作者 | 朱妙珊
单位 | 惠州市惠阳区妇幼保健院
放线菌属为革兰阳性无芽孢杆菌,广泛存在于土壤、植物、空气及江河湖泊等自然环境中,是存在于人体口腔、消化道、生殖道的正常菌群[1]。
放线菌可引起面颈部、胸部、腹部、盆腔和中枢神经系统等感染,表现为多发性脓肿、窦道、硫磺颗粒分泌物,放线菌感染病例通常会合并其它细菌的感染。
路邓葡萄球菌为凝固酶阴性革兰阳性球菌,主要引起皮肤软组织感染[2]。
本文报道1例腹腔镜术后切口纽氏放线菌合并路邓葡萄球菌感染病例。
患者女,42岁,2020年9月3日行腹腔镜下左侧卵巢囊肿剥除术+右侧输卵管系膜囊肿摘除术+右侧卵巢剖视术”,术后1月余开始出现脐部术后切口疼痛,稍红肿伴瘙痒,有少量黄白色恶臭味液体渗出;
彩超示:脐部低回声区,范围约23×19mm,疑炎性改变,予切开引流治疗后好转。
2021年初患者再次出现脐部疼痛、红肿伴瘙痒,无渗液、发热等不适,予药物贴敷治疗后好转。
2024年05月19日又再次出现脐部疼痛、红肿伴瘙痒,来我院就诊,查彩超示:脐下方异常声像,皮下软组织内可探及三个稍低回声团,大小分别约9x15mm、9x11mm、5x6mm,疑炎性包块。门诊建议住院进一步治疗,患者未予采纳。
2024年5月23日,患者自行予“平安膏”涂抹脐部后出现脐部脓液大量渗出,呈黄白色颗粒样,味臭,疼痛较前缓解,仍有红肿、瘙痒等不适,脐部下方可触及一个肿物,表皮破溃,大小约0.9cm×1.5cm,边界清,挤压可见少量黄白色颗粒样分泌物渗出。遂入院行腰硬联合麻下腹壁病损切除术,切口分泌物送检细菌培养。
送检的切口分泌物为黄白色颗粒样,在5%C02 条件下,35℃培养24小时见针尖样菌落生长至第二区,同时在第一区伴有淡黄色不溶血的菌落生长,分别对两种细菌进行分纯培养,通过珠海美华质谱仪鉴定分别为纽氏放线菌,分值2.1(见图1)、路邓葡萄球菌,分值1.9(见图2)。
图1 纽氏放线菌质谱鉴定结果
图2 路邓葡萄球菌质谱鉴定结果
纽氏放线菌经分纯后在35℃,5% CO2条件下培养48小时,为灰白色圆形凸起菌落,无溶血环(见图3),涂片经革兰染色镜检为革兰阳性杆菌(见图4)。
图3 纽氏放线菌35℃血平板培养48h菌落形态
图4 纽氏放线菌革兰染色结果(10x100)
另一株葡萄球菌经迪尔DL-96A细菌鉴定系统鉴定为路邓葡萄球菌,纽氏放线菌经北京睿博兴科生物技术有限公司靶向DNA 测序,结果为Winkia neuii(NR042429.1)99.929%(见图5)。
图5 纽氏放线菌靶向DNA测序结果
根据路邓葡萄球菌药敏结果(见图6):对青霉素耐药,对头孢西丁、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、红霉素、左氧氟沙星、庆大霉素、四环素、复方新诺明、万古霉素、利奈唑胺均敏感。
因本实验室使用的鉴定药敏系统无放线菌属的,无法开展放线菌的药敏试验,临床结合路邓葡萄球菌的药敏结果与 《热病——桑福德抗微生物治疗指南》 ,推荐放线菌的治疗方案(见图7);
临床选择静脉滴注克林霉素0.3g q8h 治疗一周后,复查切口分泌物细菌培养为无致病菌生长,出院后随访两个月,患者切口恢复良好,无异常。
图6 细菌鉴定及药敏结果
图7 《热病——桑福德抗微生物治疗指南》中的放线菌属治疗推荐方案
临床外科手术切口感染的病原菌主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌最为常见[5][6],而由纽氏放线菌合并路邓葡萄球菌感染的病例非常罕见。
纽氏放线菌是一种棒状的革兰氏阳性菌,于上世纪90年代早期被人们鉴别发现,该病菌主要与浅表软组织感染、脓肿及术后感染相关;
路邓葡萄球菌为凝固酶阴性葡萄球菌,以首次分离该菌的法国城市里昂的拉丁名lugdun命名,凝固酶试验用玻片法常鉴定为阳性。
可引起医院获得性感染与社区获得性感染,如皮肤软组织感染、肺炎、脑膜炎、血流感染与心内膜炎,此菌对青霉素的耐药率较高,对临床大部分抗菌药物较敏感。
此外,路邓葡萄球菌可产生路邓菌素,在体外能杀死金黄色葡萄球菌,故其在鼻腔内的存在与金黄色葡萄球菌的鼻腔定植呈负相关,故此菌也作为一种益生菌而进行开发,用于防止或根除金黄色葡萄球菌定植。
近年来,随着质谱技术的应用,在临床分离出许多新型的放线菌种类[3][4]。本例患者在腹腔镜术后切口反复感染,黄白色颗粒样脓液有臭味,应引起高度重视。
综上所述,放线菌感染引起腹腔镜术后切口感染,脓液细菌培养有助于疾病的确诊,由于某些医疗机构的细菌培养和鉴定条件的限制,有可能会造成放线菌漏诊情况,影响临床治疗效果造成切口反复感染,由此可见质谱鉴定在临床上发挥着重要的作用。
点评专家:王健 副主任技师 惠州市惠阳区妇幼保健院检验科
对于一些罕见菌株,依靠传统的鉴定方法很难明确病原菌,质谱技术检验获取结果的时间比传统方法更短,从而快速鉴定出细菌的种属。
本病例中的纽氏放线菌通过质谱技术快速鉴定出来,根据放线菌的经验治疗方案指导临床应用抗生素治疗,可见质谱鉴定技术大大提高了微生物实验室的工作效率与准确性,对于患者后续治疗方案的合理制定具有良好的促进意义。
参考文献
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编辑:李玲 审校:陈雪礼