阴道分泌物常规是每个检验人必备的技能,只需一人一显微镜即可完成检验。检验人大多通过带教老师口口相传形态特点,能鉴别阴道分泌物中不同的有形成份后便开始独立上岗,对有形成分的临床意义缺乏充分的认识,知其然不知其所以然。
在 2023 年最新的《阴道分泌物临床检验与结果报告规范化指南》[1] 中提到了这么一句话:「注意若查见真菌,应报告具体形态为孢子、芽生孢子或假菌丝。」初看时我不以为然,在审核报告时,甚至曾觉得这种报告模式「麻烦」,但在一次与临床沟通中让我发现,正是这种「麻烦」的检验报告,让我们检验人充分发挥专业特长,给临床提供更准确的结果判读,选择恰当的处置方案。
偶见孢子,未见芽生孢子或假菌丝
患者 A,女,21 岁,于近期出现外阴瘙痒症状,程度较轻,间歇性发作,未影响日常生活及睡眠。同时发现白带量较以往有所增多,无异味。患者为求诊治,遂来我院妇科门诊就诊。发病以来,患者无发热、腹痛、尿痛等不适;既往体健。月经史:13 岁初潮,月经周期 28~30 天,经期 5~6 天,末次月经:10 月 15 日,经量中等,色暗红,无痛经,否认妊娠。
医生申请了阴道分泌物检测,镜下鳞状上皮细胞 1/2 视野,白细胞 5~15 个 / HPF,未见红细胞,未见线索细胞,未见滴虫,偶见孢子,未见芽生孢子或假菌丝。让我们看一下,以下这 3 份检验报告,会如何影响医生对病情的判断和治疗方案的选择。
三种报告有何区别?
在【外阴阴道假丝酵母菌病中国诊治指南(2024 版)】中提到,在检出芽生孢子和(或)假菌丝相存在时才诊断为外阴阴道假丝酵母菌病(VVC),当表现为酵母相(孢子)时不诊断为 VVC(酵母相是酵母菌在适宜条件下的一种生长状态,通常不具备致病性,只有转化为菌丝相才具有致病性)[2]。
报告 1 中检出孢子可以明确提示临床,该患者病情轻,病程短,考虑 VVC 可能大;
报告 2 中提示真菌阳性,清洁度 Ⅲ 度,临床在不明确检出真菌形态时,结合 Ⅲ 度清洁度,可能会直接诊断为单纯性 VVC;
报告 3 中提示真菌阳性,结合清洁度 Ⅳ 度,临床可能会认为患者病情较重,诊断为重度 VVC。
VVC 的治疗原则中特别强调,在首次发作或首次就诊是规范化治疗的关键时期,尤其是规范化应用抗真菌药物治疗,防止耐药性产生 [2]。
对于 VVC 疑似病例,临床一般单独使用硝酸咪康唑栓或克霉唑栓。此类药物属于局部用药,对于阴道局部的真菌感染针对性强,能够在不影响患者全身生理功能的情况下,较为温和地缓解症状,抑制真菌生长,并且其剂型为栓剂,方便阴道给药,易于患者接受和使用。
对于单纯性 VVC 病例,指南中推荐以单疗程用药为主,常用药物有克霉唑、咪康唑、制霉菌素、氟康唑等。口服氟康唑可能会带来一些胃肠道不适等副作用,而且对于相对轻微的局部感染,局部使用硝酸咪康唑栓或克霉唑栓已经可以达到较好的治疗效果。
对于重度 VVC 病例,推荐以延长疗程为主,常用药物为克霉唑、咪康唑和氟康唑等,并外阴局部加用抗真菌药物或糖皮质激素以改善症状。相比疑似和轻度单纯性 VVC,重度 VVC 用药剂量更大、疗程更长,可能会对患者造成更大的身体负担和经济压力;且单次用药剂量过大时会导致阴道黏膜出现短暂不适感,包括烧灼感、刺痛感等,降低患者依从性。
综上,根据镜下查见上皮细胞和白细胞数量,考虑偶见孢子为正常定植,不表现致病性,因此清洁度应报告 Ⅱ 度为宜,应按报告 1 进行报告。
只有孢子没有菌丝时,需要提示临床吗?
VVC 是女性最常见的阴道炎。估计有 75% 的女性一生中至少有 1 次 VVC 发作,40%~45% 女性会发作 2 次甚至更多次,容易反复发作。VVC 通常由白假丝酵母菌(约占 85%)引起,其次为光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌及热带假丝酵母菌等。
白假丝酵母菌是一种革兰阳性真菌,广泛存在于健康人的上呼吸道、肠道和阴道中,其在不同环境条件下可以表现为酵母相和菌丝相两种形态,通常表现为酵母相(孢子)时无致病性;表现为菌丝相(芽生孢子、假菌丝)时具有致病性和侵袭性 [2]。
在正常阴道微生态中,由于温度、菌群及 pH 值相对稳定,假丝酵母菌表现为酵母相,菌量较少,相对不活跃,作为条件致病菌处于共生状态,不引起症状。
当外在环境发生改变,机体全身及阴道局部细胞免疫能力下降时,假丝酵母菌表现为大量繁殖并转变为菌丝状 [3],菌丝状的假丝酵母菌具有更长的丝状结构,这种结构更容易附着在宿主组织上,从而更容易侵入人体组织;同时菌丝状的假丝酵母菌能分泌一些致病因子,这类物质可以促进菌丝的生长和侵袭,增强致病性 [4]。
除环境因素外,营养因素也是影响假丝酵母菌形态和致病性的重要因素 [5],如在糖尿病患者中,高葡萄糖环境中,白假丝酵母菌更倾向于形成菌丝,可能是由于葡萄糖可以激活特定信号通路,促进菌丝相关基因的表达。
在查阅资料和咨询编写共识的专家老师后,建议当镜下只检出孢子,未检出芽生孢子或假菌丝时,应结合背景白细胞数量、上皮细胞数量和乳酸杆菌数量,查看患者现病史和体格检查,综合以上情况判断,给出合适的清洁度,而不是一检出孢子,立刻报告 Ⅲ 或 Ⅳ 度清洁度。
如:患者症状轻,首次发作或首次就诊,背景白细胞数较少,乳酸杆菌和上皮细胞数量正常,偶见孢子,未见芽生孢子或假菌丝,此时建议报清洁度 Ⅱ 度,考虑孢子为正常定植不表现致病性。
此外还有一种情况值得注意,随着近年免疫抑制剂在临床的广泛使用,以及免疫缺陷人群的增多,尤其是艾滋病患者人群增多。光滑假丝酵母菌的临床检出率明显增加。光滑假丝酵母菌的形态特点是只有孢子和芽生孢子,没有假菌丝,且光滑念珠菌对氟康唑天然耐药。因此当镜下只检出孢子和芽生孢子时,清洁度较高时,结合患者现病史和体格检查,应适当提示临床需要排除光滑假丝酵母菌感染。
由此可见,通过对阴道分泌物临床检验及结果报告的规范化和标准化,再结合自身经验遇到镜下仅见孢子的结果,主动沟通,询问患者,从而精确地报告描述真菌的形态及清洁度的判断,可以帮助临床更准确地判断病情轻重,有助于临床选择更合适的治疗方案,还可以帮助临床动态监测患者病情进展,直观了解疗效。
[1] 中华医学会检验医学分会血液学与体液学学组, 中华医学会妇产科学分会感染性疾病协作组. 阴道分泌物临床检验与结果报告规范化指南 [J] . 中华医学杂志,2023, 103 (1) : 10-17. [2] 中华医学会妇产科学分会感染性疾病协作组。外阴阴道假丝酵母菌病中国诊治指南 (2024 版)[J]. 中华妇产科杂志,2024, 59 (07):499-504.DOI:10.3760/cma.j.cn112141-20240326-00185.
[3]FarrA, EffendyI, Frey TirriB, et al. Guideline: vulvovaginal candidosis (AWMF 015/072, level S2k)[J]. Mycoses, 2021, 64(6):583-602.
[4]Arkowitz RA,Bassilana M. Recent advances in understanding Candida albicans hyphal growth[J].F1000 Res,2019,8
[5]KaliaN, SinghJ, KaurM. Microbiota in vaginal health and pathogenesis of recurrent vulvovaginal infections: a critical review[J]. Ann Clin Microbiol Antimicrob, 2020, 19(1):5.