莱顿大学分子免疫学SI van Kasteren教授团队开发了一种一种生物正交双荧光探针 CFSE-Tz，用于实时监测活细胞的营养吸收。
细胞的生存、生长和分化在很大程度上依赖于对外源营养物质的吸收。然而，在单细胞水平上量化小分子营养物质的吸收却很困难。
因此，研究人员提出了一种使用逆电子需求狄尔斯·阿尔德 (IEDDA) 化学研究活单细胞营养吸收的新方法，可以活细胞监测氨基酸、脂肪酸或 N-乙酰甘露糖胺。
这种在应变烯烃和四嗪荧光团之间的快速生物正交反应具有原则上非常有利于测量营养吸收的特性。首先，它具有出色的活细胞兼容性，因为试剂无毒且不需要（有毒）催化剂。
研究人员利用四嗪修饰了羧基荧光素-二乙酸酯-琥珀酰亚胺酯 (CFSE)——一种可以与蛋白质共价反应的淬灭荧光团，并且仅在酯酶活性后在细胞的胞质溶胶中打开。
该四嗪作为悬垂荧光团的第二个淬灭剂，在 IEDDA 反应中与用富电子或应变亲二烯体修饰的营养物质反应后，该淬灭基团被破坏，从而使探针发出荧光，因此允许活细胞免洗成像。
CFSE-Tz能够使用流式细胞术和活细胞显微镜监测活的原代免疫细胞群中各种含双烯体营养物质的吸收情况。
这种首次尝试以原则上与体内兼容的方式进行活细胞实时营养吸收，为免疫代谢工具包提供了一个有价值的补充，因为它使研究人员能够比较复杂群体（例如混合脾细胞）的吸收率，这将首次表明细胞 (免疫) 可利用的实际局部营养浓度如何影响其后续行为。
原文链接：
https://doi.org/10.1002/anie.202401733
