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原文链接:10.1016/j.scib.2025.01.037
图文解析
方案1. 光笼的设计。硫缩酮和氧杂蒽的组合表现出与传统硫缩酮组分不同的光响应特性。
图1. 光笼的光活化性能表征。(a) SiR-EDT 经不同时间照射后的荧光。(b) SiR-EDT 经不同波长光照射后的荧光变化。(c) SiR、SiR-EDT 和光活化 SiR-EDT 的归一化吸光度光谱。(d) SiR-EDT 的降解速率和 SiR 在混合溶剂中的再生速率。(H2O/MeCN= 9:1)。(e)在所示光照射时间下采集的 SiR-EDT 的HPLC 光谱。 (f) 在所示照射时间下采集的 SiR-EDT 的 1HNMR 光谱(6.6–8.5
ppm)。
图 2. 光反应要求探索。(a)SiR-EDT 光活化产物中元素的分析(+:发现;-:未发现)。(b、c)在有氧或无光的情况下 SiR-EDT 的荧光变化。(d、e)不同 pH 范围内 SiR-EDT 的光活化。(f)不同 pH 下 SiR-EDT 在 480 nm 处的荧光强度。SiR-EDT 在极酸性条件下质子化并抑制光活化。
图3. ROS生成测定与理论计算。(a)SiR和SiR-EDT在不同光照时间下的ROS生成曲线。(b)410 nm光照下DHR 123在525 nm处的荧光强度变化。(c)410
nm光照下ABDA在400nm处的吸光度变化。(d)1O2清除剂(TEMP)对SiR-EDT光活化速率的影响。(e)光反应推测的光反应机理。激发态SiR-EDT。直接异质断裂为两性离子(路径A)或被激发态SiR氧化。(f)SiR-EDT的基态(S0,左)和激发态(S1,右)的HOMO和LUMO。(g)不同反应途径的∆G(kcal mol−1)。
图 4. 活细胞成像。(a)405 激光下 HepG2 细胞中 SiR-EDT 的光激活。(b)405 nm 光照射下 SiR-EDT 在光激活和光漂白过程中的细胞内荧光强度变化。(c)HepG2 细胞中光激活的 SiR-EDT 和 ER Tracker Red 的共定位成像。比例尺:10 μm。
图5. 靶向光笼的合成路线及成像。(a)细胞器靶向光笼的合成方法。(b)细胞器靶向光笼的结构式。(c)细胞器靶向光笼在活细胞中的光激活及共定位成像。比例尺:10 μm。
图6. Halo-tag光笼在活细胞中的成像。(a)Halo tag探针的合成方法及目的蛋白的成像方案。(b)核小体和F-actin的共聚焦成像:虚线上方为未转染的细胞,虚线下方为已转染的细胞。比例尺:10 μm。
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