首家门急诊PCR快检实验室启用,PCR仪派上用场了

文摘   2024-12-07 07:06   广东  




11 月 8 日,安徽医科大学第一附属医院检验科成立安徽省首家门急诊基因检测中心,并引进快速核酸检测技术。基因检测 2 - 4 小时内即可检测出呼吸道病原体,无需等待数天。针对肺炎支原体、肺炎衣原体、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒等常见呼吸道病原体进行检测。


“我们的基因检测技术可以在 2 个小时内告知患者是否感染了支原体,4 小时内即可出具明确诊断结果,无需等待数天,减少了不确定性。早期诊断可以及时隔离感染者,减少疾病在人群中的传播,特别是在医院内防止交叉感染。” 安徽医科大学第一附属医院南区检验科主任姜润秋表示,秋冬季节正是急性呼吸道感染的高发期,最近安徽省支原体呼吸道感染病例增多,新成立的门急诊基因检测中心派上了用场。



PCR 快检实验室的优势




(一)检测速度快


首家门急诊 PCR 快检实验室的基因检测技术能够在 2 - 4 小时内告知患者是否感染呼吸道病原体,这相比传统检测方法大幅缩短了所需时间。在秋冬季节急性呼吸道感染高发期,尤其是安徽省支原体呼吸道感染病例增多的情况下,这种快速检测能力显得尤为重要。以安徽医科大学第一附属医院为例,基因检测中心采集患者咽拭子样本后,利用快速核酸检测技术,能在 2 个小时内告知患者是否感染支原体,4 小时内出具明确诊断结果,无需像传统检测那样等待数天,减少了不确定性。



(二)准确性高


与传统抗体检测相比,基因检测在感染早期就能提供明确报告,避免了抗体产生的窗口期。人体在接受外源性微生物感染后,至少需要 2 到 3 天才能形成有效的体液免疫并产生抗体,而在这一窗口期内,传统抗体检测无法提供准确结果。但基因检测技术可以克服这一点,早在感染初期就能确认患者体内是否存在衣原体或支原体感染。例如,在临床细菌检验中,PCR 检验法的准确性较高,其细菌阳性检出率明显高于细菌培养法,且加特纳菌与棒状杆菌检测准确率也明显高于细菌培养法。此外,核酸检测 PCR 的准确率很高,可接近 100%,成为目前应用最广泛的新型冠状病毒感染的确诊方法。



(三)临床意义重大


可及时隔离感染者,减少疾病传播,特别是在医院内防止交叉感染。首家门急诊 PCR 快检实验室的启用,使得患者能够在短时间内得到准确诊断。早期诊断可以及时隔离感染者,减少疾病在人群中的传播,尤其是在医院这种人员密集的场所,能够有效防止交叉感染。例如,合肥市庐阳区首个移动快速 PCR 方舱检验实验室投用后,具备日检 2 万采样管 20 万人份核酸检测能力,将进一步提升全区核酸检测速度和疫情应急响应能力,通过传递窗传递标本,在不同区域进行不同的实验,确保工作人员和环境安全,以最快的速度斩断病毒传播链条。

帮助医生对症下药,避免不必要的药物滥用。基因检测可以迅速为急诊患者提供明确的诊断,帮助医生根据检测结果对症下药,避免不必要的药物滥用。特别是在重症病房,基因检测可以为不明原因发热的患者快速确定感染源,为治疗提供精准指导。

为不明原因发热的患者快速确定感染源。对于不明原因发热的患者,传统检测方法往往难以快速确定感染源,而 PCR 快检实验室可以通过对病原体的基因序列进行分析,在短时间内确定感染源,为患者的治疗争取宝贵时间。例如,在医院感染源追踪中,分子生物学技术可以利用 PCR 技术对病原体进行快速鉴定,通过测定 DNA 序列来鉴定病原体种类和亚型,为感染源的追踪提供有力支持。



检测项目及临床意义





(一)肺炎支原体


肺炎支原体是引起社区获得性肺炎的常见病原体之一,尤其在儿童和年轻人中常见。它主要通过呼吸道传播,感染对象广泛。肺炎支原体感染的临床意义主要有以下几个方面:

呼吸道感染:常表现为上呼吸道症状,如咳嗽、流涕、鼻塞等,也可累及下呼吸道,引起支气管炎、肺炎等。尤其是儿童和婴幼儿,是导致婴幼儿肺炎的主要原因之一。

疾病联合感染:常与其他病原体联合感染,如流感病毒、麻疹病毒等,使得疾病症状加重,延长病程。

慢性迁延性咳嗽:部分患者病程较长,主要表现为慢性迁延性咳嗽,常伴有轻度发热、胸闷等症状。

传播和预防控制:具有较高的传染性,很容易在家庭、学校等人群聚集场所传播。及时诊断和隔离感染源,对疫情的控制和防止疾病的传播具有重要意义。

临床诊断:主要依靠临床症状、流行病学史、实验室检查等。对于儿童和婴幼儿,早期诊断十分重要,可以避免错失治疗时机。



(二)肺炎衣原体


肺炎衣原体是引起呼吸道感染的重要病原体,症状与普通感冒相似,但病程较长,易引发并发症。肺炎衣原体感染会导致肺炎衣原体肺炎,引起急性肺部炎症,常累及上下呼吸道,引起咽炎、喉炎、扁桃体炎、鼻窦炎、支气管炎和肺炎等,引起相应的症状。早期表现为上呼吸道感染,即喷嚏、鼻塞、流清水样鼻涕、咳嗽、咽部烧灼感、声嘶,伴有发热、寒战、肌痛、头痛等全身不适,少数患者会出现咯血。肺炎衣原体感染时,也可出现肺外表现,如中耳炎、关节炎、甲状腺炎、脑炎等,表现为耳痛、关节痛、颈部疼痛感、头痛等相应炎症表现。



(三)腺病毒


腺病毒感染可引起呼吸道、消化道等多种疾病,在儿童中发病率较高,是儿童重症肺炎的主要病原体。腺病毒共有 49 个血清型,引起小儿肺炎最常见的是 3 型、7 型,其次是 11 型和 21 型。这种疾病常见于 6 个月至 2 岁的儿童,并且经常发生在冬季和春季。临床表现为起病迅速、高热持续时间长、中毒症状严重、啰音出现较晚、X 线改变较肺部体征出现早,容易合并心肌炎和多器官衰竭。腺病毒感染是由腺病毒引起的一种急性传染病,以侵犯呼吸道及消化道黏膜,眼结膜和淋巴结。主要表现为急性上呼吸道感染,其次为眼部和胃肠道感染。人群普遍易感,通常多见于儿童,约半数病人为隐性感染。



(四)甲型流感病毒


甲型流感病毒为常见流感病毒,具有高度传染性,易发生变异,易引起暴发流行。感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等,多数伴有严重的肺炎。人群普遍易感,儿童、老年人、慢性基础性疾病患者等易感。



(五)乙型流感病毒


乙型流感病毒具有高度传染性,症状与甲型流感相似。核酸检测可帮助医生准确区分甲乙两型流感病毒感染,为临床治疗提供指导。



(六)呼吸道合胞病毒


呼吸道合胞病毒主要引起 6 个月以下婴儿患细支气管炎和肺炎等下呼吸道感染,以及较大儿童和成人的上呼吸道感染。是婴幼儿病毒性呼吸道感染住院的首要因素,严重危害儿童健康,尤其对早产儿、患有先天性心脏病或原发性免疫缺陷的婴幼儿造成的疾病更重。核酸检测可以快速诊断呼吸道合胞病毒感染,有助于降低婴幼儿重症病例的发生。




快检仪器的性能验证





(一)准确性验证


为了确保首家门急诊 PCR 快检实验室检测结果的准确性,我们进行了严格的实验。选择了已知阴性结果的临床样本和第三方有资质的阳性质控品进行实验。实验中,共选取了临床样本和阳性质控品各若干例,其浓度为厂家声明其最低检测下限的 1.5 - 3 倍。通过对这些样本进行检测,计算阳性符合率和阴性符合率。最终结果显示,阳性符合率和阴性符合率均达到了≥95% 的标准要求,充分证明了该快检实验室检测结果的准确性。



(二)精密度验证


在精密度验证方面,选择已知阴性结果的临床样本和强阳性质控品进行实验。将强阳性质控品按 2 - 3 倍梯度稀释至厂家声明其最低检测下限以下,每个浓度重复测定 10 次。实验结果表明,阴阳性需 100% 符合,且阳性标本重复检测的 CT 值小于 5%,符合精密度验证的标准要求。这意味着该快检实验室在检测过程中具有较高的稳定性和重复性。



(三)检测限验证


对强阳性质控品进行梯度稀释是检测限验证的重要步骤。我们将第三方有资质的强阳性质控品按 2 - 3 倍梯度稀释至厂家声明其最低检测下限以下,每个浓度重复测定 10 次。根据可接受标准,≥95% 最低检测下限浓度以上的样本结果为阳性。实验结果显示,在最低检测下限浓度以上的样本均呈现阳性结果,验证了该快检实验室的检测限符合要求。



(四)采样管的适配灵敏度验证


为了验证采样管的适配灵敏度,我们取待验证采样管模拟采样,将拭子放入采样管内充分混匀。然后,取混匀的保存液将强阳性质控品按 2 - 3 倍梯度稀释至厂家声明其最低检测下限以下,每个浓度重复测定 10 次。实验结果表明,阴阳性需 100% 符合,这充分说明了采样管与该快检实验室的适配性良好,能够准确地采集和保存样本,确保检测结果的准确性。




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