各种显色剂及其配制方法
碘:
不饱和或者芳香族化合物
配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶
紫外灯:
含共厄基团的化合物,芳香化合物高锰酸钾
含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月磷钼酸(PMA)
广谱
配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇茚三酮
氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
醛和酮
配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇硫酸铈:
生物碱
配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁
苯酚类化合物
配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇
香草醛(香兰素)
广谱
配制方法:15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸
高锰酸钾
含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月
溴甲酚绿
羧酸,pKa<=5.0
配制方法:在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈
广谱
配制方法:235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法:135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)
TLC监测方法的原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。
是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。
当固定相为硅胶时,硅胶表面的硅醇基(呈弱酸性)可与极性基团形成氢键而表现其吸附性能,由于不同组分的极性基团与硅醇基形成氢键的能力不同, 从而实现分离。极性越强的组分K值(分配系数)大,移动速度慢,R值就小;反之,极性较弱的组分K值小,移动速度快,则R值就大。若组分固定,则展开剂极性越强,K值越小,即极性越强的展开剂的洗脱能力越强,推进组分向前移动的速度越快
俗称:点板
TLC方法监测的优点
①分离能力强,斑点集中,结果直观。
②灵敏度高,几微克,甚至几十纳克的物质也
能检出
③展开时间短,一般只需十至几十分钟。一次
可以同时展开多个试样
④试样预处理简单,对被分离物质性质没有限
制。
⑤上样量比较大,可点成点,也可点成条状
⑥仪器简单,操作方便
TLC方法监测反应的步骤
1:准备TLC板。可直接购买铺好的板,也可以自己使用硅胶制备。使用TLC板时要格外注意防尘,硅胶颗粒较小100-400目,会被人体吸到体内无法排除,对身体造成伤害。
2:画点或线。一个板上至少要有三个点,分别为原料,反应液,原料与反应液的混合点。在板上用铅笔点三个点,或者画一条线,这是点样的起始位置。
3:准备点样。点样毛细管直径一般为0.3mm或0.5mm。0.3mm的毛细管一般用于点样有机相,0.5mm的毛细管一般用于点样水相。样品的浓度不宜过低或者过低,过高会造成超载,化合物在板上不宜分离;样品浓度过低,则会造成在板上看不到。样品浓度一般为反应液(1g/10ml),经过后处理,稀释5~10倍,点样为宜。
4:爬板。根据具体化合物的极性,来选择展开剂,常用的小极性配比有乙酸乙酯和石油醚或者乙酸乙酯和正庚烷,大极性有乙酸乙酯和甲醇,二氯甲烷和甲醇,个别极性超大的化合物,可以选择异丙醇和水的体系。
5:检测。爬板结束后,就是检测了,在紫外分析仪上直接用肉眼观测即可。典型的板样如图所示。可以明显的看到不同物质。点三个点前面提到了,点五个点,是加上了产品的标样,通过点板可以明显的分辨出反应原料的剩余,产品的生产,及中间产物的生产。
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