【盛合瑞生物】小鼠结肠类器官培养图鉴2.0

文摘   2024-12-04 17:00   江苏  





导语

2011年,Sato等人发表的第一个研究方案描述了从小鼠肠组织分离出的完整的肠隐窝以及对它们随后的培养,以形成类器官。这项研究工作表明,从解离肠隐窝、通过流式挑选所获得的单一Lgr5+肠道干细胞,是有可能生成能肠类器官的。该小鼠小肠培养体系被建立后,经过调整,可用于从来自小鼠结肠隐窝和单个肠干细胞生成类器官。



小鼠结肠类器官完全培养基

盛合瑞生物

货号:MCCM-100

该培养基是一款用于建立和维持小鼠结肠ASC来源结肠类器官的完全培养基。生长在该完全培养基中的小鼠结肠类器官主要由结肠干细胞、结肠祖细胞、结肠吸收细胞、杯状细胞和少量肠内分泌细胞组成。



小鼠结肠类器官的生长过程


小鼠结肠类器官原代培养

小鼠结肠类器官原代(P0)培养生长过程示例:

A.小鼠结肠组织消化后可见隐窝。

B.盛合瑞生物小鼠结肠类器官完全培养基培养的第0代(P0)小鼠结肠类器官,在培养的第0天(D0)进行成像。

C.PO小鼠结肠类器官在D3进行成像。

D.P0小鼠结肠类器官在D5进行成像。

比例尺:100μm



小鼠结肠类器官传代培养

小鼠结肠类器官首次传代后(P1代)生长过程示例:

A.盛合瑞生物小鼠结肠类器官完全培养基培养的第1代(P1)小鼠结肠类器官,在培养的第0天(D0)进行成像。

B.P1小鼠结肠类器官在D3进行成像,可观察到囊泡明显增大

C.P1小鼠结肠类器官在D5进行成像,可观察到类器官呈现囊泡壁增厚、出芽等多种状态

D.冻存的P1小鼠结肠类器官复苏后的第1代小鼠结肠类器官明场图。

比例尺:100μm


小鼠结肠类器官的鉴定

小鼠结肠类器官免疫荧光染色:

A.小鼠结肠类器官免疫荧光染色结果显示肠上皮细胞骨架标志物(F-actin,绿色)杯状细胞标志物(Muc2,红色)以及细胞核标志物(DAPI,蓝色)

B.小鼠类器官免疫荧光染色结果显示肠内分泌细胞标志物(CHGA,绿色)肠上皮细胞标志物(E-cad,红色)以及细胞核标志物(DAPI,蓝色)

C.小鼠结肠类器官免疫荧光染色结果显示潘氏细胞标志物(Lyz,绿色)肠上皮细胞标志物(E-cad,红色)以及细胞核标志物(DAPI,蓝色)

D.小鼠结肠类器官免疫荧光染色结果显示细胞增殖标志物(Ki67,绿色)肠上皮细胞标志物(E-cad,红色)以及细胞核标志物(DAPI,蓝色)

比例尺:100μm


以上则是本期分享的小鼠结肠类器官培养图鉴内容,有任何问题或指正,欢迎后台私信或咨询!


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