文献阅读
本篇文献的主要研究发现细胞培养温度对抗体电荷变体分布具有显著影响，尤其是酸性电荷变体和赖氨酸变体。
首先研究了细胞在不同温度下的生长情况。
结果显示，在批次培养中，亚生理温度下的细胞密度和活力均高于 37℃ 下的细胞密度和活力（图 1a、b）。然而，在补料分批培养中，不同培养温度下的细胞生长和细胞活力没有发现显著差异（图1c，d）。
对于表达滴度，在批次培养中，降低培养温度可显著增加 mAb 浓度，因为降低培养温度对 IVCC 的有利影响超过了其对 qmAb 的不利影响（表 1）。相反，在补料分批培养中，由于 qmAb 迅速下降，mAb 浓度随着培养温度的降低而降低。
研究培养温度变化对电荷变异变化的影响。
结果分析，在批次培养和补料分批培养中，无论培养温度如何，整个培养过程中酸性变体水平都会增加。较高的温度导致较高水平的酸性变体（图2a、b）。降低培养温度导致批次培养中碱性变体水平较高（图2c），并且在补料分批培养的后期过程中也发现了相同的现象（图2d）。在分批和补料分批培养中，无论培养温度如何，整个培养过程中主峰分子水平均下降（图2e，f），这与上述酸性和碱性变体水平增加的趋势一致。
此外，pH 值是与 mAb 质量相关的另一个关键工艺参数。在每个采样时间监测培养工艺中的 pH 值，并且在不同温度之间没有发现显著差异（数据未显示），这表明培养 pH 值不应是不同 mAb 电荷变体分布曲线的原因。
进一步研究了不同温度下的赖氨酸变异水平。
结果显示，在批次培养和补料分批培养中，与 37°C 相比，亚生理温度导致赖氨酸变体水平更高。分析主要原因是降低培养温度显著降低了羧肽酶B的转录水平。
最后，作者讲到温度变化的时间点也对细胞培养物中的细胞生长、mAb 产生和电荷变体分布产生显著影响，特别是在补料分批培养中（数据未显示）。温度变化较晚的时间点导致单克隆抗体浓度较低，而酸性变异体水平较低，主峰水平较高。在本研究中，分批补料培养中的培养温度在第 8 天发生变化，因为这是平衡 mAb 浓度和电荷变体分布的最佳时间。
电荷变体是 mAb 生产过程中最重要的异质性之一。降低培养温度传统上用于调节细胞生长和生产力，对其在 mAb 电荷变体分布中的潜在作用进行了研究。在批次和补料分批培养中，亚生理温度下的培养降低了 mAb 酸性变体的水平，但增加了碱性变体的水平。同时，降低培养温度会增加赖氨酸变体水平，这可能是碱性变体水平增加的主要原因，部分归因于羧肽酶B转录水平的降低。总而言之，培养温度对 mAb 电荷变体分布有显著影响，尤其是酸性变体和赖氨酸变体。
星辰纯视界小程序平台
