生长缓慢、抗酸阴性、弱抗酸阳性,感染真凶直指诺卡菌!

健康   2024-11-09 11:10   湖南  


作者:覃英诚  林丽
单位:南方医院检验医学科



诺卡菌是一种革兰阳性、专性需氧细菌,广泛分布于土壤、空气和腐败的植物中。目前已发现100多种,通常引起人和动物致病的是星形诺卡菌(90%)、巴西诺卡菌、鼻疽诺卡菌、豚鼠耳炎诺卡菌。


豚鼠耳炎诺卡菌是一种机会致病菌,其发生的感染在临床上少见,仅占诺卡菌属感染的5.9%[1,2],通常能引起肺部感染、皮肤感染及中枢神经系统感染。本文旨在回顾性探讨一例呼吸道感染豚鼠耳炎诺卡菌案例,为临床诊疗该菌提供诊治思路。



案例经过




患者中年女性,因“反复咳嗽、咳痰10余年,加重伴气促10余天”入院,既往有支气管扩张的诊断。患者10月8日入院后查胸片及CT,提示双肺支气管扩张并感染。入院查体,胸部胸廓、呼吸运动、肋间隙、语颤未见异常。听诊双侧下肺可闻及湿罗音。


实验室检查,相关感染指标升高:白细胞计数WBC 11.63×109/L ↑、C-反应蛋白CRP 16.44mg/L ↑、血浆纤维蛋白原Fbg 4.40g/L ↑。肝功、肾功、电解质、BNP、高敏肌钙蛋白、降钙素原等检验结果未见明显异常。


微生物检查:自然咳痰抗酸菌涂片、一般细菌真菌涂片、一般真菌培养及鉴定 阴性。10月11日行纤维支气管镜检查, 肺泡灌洗液细胞学检查提示:有核细胞计数 750x106/L ↑、中性粒细胞 90.0% ↑、嗜酸性粒细胞 5.0% ↑、肺泡巨噬细胞 2.0% ↓;革兰染色结果:查到阳性杆菌,长丝状,疑似诺卡菌


患者肺泡灌洗液革兰染色见线状阳性杆菌

抗酸菌涂片检查、抗酸镜检结果:查到抗酸杆菌 -、弱抗酸杆菌 +,镜下为长丝状,疑似诺卡菌。

抗酸染色阴性

弱抗酸染色阳性

Xpert检查阴性,肺泡灌洗液培养5天培养出豚鼠耳炎诺卡菌,质谱鉴定结果见图:

质谱鉴定结果

治疗过程:入院后予哌拉西林他唑巴坦4.5g q8h(10月9日至10月15日)抗感染、化痰、止咳等治疗。但患者咳嗽、咳痰症状未见明显好转,抗酸染色提示诺卡菌后加用利奈唑胺0.6g q12h+磺胺甲恶唑甲氧苄啶0.96g Tid抗感染治疗。最后患者的症状得到有效缓解。



案例分析



本案例中,患者支气管扩张伴感染诊断明确,咳嗽、咳痰症状明显,感染指标高,经验性应用哌拉西林他唑巴坦抗感染治疗未见明显效果。在完善相关病原学检查过程中,患者肺泡灌洗液常规的革兰染色结果提示镜下查到革兰阳性杆菌,为长丝状,疑似诺卡菌。根据形态特点,我们对比了患者抗酸染色及弱抗酸染色的结果,发现患者抗酸染色阴性而弱抗酸染色为阳性,进一步加深了我们的猜测。

于是,我们与临床进行沟通,建议患者行诺卡菌抗感染治疗,临床采纳了我们的建议,将抗生素调整为利奈唑胺联合磺胺甲恶唑甲氧苄啶,以覆盖可能的诺卡菌感染。调整抗生素后,患者的症状逐渐得到改善,体温下降,咳嗽、咳痰减轻。为进一步明确病原体,我们延长培养时间,培养到第2天时可见干燥、白色凸起,圈状菌落,分纯后次日质谱鉴定结果显示为豚鼠耳炎诺卡菌,证实了我们的初步猜想。同时为进一步确认诊断,临床也采取了分子生物学方法,NGS同样也证实了豚鼠耳炎诺卡菌的存在。

于是我们参照M45-3d进行了药敏检测,药敏结果提示患者对磺胺甲恶唑甲氧嘧啶(复方新诺明)、利奈唑胺、环丙沙星、多西环素敏感(a-d),与医生所选抗感染方案完美契合。

 

 

总结



细菌性肺炎的诊断需要有明确的病原学证据,目前,诺卡菌感染的诊断需要借助微生物培养及鉴定、染色、分子测序等手段。

微生物培养及鉴定能够为临床提供准确的病原学证据,但是由于诺卡菌生长缓慢,容易被工作人员遗漏。分子测序能够较为快速的提供病原学感染线索,但成本较高。而革兰染色和抗酸染色是基本的染色方法,其成本低廉,且有经验的工作人员能够快速地根据染色大致将细菌进行分类,甚至定位至某些细菌的种属。

本例患者革兰染色及抗酸染色(放线状)能够初步提示诺卡菌感染,NGS结果回报前加以确证,提前使用上抗感染治疗方案,使患者症状得以改善。这提醒我们微生物工作人员应当重视日常涂片,加强自身识菌能力。

另外,由于诺卡菌生长缓慢,如果发现干燥菌落涂片疑似诺卡菌时,通常需要延长培养时间(5-7天)。且诺卡菌药敏结果参照的是M45-3d的折点,也需要72-120小时才能进行结果判读[3],因此我们可以先根据涂片及鉴定结果报告临床医生,提醒医生根据患者病情经验性用药。

复方磺胺甲恶唑甲氧嘧啶、阿米卡星、环丙沙星、利奈唑胺及多西环素为常用药物[3],但复方磺胺甲恶唑甲氧嘧啶近年来耐药率逐渐升高,而利奈唑胺为100%敏感的药物[4]。本例患者采用复方磺胺甲恶唑甲氧嘧啶联合利奈唑胺进行经验治疗,幸运的是,这种组合方式刚好与我们进行的体外药敏实验结果一致,最终患者抗感染成功。

【参考文献】

[1] Wang, H., et al., Epidemiology and Antimicrobial Resistance Profiles of the Nocardia Species in China, 2009 to 2021. Microbiology spectrum, 2022. 10(2): p. e0156021-e0156021.

[2] Zhang, L., et al., Weathering the storm: diagnosis and treatment of a life-threatening disseminated Nocardia otitidiscaviarum infection. Frontiers in cellular and infection microbiology, 2024. 14: p. 1397847.

[3] Clinical and Laboratory Standards Institute. CLSI document M45-A. Methods for antimicrobial dilution and disk susceptibility testing of in-frequently isolated or fastidious bacteria; 3rd edition [S]. Waney. PA: CLSI,2016.

[4] HOZA AS, MFINANGA SGS, MOSER I, et al. Isolation, biochemical and molecular identification of Nocardia species among TB suspects in northeastern,Tanzania; a forgotten or neglected threat? [J]. BMC Infect Dis, 2017, 17( 1) : 407. 

 

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编辑:yeah  审校:小冉

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