使用大肠杆菌表达系统在生产生物制品时，会有少量E.coli表达菌HCP（大肠杆菌宿主蛋白）残留在生物制品的半成品或成品中。由于E.coli表达菌HCP（大肠杆菌宿主蛋白）具有免疫原性、生物活性或酶活性，会而影响生物制品的活性，因此在生物制品生产过程中需要对E.coli表达菌HCP（大肠杆菌宿主蛋白）残留量进行检测与控制，故E.coli表达菌HCP（大肠杆菌宿主蛋白）残留的检测是评价生物制品生产工艺的重要指标之一。
一.国际法规要求：
1. ICH Q6B指南：国际人用药品注册技术协调会（ICH）的Q6B指南指出，需要根据ICH准则采用敏感且经过验证的有效方法来监控残留的HCP，其残留量通常要求小于100ppm。
2. 美国药典（USP）：USP<1132>章节规定，用一种灵敏度较高的方法检测药品中HCP，其含量应该低于检测限（通常小于100ppm，即1mg总蛋白中HCP含量应小于100ng，也即<0.01%）。
3. 欧洲药典（EP10.0）：EP 2.6.34中规定，在生物制品中，HCP的含量应当小于0.1%。
二、中国药典要求（2020版）：
1. E.coli菌体HCP应不高于蛋白质总量的0.10%（1000 ppm）；
2. CHO细胞HCP应不高于蛋白质总量的0.05%（500 ppm）；
3. 假单胞菌HCP应不高于蛋白质总量的0.02%（200 ppm）；
4. Vero（乙脑疫苗）不高于2μg/ml；Vero（狂犬病疫苗）不高于6μg/ml。
君研生物自主研发的E.coli表达菌HCP残留检测试剂盒（货号：HC0111A-96）是一款针对生物制品中E.coli BL21菌株产生的宿主细胞蛋白进行残留检测的高灵敏度试剂盒，该试剂盒可以灵敏、特异、准确地检测生物制品在不同工艺阶段中E.coli BL21菌株的HCP残留。
测量系统的线性
试剂盒线性范围为：243-1ng/mL，共6个点，其线性相关系数符合R2≥0.98。
检测限
用样品稀释液作为样品进行检测，重复测定20次，得出20次测量结果的吸光度值（A值），计算其平均值（M）和标准差（SD），得出M+2SD所对应的A值。根据试剂盒标准品的标准曲线方程，将M+2SD所对应的A值带入上述方程中，求出对应的滴度值，即为检测限。
定量限
重复测定滴度为1ng/mL参考物质10次后，计算其测量偏差及变异系数CV。测量偏差不大于|±20%|，CV≤20%。
专属性
评估E.coli表达菌HCP残留检测试剂盒与HEK293 HCP、BSA、CHO HCP的特异性结合。结果表明，E.coli表达菌HCP残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法）与上述3种样品无特异性结合，该试剂盒可专属检测E.coli BL21菌株。
关于君研生物
君研生物科技（山西）有限公司成立于2021年，作为独立创新的研发、生产和销售为一体的高新技术企业，君研专注于为生物医药产业提供符合国际标准的质量安全检测产品和服务，公司顺利通过了GB/T 42061-2022 idt ISO13485:2016医疗器械质量管理体系认证，体系覆盖产品设计开发、生产和服务全过程，并且获得认证证书。君研生物始终坚持生物原料中国造，为生物医药安全提供国际品质的产品和专业的技术服务。
