1 发病情况
山东省某养殖场在7月份饲养了10 000只蛋鸡,饲养到3周龄时出现腹泻、产蛋率下降、个别死亡等症状。本批次产蛋鸡日龄在240~290 d,产蛋率下降了30%,蛋鸡每日死亡率为0.08%,临床剖检可见肝脏肿大破裂、肌胃溃烂等症状。使用抗菌消炎药物治疗效果不好,经调查发现该批次蛋鸡中途更换过一次饲料,更换全价饲料使用4周后出现该症状。
2 临床症状
蛋鸡采食量持续下降、开始出现消瘦;产蛋率下降30%~50%,且出现蛋壳变薄、颜色变淡,蛋黄颜色变浅;鸡冠发白、萎缩、翅膀下垂、无精神、张口呼吸以及体温升高等,眼睛、嘴角部位出现小颗粒状肿瘤病变;蛋鸡在料槽内呕吐,粪便呈黑色且含有未消化的饲料。
3 剖检变化
剖检了10只发病鸡,其中有5只肌胃溃烂、有溃疡灶,个别鸡的腺胃肿大、出血,腺胃壁增厚;此时应与鸡传染性胃肠炎区分,防止过度用药而无治疗效果。肝脏全部肿大、出血坏死、有出血点,表面有大量的胆汁淤积,硬化,黄染。脾脏肿大,有灰白色结节。气囊浑浊、增厚,有小米粒结节。2只蛋鸡肺脏出血、纤维素性症状。有的胸腺萎缩、法氏囊内有红色分泌物,泄殖腔出血。每只鸡肠道内黏膜脱落严重。卵巢均出现充血,其中5只鸡的卵巢破裂,形成卵黄腹膜炎。
4 实验室诊断
4.1 细菌分离
细菌分离实验必须在无菌环境下进行。打开腹腔,取出肝脏,涂布接种于一次性无菌麦康凯琼脂平板进行细菌分离培养。37℃条件下恒温箱培养24 h,400倍显微镜下观察,发现有霉菌孢子并伴有菌丝。
4.2 分子生物学检测
利用核酸提取试剂盒提取总RNA,使用诺维赞试剂公司的反转录试剂盒(货号R211)进行逆转录,按照试剂盒说明书操作进行,提取后放入-20℃冰箱保存。与新城疫、鸡传染性支气管炎、鸡传染性鼻炎、高致病性禽流感、鸡马立克病毒进行鉴别诊断。实验结果检测均为阴性。
4.3 饲料检测
酶联免疫吸附方法是采用抗原抗体结合的方式,将霉菌毒素特异性抗体包被在微孔中,与样品中的抗原结合,该方法比较简便、快速、灵敏,成本相对较低。免疫层析技术是新型的免疫染色技术,具有检测范围广、实用性强,便于运输的特点[2]。
取同批次正在饲喂的饲料进行检测。采用酶联免疫吸附方法和胶体金免疫层析方法,检测项目有黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮毒素F2和呕吐毒素,两种方法检测结果显示均超国家标准(GB13078-2017)[3]。
5 诊断结果
根据发病情况、临床症状、病理变化与实验室检测结果综合判定为蛋鸡霉菌毒素中毒。
6 治疗与预防
6.1 治疗方法
一旦确诊为霉菌毒素中毒,首先要停止使用原饲料,更换新鲜无污染饲料。蛋鸡在中毒早期,可以服用人工盐等盐类泻药,同时饮水中加入多维或者灌服绿豆汤、甘草水等能够缓解中毒。另外,每只鸡灌服3~5 IU制霉菌素,每日2次,连用3 d以上。蛋鸡中毒的中后期可能会出现混合感染的情况,可饲喂肠道黏膜修复药物,同时修复肝肾损伤,并在饲料中添加饲料脱霉剂,连续饲喂30 d[4]。饲料中添加多维,可提高饲料中的营养蛋白质的利用率,增强蛋鸡抵抗力。
脱霉剂又叫霉菌毒素吸附剂,能够降低或消除饲料中的霉菌毒素。脱霉剂分为有机类和无机类,有机类包括酵母、酵母细胞壁等生物多糖和生物酶类,无机类包括活性炭和硅铝酸盐类。饲料中需添加脱霉剂至少1个月,同时提高饲料中的营养物质含量。
6.2 预防方法
6.2.1 饲料管理
饲料采购时要经过严格的筛选以及检测,禁止从霉菌毒素污染严重的地区采购,禁止收购霉变谷物。饲料、谷物要严格按照规定要求进行存放,严格控制饲料的含水率,且保存饲料的仓库要能通风且干燥,定期观察仓库温度、湿度,湿度要控制在75%以下,一旦超过要进行除湿。饲料存储罐要做好定期消毒密封工作,防止霉菌入侵[5]。
饲料的购入,必须要保证含水率低于13%,所有饲料底层垫有防潮板并与墙面保持20 cm左右的距离。饲料中的麦麸含水量高,最容易霉变,麦麸的使用要控制在购买2周内。在夏季高温高湿、梅雨季节的时候,饲料要随加工随使用[6]。
6.2.2霉菌毒素的脱霉
脱酶剂中的葡聚糖、几丁质上面的化学键与毒素结合,可达到清除霉菌毒素的目的。脱酶剂上的葡聚糖化学结构与霉菌毒素之间有亲和性,吸附毒素,两者之间形成特异性的互补结构,最后通过肠道排出体外[7]。有相关研究表明,在饲料中添加0.11%的脱酶剂可以降低霉菌毒素对蛋鸡的伤害[8]。
霉变饲料处理有化学和物理两种方法,化学方法是使用酸、碱、氧化剂等化学试剂分解霉菌毒素;物理方法是使用霉菌毒素吸附剂,通过胃肠道吸附后粪便排出。目前常用的方法有氨化法、石灰水浸泡法、膨润土法等。氨化法主要是将含有霉菌毒素的饲料置于25℃环境下,并提高饲料中含水量至18%,使用1.5%氨水喷洒或雾化的方式进行饲料处理。石灰水浸泡法主要是将含有霉菌毒素的饲料原料浸泡在0.9%的石灰水中,浸泡10 h,可除去饲料原料中99%霉菌毒素。膨润土法主要通过饲料中拌入主要成分为蒙脱石的膨润土,膨润土会吸附少量的蛋白物质赖氨酸以及维生素等,吸附较少,基本不影响饲料营养结构。
霉菌毒素吸附剂的使用方法是在饲料中添加霉菌毒素吸附剂,一般预防剂量是一吨饲料中添加1 kg吸附剂;饲料解毒的剂量是一吨饲料中添加2 kg吸附剂。一般蛋鸡会食用谷物,可在谷物饲料中添加真菌抑制剂。霉菌毒素吸附剂具有添加后可快速、均匀吸附毒素及对人类和动物健康无危害的优点。
6.2.3 加强饲养管理
提高养殖场养殖人员的养殖技术,同时提高饲料检测效果。家禽的饲养管理需要包括家禽品质选择以及家禽免疫预防管理。研究表明,家禽母体的质量直接影响下一代的存活率。科学饲养,改善环境,饲喂营养全价饲料,勤添饲料,少料多顿,夏季时要及时清理发霉变质的饲料。夏季高温高湿时,尽可能的让饲料罐车远离水帘。蛋鸡饮水的水线要定期清理、清洗和消毒,保证鸡饮水干净[9]。
霉菌毒素的孢子一般会附着在粉尘上,因此要保证鸡舍通风良好,干净卫生,减少粉尘。同时对圈舍进行消毒,连续使用3 d后,要进行检测。
目前,养殖场对霉菌毒素的认知常常忽略了临床危害,霉菌毒素对蛋鸡的机体是不可逆的伤害,可以加重肝肾负担,损伤肝肾等器官。饲养人员以为饲料中加入某种单一的脱霉剂就可以避免霉菌毒素的伤害,但实际生产应用中霉菌毒素脱霉剂的作用是单一的,不能同时减少多种霉菌毒素的危害,因此对鸡群的临床危害还是存在。
7 体会
霉菌毒素污染对蛋鸡健康的影响是非常大的。有相关研究表明,霉菌毒素种类中对蛋鸡影响最大的是黄曲霉毒素B1,其次是呕吐毒素;影响相对较小的是玉米赤霉烯酮毒素F2。动物饲料中霉菌毒素的污染全球均有发生,主要是玉米含量过高,而玉米含水量高容易发霉变质,产生霉菌毒素。相关研究调查发现,11个省1 000多个饲料样本进行抽检,饲料霉菌毒素超标污染率高达95%以上。饲料原料南方地区污染比较严重,饲料成品北方地区污染相对高一些[10]。
玉米蛋白高,是饲料能量的主要来源。玉米为何感染霉菌毒素较高?这个主要与玉米生长的气候条件相关,当玉米在成熟、收获的时候降雨量过多,晾晒不好,容易造成玉米发霉。玉米品质的选择,有时候肉眼查看的无霉变饲料在实验室检测却含有霉菌毒素,可见霉菌毒素肉眼是看不见的,饲料原料玉米的收购企业要加强关注,做好批次检测。不论是人还是动物,均是民以食为天,必须要严格标准、严格监管、严格处罚,加强食品安全监管,饲料作为养殖业最重要的一环,要重点监管动物性食品安全。霉菌毒素可以引起人和动物的细胞毒性、免疫毒性、生殖毒性以及癌变。动物食用霉变饲料后中毒,一旦监管不严,流入市场,则进入人食物链中而危害人的健康。
每年的秋冬季节,蛋鸡霉菌中毒的发病率会增多,主要可能与新上市的玉米水分偏大有关,水分过高容易滋生霉菌。玉米主要产生黄曲霉毒素,可抑制机体内蛋白质的合成,蛋鸡在食用后肝脏变脆、易碎,主要由于机体代谢过重、免疫下降导致。因此,要引起对蛋鸡霉菌毒素中毒的重视,加强饲料检验检测,必要时在饲料饲喂时添加脱霉剂等。
[1]王占东.一例蛋鸡霉菌毒素中毒的诊断与治疗体会[J].家禽科学,2024,46(05):57-60.