuan-Yuan Lin et al. Two-fold Serial Dilution: A Simple Method to Adjust Thickness of Injectable Poly-D,L-lactic Acid. Plast Reconstr Surg Glob Open. 2021 Aug 13;9(8):e3753.
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