最新!华中农大/大连工大陈翊平教授团队顶级期刊ACS Nano发表重要成果!

学术   2024-11-04 07:44   中国香港  

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基于引物交换反应介导的葡萄簇状荧光聚苯乙烯点的免扩增数字测定法可检测多种病原菌

导  读

2024年11月1日,华中农业大学/大连工业大学陈翊平教授团队在国际Top期刊《ACS Nano》(Q1,IF=15.8)发表题为“An Amplification-Free Digital Assay Based on Primer Exchange Reaction-Mediated Botryoidal-Like Fluorescent Polystyrene Dots to Detect Multiple Pathogenic Bacteria”的研究性论文。该文通讯作者为华中农业大学/大连工业大学陈翊平教授。该文第一通讯单位为华中农业大学。


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成果介绍

  • 病原菌的多重超灵敏检测至关重要,但仍是一项挑战。该研究团队介绍了一种利用葡萄簇状荧光聚苯乙烯点(PS-dots)对病原菌进行多重和靶向DNA-无扩增检测的数字检测方法,PS-dots 首先是通过引物交换反应链与聚苯乙烯纳米球之间的杂交反应制备而成,而聚苯乙烯纳米球则包裹了用于信号预扩增的聚合物点。


  • 病原菌的 DNA 通过Argonaute(Ago)介导的多重精确裂解反应进行裂解,获得的靶向序列通过杂交反应桥接在磁珠(MB)和葡萄簇状 PS 点上,荧光 MB-葡萄簇状 PS 点复合物被用作基于颜色和大小的数字探针,进行数字编码。人工智能荧光微球计数算法用于识别和计数荧光 MB,以进行数字读出。


  • 这种数字检测方法结合了超亮的葡萄簇状PS 点和 丁酸梭菌Ago 的精准酶裂解特性,在 1.5 小时内实现了对三种病原菌的同时检测,线性范围从102到106 CFU/mL,且无需靶向 DNA 扩增。这种数字检测方法还被应用于水产和临床样本的检测,准确率达到 98%,为下一代病原菌分析的多重数字平台提供了途径。


图文赏析

Abstract

Figure 1. Overview of the digital assay for multiplexed detection of pathogens.

Figure2. Digital assay for the detection of three pathogens in real samples.

原文链接

https://doi.org/10.1021/acsnano.4c09069

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