作者
李玉明，唐艳红，王晓倩，朱爱如，刘冬冬，何艺芸，郭虎，郑杰，刘芯卓，迟凤瑜，王延群，庄珍，张昭勇，刘冬兰，陈钊，李芳，冉伟，余快，王东，文李艳，卓健芬，张艳君，席寅，肇静娴，赵金存，孙静
单位
摘要
严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS-CoV-2）是 COVID-19 的病原体，它可编码多个附属蛋白，这些蛋白在调节先天性免疫反应中起着至关重要的作用。然而，它们在病毒感染细胞中的表达以及在感染人和小鼠中的免疫原性了解并不充分。在本研究中，我们采用荧光素酶免疫沉淀系统（LIPS）、免疫荧光检测（IFA）和免疫印迹（WB）等多种技术检测了 COVID-19 患者血清中的附属蛋白特异性抗体。通过LIPS方法，可以检测到针对蛋白3a、3b、7b、8和9c的特异性抗体，但IFA和WB方法只能检测到蛋白3a的抗体。在LIPS检测结果中，蛋白 3a 和 7b 的抗体只在 ICU 患者中检测到，这也许能作为预测疾病进展的一种标志物。此外，我们还对 SARS-CoV-2 感染细胞中附属蛋白的表达进行鉴定分析，并确定了蛋白 3a、6、7a、8 和 9b 的表达。我们还分析了它们在免疫小鼠体内诱导抗体的能力，发现只有蛋白 3a、6、7a、8、9b 和 9c 能够诱导产生可测量的抗体，但这些抗体缺乏病毒中和活性，且不能保护小鼠免受 SARS-CoV-2的感染。我们的研究结果验证了SARS-CoV-2附属蛋白的表达，并阐明了它们的体液免疫反应，为蛋白检测试验及其在发病机制中的作用提供了依据。
图S3 检测SARS-CoV-2感染的Caco-2细胞中附属蛋白的表达
图S4 表达SARS-CoV-2附属蛋白的真核表达质粒和VRP的构建
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