海南大学石东磊教授、西北大学化学与材料科学学院张健健教授和郭媛教授团队合作,两种新型自校准半乳糖苷酶β-gal探针,它们建立在独特的绿色/红色双发射荧光平台上。这两个探针固有地表现出不受β-gal活性影响的稳定绿色荧光信号,可作为可靠的内部参考。
检测衰老细胞(SnCs)主要依赖SA-β-gal,其传统检测方法多基于单波长荧光强度变化,容易受到光强波动、荧光淬灭及背景干扰等因素的影响,从而降低准确性。
因此,研究人员开发了一种新型双发射荧光探针(7a和7b),其荧光骨架基于苯并[a]氧杂蒽,并通过引入β-糖苷键作为SA-β-gal的特异性识别位点。探针在双离子态下同时发射绿色和红色荧光,其中绿色荧光由对β-糖苷酶活性不敏感的萘酚部分产生,作为稳定的内参信号,而红色荧光随着β-糖苷键被水解而变化,用于指示酶的活性水平。通过绿红荧光强度比值的自校准检测,探针有效避免了单波长荧光检测中因光强波动、荧光淬灭或背景干扰等因素导致的信号偏差,显著提高了检测的灵敏度和可靠性。![]()
此外,绿色荧光信号直接与探针浓度相关,使探针的分布可视化,而比值检测模式使SA-β-gal活性在细胞和组织中的动态分布得以精确表征。这种探针为SA-β-gal活性的灵敏检测提供了可靠的工具,展示了其在细胞衰老研究中的重要应用潜力。原文链接:
https://doi.org/10.1016/j.cclet.2024.109681