今天介绍的文献是发表在Nature Communications期刊上的研究：
之所以介绍这篇文章，是因为这项研究几个地方做的很好：
1. 临床意义：该研究不仅揭示了TLR4信号调控的新机制，而且为治疗与TLR4信号过度激活相关的疾病，如败血症和自身炎症性疾病，提供了潜在的新靶点。
2. 创新性：研究的创新性体现在识别了RHBDL4作为TMED7的新切割底物，并阐明了其在TLR4信号调控中的重要作用。此外，将RHBDL4与川崎病联系起来，为理解该疾病的分子机制提供了新视角。
3. 关键科学问题的凝练：研究凝练了关键的科学问题，如RHBDL4如何调控TLR4信号、TMED7在其中扮演的角色，以及这一调控轴如何影响炎症反应等。
4. 研究设计：研究设计严谨，从分子机制探究到动物模型验证，再到临床相关的病理模型研究，层层递进，逻辑清晰。特别是负反馈调节回路的发现，显示了研究的深度和广度。研究探讨了内膜蛋白酶RHBDL4 (关键分子1)对COPII适配蛋白TMED7(关键分子2)的调控作用及其在TLR4介导的炎症信号（下游信号通路）中的功能。研究发现RHBDL4缺失会导致败血症和自身炎症性疾病（相关疾病）的炎症反应增强和生存率降低；此外与川崎病（相关疾病）相关的RHBDL4突变会加速其降解并影响其功能。具体机制上，RHBDL4能够触发TMED7的降解，进而抑制TLR4的细胞表面运输和减少TLR4介导的炎症反应；而TLR4激活能够诱导RHBDL4的转录上调，形成负反馈调节回路（分子机制）。![]()
1）为了探究RHBDL4对特定TMED/p24蛋白的降解作用，进行了SILAC和定量质谱分析实验，检测了RHBDL4敲除细胞中膜蛋白的变化，发现TMED2、TMED7和TMED10在RHBDL4缺失细胞中的稳态水平增加，表明RHBDL4通过ERAD途径调控这些蛋白的丰度。2）为了了解RHBDL4如何识别并切割TMED7，构建了一系列TMED7和TMED9的嵌合体，并检测了RHBDL4对它们的切割效率，发现只有包含TMED7的luminal结构域的嵌合体被RHBDL4有效切割，揭示了TMED7的luminal结构域对其作为RHBDL4底物的重要性。3）为了研究RHBDL4缺失对TLR4信号传导的影响，研究者在THP-1细胞中敲低RHBDL4，并检测了TLR4细胞表面水平及LPS诱导的炎症因子表达，发现RHBDL4缺失导致TLR4细胞表面水平上升和炎症因子表达增加，说明RHBDL4通过调控TMED7影响TLR4信号。4）为了评估RHBDL4缺失对全身炎症反应的影响，研究者对RHBDL4敲除小鼠进行了LPS挑战实验，并检测了血清中炎症因子水平和生存率，发现RHBDL4缺失小鼠在LPS注射后炎症因子水平更高，生存时间缩短，表明RHBDL4在调节宿主对LPS反应中的关键作用。5）为了探究与川崎病相关的RHBDL4突变对蛋白稳定性的影响，研究者表达了RHBDL4 I165T突变体，并检测了其稳定性，发现I165T突变体的稳定性降低，并且通过自催化切割事件加速降解，说明该突变可能通过影响RHBDL4稳定性参与川崎病发病。6）为了研究TLR4信号是否调控RHBDL4表达，研究者在THP-1细胞和BMDMs中用LPS处理，并检测了RHBDL4的mRNA和蛋白水平，发现LPS处理后RHBDL4表达上调，揭示了TLR4信号和RHBDL4表达之间存在的负反馈调节机制。![]()
基金申请或者课题思路讨论合作请联系Alice：
![]()
