母乳是婴幼儿的最佳食物，母乳富含甘油三酯（TAG）等各类营养成分，TAG中最丰富的是1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯（OPO）和1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯（OPL）等2位棕榈酸（sn2-棕榈酸）。因此，OPO的添加在一定程度上弥补了婴幼儿配方奶粉与母乳之间TAG成分的差异。
在检测过程中，需要将OPO的同分异构体1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油三酯（OOP）与OPO分离开，福建医科大学公共卫生学院戴嵘德、傅武胜*和宁夏疾病预防控制中心的刘峰等研究旨在建立婴配中OPO含量的检测方法，以期为国家建立相关食品安全标准提供可靠的方法。
1 ELSD参数优化
2 色谱条件的优化
比较C18色谱柱、Luna色谱柱、Chromspher 5 Lipids银离子色谱柱对OOP和OPO的分离效果。从实验结果来看，C18色谱柱在二氯甲烷和乙腈为流动相进行梯度洗脱时，无法实现OOP和OPO的完全分离。对于Luna色谱柱，采用二氯甲烷-丙酮、乙腈-正己烷等梯度洗脱两种条件进行实验。结果表明，乙腈-正己烷体系的分离效果更好，故选择该体系进行继续优化，包括Agilent色谱柱的优化。
使用Chromspher 5 Lipids银离子色谱柱，流动相比例以Luna色谱柱的体系为参考，对比含不同比例乙腈的乙腈-正己烷为流动相，分别进样标准溶液和婴配样品，结果见图2、3。用0.55%乙腈-正己烷的流动相时，目标物的分离度高，达到基线分离，保留时间较0.5%乙腈-正己烷为流动相时更短，且实际样品OOP和OPO也能实现有效分离，因此选择0.55%乙腈-正己烷为流动相。
实际样品中TAG种类众多，在母乳和婴配样品分析中报道了以下几种。总碳数为48的饱和TAG 48:0，如PPP；总碳数为50、双键为1的TAG 50:1，如PPO、POP；TAG 52:2，如OOP、OPO、PLS和TAG 52:4，如LLP，TAG 54:3，如OOO、SOL，TAG 52:3，如OPL、PLO等。饱和、单不饱和和三不饱和的TAG在银离子色谱分离中预计不会与OPO、OOP重叠，但仍然必须排除OPO、OOP与样品中可能存在的其他不饱和TAG重叠的可能性，如PLS及其区域异构体。因此，利用现有标准品证实，在优化后的条件下，这些TAG异构体（PLS、OOP、PLO、OPL、OOO、LLP）在银离子柱中能与OPO明显分离（图4），PLS能与OPO、OOP有效分离，且OPL及其同分异构体也不对OPO的分离产生影响，可以认为该条件下OPO的色谱峰不存在其他TAG的干扰。
3 样品前处理优化
4 提取次数的考察
5 溶液膜过滤的考察
考察尼龙、聚四氟乙烯和聚偏氟乙烯3 种微孔滤膜（规格均为13 mm、0.22 µm）的过滤效果，OPO的回收率结果显示，3 种滤膜对于OPO的回收率影响小，均能满足要求。
6 方法验证
7 实际样品分析
利用研制的方法对我国39 份OPO强化婴配进行OPO检测，OPO含量占产品标示值比例如表2、图9所示；对比3 个段数（0～6、6～12、12～24 月龄）婴配之间该比值差异不大。本次调查OPO强化后婴配中OPO含量在5～20 g/kg之间，仅为OPO标示值（26～68 g/kg）的28.4%～59.7%，这可能主要因为本实验HPLC法测定特异性强，能将OPO与其同分异构体OOP分开。据了解，目前较多采用食品营养强化剂标准GB 30604—2015附录A中GC-FID法测定产品中OPO含量。从该方法分析原理可知，由于使用的气相色谱柱（DB-1 HT）无法将OPO和OOP分离开，测得结果为3 个脂肪酰基中总碳数为52的C52 TAG的总含量；本实验室研究表明，婴配中普遍含有较高含量的OOP，因此用GC-FID法测定OPO时，测定结果将明显偏高。
进一步研究表明，本法既能够将OPO与OOP分离，也能将OPO与其他C52 TAG分离开，能测定单一的OPO物质；所调查OPO强化婴儿、幼儿、学龄前配方奶粉中的OPO均能与OOP类干扰物较好地分离，这说明本方法能较好适用于婴幼儿食品中OPO含量的测定，并满足GB 14880—2012测定OPO纯品的要求。
结论
本方法通过优化银离子色谱柱的分离条件，成功实现了OPO与其同分异构体OOP，以及其他C52甘油三酯的分离，优化了ELSD的参数，建立了HPLC法，可精确测定婴配中OPO的含量，方法重复性好、准确度高，较好满足了婴配中OPO的检测需求；测定方法用于调查我国16 个品牌共39 份市售婴配中OPO的含量，结果表明，全部样品中以HPLC法测定的OPO含量仅为产品标签标示值的28.4%～59.7%，含量普遍较低，这很大程度因为测定方法之间的原理不同。
作者简介
1
第一作者
戴嵘德 硕士研究生
福建医科大学公共卫生学院，研究生，2016.09—2021.06就读于福建医科大学公共卫生学院预防医学专业；2021.09—至今，就读于福建医科大学公共卫生学院公共卫生专业（方向：食品卫生与食品安全），2023年5月以其他作者在Food Control发表“Occurrence and carcinogenic risk assessment of N-nitrosamines in some dried aquatic products in China”。
2
通信作者
福建医科大学公共卫生学院硕士生导师，福建省疾病预防控制中心，副所长，ISO 22000食品安全管理体系高级审核员，任福建省疾病预防控制中心卫生检验所副所长，长期从事食品营养与环境的检测与风险评估、突发卫生事件应急处置以及科普教育等工作。兼任食品安全国家标准审评委员会委员、福建省科协第九届委员，以及福建省药学会中药与天然药物专业委员会副主任委员、福州市中医药学会科普分会副主任委员、中华预防医学会食品卫生分会与卫生检验专业委员会委员、中国食品卫生杂志编委和海峡预防医学杂志编委等。主持国家自然基金项目等课题11 项，发表论文80余篇，（含20篇SCI/EI源论文），参编11 部著作，起草国家标准5 项、国际标准2 项，授权发明专利4 项。荣获省部级科技奖励（二等奖4 项）、福建省医学科技奖2 项和第十七届福建运盛青年科技奖，荣获福建省优秀留学人员、省卫生计生系统突出贡献专家、省直机关十大青年等称号。
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