【盛合瑞生物】小鼠气道上皮类器官培养图鉴2.0

文摘   2024-12-05 17:00   江苏  





导语

气管类器官主要由气管、气道基底细胞、肺泡、人诱导多能干细胞和胚肺细胞构建而成,具有三维结构。因其能够再现分化的气道上皮的表型和功能特性,故成为研究气管稳态、疾病机制、流行性病毒传播及病毒互作机制的理想体外模型。同时,气管类器官可用于高通量病毒药物筛选,并有助于填补病毒感染模型领域的空白。



小鼠气道上皮类器官完全培养基

盛合瑞生物

货号:MACM-100/500

该培养基是一款用于建立和维持源自小鼠气道干细胞的气道上皮类器官的商品化培养基。生长在该完全培养基中的小鼠气道上皮类器官主要由基底细胞、杯状细胞、纤毛细胞和少量神经内分泌细胞组成。



小鼠气道上皮类器官的生长过程


小鼠气道上皮类器官原代培养

小鼠气道上皮类器官原代(P0)培养生长过程示例:

A.小鼠气道组织消化后明场图。

B.盛合瑞生物小鼠气道上皮类器官完全培养基培养的第0代(P0)小鼠气道上皮类器官,在培养的第0天(D0)进行成像。

C.P0小鼠气道上皮类器官在D2进行成像,可观察到闭合囊泡。

D.P0小鼠气道上皮类器官在D5进行成像,可观察到囊泡直径明显增大。

比例尺:100μm



小鼠气道上皮类器官传代培养

小鼠气道上皮类器官首次传代后(P1代)生长过程示例:

A.盛合瑞生物小鼠气道上皮类器官完全培养基培养的第1代(P1)小鼠气道上皮类器官,在培养的第0天(D0)进行成像。

B.PI小鼠气道上皮类器官在D1进行成像,可观察到明显的囊泡结构。

C.P1小鼠气道上皮类器官在D6进行成像,可观察到囊泡增大且状态较好,可再次传代。

D.冻存的P1小鼠气道上皮类器官复苏后的第1代小鼠气道上皮类器官明场图。

比例尺:100μm



小鼠气道上皮类器官鉴定


小鼠气道上皮类器官HE染色

小鼠气道上皮类器官HE染色:

类器官中央空腔,具有极化、分层的气道上皮结构,其中含有基底细胞、分泌细胞和纤毛细胞等。

比例尺:100μm


小鼠气道上皮类器官HE染色


0小时

12小时

DMSO对照

Forskolin诱导


小鼠气道上皮类器官的Forskolin膨胀实验:

A.与DMSO对照组相比,Forskolin处理小鼠气道上皮类器官后,类器官明显膨胀。

B.统计分析显示两组差异具有显著性(n=3)。

比例尺:200μm

注:Degree of Swelling以相对于初始点(0小时)的类器官表面积增加的百分比来衡量。


小鼠气道上皮类器官免疫荧光染色

小鼠气道上皮类器官免疫荧光染色:

A-B.小鼠气道上皮类器官免疫荧光染色结果显示基底细胞标志物(CK5,红色)、纤毛细胞标志物(Acetyl-α-Tubulin,绿色)以及细胞核标志物(DAPI,蓝色)。可见类器官外缘为基底细胞,纤毛细胞靠向中央空腔。

比例尺:100μm


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