作者：陶雪红
单位：广西壮族自治区柳州市鹿寨县中医医院
ABO血型正确鉴定是保障临床输血的关键，临床上采用正反定型，正定型是用定型试剂和被检红细胞反应鉴定出ABO血型，反定型是用被检者血清和已知血型的试剂红细胞反应鉴定出ABO血型，正反定型结果可以互相参照，确保定型的准确性。通常引起血型正反不符的原因包括基因突变、糖基转移酶数量与活性改变等[1]，以及患者年龄、疾病、遗传、药物、自身冷凝集干扰等诸多因素。当正反定型不符时，应采用多种方法进行鉴定，提高亚型检出率和疑难血型鉴定的准确率[2]。临床检验工作中，冷凝集素干扰导致正反定型不一致较为常见，检验人员可根据异常检验结果，判断是否为冷凝集干扰引起。
患者，男，71岁。6月21日因“解黑便6天”由120急诊接回收治入院。
急性消化道出血，中度贫血。患者精神不佳、形体消瘦，口唇甲床苍白，双下肢轻度水肿，否认输血史、肝炎史等。入院查血型。
ABO血型鉴定严格按照临床检验操作规程[3]进行。结果：正定型抗A:0，抗B：4+，RhD:4+，B型；反定型：Ac：3+，Bc:2+，Oc:2+，反定型结果判读困难，提示患者ABO血型正反不符。
查阅患者病例资料，患者21日下午补充做葡萄糖-6-磷酸酶检验时发现取20ul标本置于1ml蒸馏水中混匀放置，红细胞聚集于试管底部难以溶解。将保存于2-8℃的血常规样本取出，轻轻颠倒混匀，样本外观呈果冻状，室温放置20min果冻状不能完全散开。将标本置于37℃水浴箱内预温30分钟后，凝集消失。患者的血常规、生化常规等异常结果提示，该患者标本存在冷凝集干扰。本例ABO血型鉴定正反不符为冷凝集素干扰引起。
【处理方案】处理冷凝集素干扰导致的ABO血型鉴定困难的关键在于排除冷凝集干扰，即通过适当的处理方法，获得不含冷凝集素的血浆，以及获得不含冷凝集素的红细胞。
一般来说，轻度冷凝集（即标本呈细沙、颗粒状）可通过水浴法消除：将样本本置于37℃水浴30分钟，冷凝集干扰消除，同时将实验所需的耗材如试管、生理盐水、标准红细胞等，均温浴至37℃，实验操作在37℃条件下进行，冷凝集消除后，即可获得正确的血型鉴定结果。
如37℃水浴30分钟以上，冷凝集干扰无法消除（果冻状冷凝集样本，即严重冷凝集样本），则需进行吸收放散实验，步骤如下：
1、吸收实验（获得不含冷凝集素的血浆）：将样本置于4℃冰箱1-2小时，中途颠倒混匀几次，使血浆中的冷凝集素被完全吸收至红细胞表面，然后3000r/min，5min离心处理，分离血浆备用。
2、放散实验（获取不含冷凝激素的红细胞）：
（1）实验所需的耗材如试管、生理盐水置于37℃水浴箱内预温30分钟备用；
（2）样本3000r/min，5min，离心处理，在样本管上记录血浆的量所在液面位置做好标记，将上层血浆尽可能全部吸出置于一个干净试管内；
（3）加等量温浴好的生理盐水至标记处，颠倒混匀，
（4）离心，将上层生理盐水去除，重复步骤（2），反复洗涤3-5次，直至获得不含冷凝集素的红细胞。
最后，将吸收实验获得的不含冷凝激素的血浆及放散实验获得的不含冷凝集素的红细胞进行红细胞ABO血型鉴定，获得正确血型结果。
【血型鉴定结果】
注：微柱凝胶法自身对照直接检验：3+，37℃ 30min：0。
血常规结果
生化常规结果
血型鉴定正反不符
吸收放散实验后，获得正确血型结果
疑难血型通常是指一种血型难以鉴定或者判定的现象。当出现ABO血型鉴定正反不符判定为疑难血型时，我们可以：（1）除外仪器设备、试剂、人员、标本原因；（2）查阅患者临床病历资料和实验室检验资料。
患者异常的检验结果往往可以提供线索，有助于分析找正反不符的原因[4]，对正反结果不符的原因作出合理解释，从而进行相应的处理，获得正确的血型鉴定结果，为临床输血保驾护航。我们在临床检验工作中，应注意检验与临床相结合，注意异常检验结果提供的隐藏信息，提升检验诊断水平，真正做到为患者服务。
温运明 鹿寨县中医医院医学检验科主任 副主任技师
临床输血检验是保障输血治疗的关键，正确识别并处理疑难血型，保障交叉配血的及时性和准确性，保障输血治疗的安全性。本文是一例通过分析检验异常结果，提示本例血型鉴定困难由冷凝集素干扰引起，并按照正确的操作流程，排除冷凝集素的干扰，最终获得正确的血型鉴定结果，体现了检验结果在ABO疑难血型鉴定中的重要价值。
【参考文献】
[1]雷航,蔡晓红,王钰箐,等.AB_x亚型相关的B型糖基转移酶突变p.R180C 的酶动力学研究[J].中国输血杂志,2020,33(11):1140-1143.
[2]周宇,牛长春,廖璞,等.1例ABO疑难血型的鉴定与临床疑难输血探讨[J].检验医学与临床,2024,21(03):426-429.
[3] 尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4 版. 北京:人民卫生出版社,2015:118-119
[4].邢昕,许金鹏,王爱华.检验结果在ABO疑难血型鉴定中的作用[J].检验医学与临床,2021,18(05):713-716.
