2018年，美国注射剂协会（PDA）发布的81号技术报告，细胞治疗产品的控制策略，主要介绍了质量源于设计（QbD）的理念在细胞治疗和基因治疗产品中的应用。近年来，细胞治疗和基因治疗类产品突飞猛进。EMA和FDA也颁布了许多法规来指导此类产品及其工艺的开发，目的是提高产品的安全性和有效性。在这些法规中，极大的肯定了QbD理念以及相关的基于风险的方法在其工艺开发中的应用。与 A-Mab案例研究（QbD的抗体应用）和A-Vax案例研究（QbD的疫苗应用）类似，该技术报告也详细描述了一个细胞治疗产品的案例，即A-CeT，一个基于体外扩增自体软骨细胞来治疗膝盖软骨缺陷疾病的细胞治疗产品。![]()
A-CeT是从收集软骨活细胞组织开始，将胶原酶添加至切碎的组织中来释放软骨细胞，然后将软骨细胞分离，洗涤并接种至培养瓶中进行细胞扩增，然后使用胰蛋白酶进行剥离，最后洗涤并离心，获取的沉淀经过重悬制备成细胞产品原液。
细胞治疗产品的QbD思路
关于质量源于设计（QbD）理念的步骤及其工具，在星辰公众号的其他文章中均有介绍，可参考相关的文章以及A-Mab学习笔记系列。目标产品概况（TPP）是制定控制策略的起点，也是定义目标产品质量概况（QTPP）和后续关键质量属性（CQA）评估的基础。考虑TPP时要考虑跟产品相关的所有情况，包括初始的材料和最终的产品，以及临床使用现场可能需要的工具或者培训等。![]()
目标产品质量概况（QTPP）
一旦就TPP达成一致，就可以着手制定QTPP。QTPP是指理论上可以达到的，并将产品安全性和有效性考虑在内的关于产品质量特性的前瞻性概述。TPP为战略构想，则QTPP为战术实施。QTPP的典型内容包括（1）药物产品设计方面，即定义了药品物理性描述的一些属性；（2）药物产品的质量属性，即定义了与药物产品安全性和有效性相关的，包括鉴别，含量，纯度，效价等相关的质量属性。![]()
关键质量属性是在QTPP的基础上，通过质量风险管理的工具筛选出的对产品安全性和有效性有影响的质量属性。识别CQA是生产工艺开发必不可缺少的一部分。通常用于CQA评估的质量风险管理工具包括风险排序，预先危害分析，风险排序及分级等。本案例中的CQA评估使用的为风险排序的工具。需要在两个维度上进行评估，一个是严重性（即该属性对产品安全性和有效性产生的影响程度），另一个是不确定性（即是否有文献，资料或者数据来支持该属性的影响）。严重性与不确定性的乘积为该质量属性的总体关键度或者风险分数。需要注意的是，没有一种方法可以定义哪种程度为关键或者非关键质量属性，风险是由组织决定的，具体取决于组织愿意接受的风险。![]()
![]()
关键工艺参数（CPP）
确定了CQA之后，将对生产工艺进行全面评估，以确定该生产工艺的工艺步骤和工艺参数。其中对CQA有直接影响的工艺参数为关键工艺参数（CPP）。在A-CeT案例研究中，首先描述了工艺流程图，以及特定工艺步骤的流程图，采用了IPO流程图方法。![]()
对CPP的初步筛选则采用了因果效应矩阵（C&E）和FMEA（失败模式与效应分析）的综合方法。
首先根据IPO图列出的工艺参数与工艺性能属性和质量属性，评估每一个工艺参数对各个属性的影响，有显著性影响用红色代表，潜在影响的用黄色代表，没有影响的用绿色表示。如下图所示。![]()
在后续的FMEA分析中，该C&E的输出即作为FMEA评估的严重度分数，其中红色定义为10分，黄色定义为5分，绿色定义为1分。同时，定义了发生频率和可探测度的打分标准，进而可以对所有的工艺参数进行FMEA评估。
![]()
最终的风险顺序数较高的工艺参数将列为潜在CPP，并进行进一步的实验研究。与A-Mab和A-Vax不同的是，在A-CeT案例研究中考虑了关键物料属性（CMA）的评估。CPP和CMA是影响工艺变异性的两个主要风险来源，对起始原材料，原材料和辅料，以及消耗品，组件和容器的物料属性进行评估，有助于控制生产工艺过程的变异性。其中，对CQA有关键性影响的物料属性定义为CMA。CMA的评估与CPP非常类似，同样采用了C&E矩阵和FMEA分析的综合方法，对工艺过程中使用的DMEM培养基，胶原酶，胰蛋白酶，血清和PBS等进行了风险评估。![]()
A-CeT产品的控制策略与A-Mab和A-Vax没有太多差异，都是包括如下的工艺参数控制，原材料控制，工序控制和分析检测控制。PDA TR81资料对控制策略的描述要更加详细，对每一部分控制的具体细节也有赘述，这是要比A-Mab和A-Vax更加有学习性的地方。![]()
![]()
总结
PDA TR81举例的A-CeT案例研究，虽然内容要比A-Mab和A-Vax简单，但是麻雀虽小，五脏俱全。QbD的研究思路在A-CeT有充分的体现，尤其是关键物料属性和控制策略部分要讲述的更加的详细。本学习笔记旨在大家了解该报告的核心内容，具体内容可参考PDA TR81原文！
本次领读的视频回放，可登陆“星辰纯视界”小程序平台观看。
![]()
星辰视界系统学习内容
星辰纯视界小程序平台
平台包含丰富的学习资源，包括专题讨论、法规学习、文献阅读、资料下载等！![]()
