Adv Sci丨华中农业大学金梅林/张强团队研究揭示NEP S-S-S基序磷酸化在vRNP核输出中起关键作用

学术   2024-11-23 19:46   浙江  


iNature

三个高度保守的丝氨酸残基S23、S24和S25 (S-S-S基序)的磷酸化已经在流感病毒的NEP中被发现。然而,这一基序是否以及如何调控vRNPs的核出口仍不清楚。

2024年11月22日,华中农业大学金梅林,张强共同通讯Advanced Science 在线发表题为Phosphorylation of S-S-S Motif in Nuclear Export Protein (NEP) Plays a Critical Role in Viral Ribonucleoprotein (vRNP) Nuclear Export of Influenza A and B Viruses的研究论文。该研究有助于更好地理解NEP调控vRNP核输出的机制,并为针对甲型和乙型流感病毒的抗病毒靶点提供了新的见解。

研究揭示产生携带NEP S23C, S24L或S25L的甲型H5N6流感病毒,允许破坏这些位点的磷酸化而不会使病毒NS1蛋白发生突变。发现这些突变显著抑制vRNPs核输出,降低病毒在小鼠体内的传染性和毒力。此外,抑制或敲除ATM或CK2,这两种预测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶磷酸化S-S-S基序,阻碍vRNP核输出和病毒在细胞中的复制,并降低体内毒力。此外,处理含有S-S-S基序的NEP肽模拟物,竞争性地阻断NEP与激酶的结合,可减少流感病毒在细胞和小鼠中的复制。然而,上述抑制剂和NEP肽模拟物均未显著抑制H5N6-DDD突变体的复制,这表明vRNP核输出需要S-S-S基序的磷酸化。

流感病毒核糖核蛋白(vRNP)的核输出依赖于核输出受体染色体区域维持1 (CRM1)介导的核输出途径,由基因组RNA、病毒核蛋白(NP)和三计量RNA依赖的RNA聚合酶复合物组成,是病毒生命周期的重要步骤。病毒核输出蛋白(NEP),又称非结构蛋白2 (NS2),在vRNP核输出中起关键作用。根据目前vRNP核输出模型,vRNP通过形成“菊花链”复合物从细胞核中输出,其中NEP作为连接vRNP-M1(基质蛋白1)和CRM1-GTPase Ran-GTP的适配器。然而,NEP调控vRNP核外运信号的详细机制仍有待全面剖析。

在甲型流感病毒和乙型流感病毒的NEP中鉴定出3个核输出信号,其中NES1和NES2位于NEP的N端,NES3位于NEP的C端。在vRNP核出口中,NES调控NEP功能。如前所述,NES1和NES2协调调节NEP-CRM1相互作用,而这两个NESs在这一过程中的确切作用尚不清楚。有趣的是,位于NEP的NES1和NES2之间的三个高度保守的丝氨酸残基S23, S24和S25的磷酸化已经被确定,然而,其功能需要进一步表征。

NEP S23C、S24L和S25L突变导致小鼠流感毒力降低(图源自Advanced Science 

研究旨在研究NEP的S-S-S基序磷酸化在流感病毒复制中的作用。研究展示了NEP S-S-S基序在甲型流感和乙型流感病毒的病毒复制中的关键作用。此外,研究发现S-S-S基序参与调控NEP在流感vRNP核输出中的功能。研究为流感病毒的抗病毒策略或靶点的发展提供了新的见解。


参考消息:

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202309477

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