形态似AML,最终诊断ALL!这些“鉴别点”你一定要注意

健康   2024-09-30 15:02   山东  


作者:李珍珠[1]  徐晓兰[2]
单位:[1]南雄市人民医院检验科  [2]南方医科大学南方医院血液科


急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种因起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生和聚集,从而抑制正常造血,导致贫血、血小板减少和中性粒细胞减少的恶性肿瘤性疾病。


随着血液学诊断技术的发展,目前检验科已经不会把一种单一方法(如形态学、免疫表型或遗传学)作为诊断的金标准,需将这几种方法结合起来进行诊断。


白血病是15岁以下儿童最常见的恶性肿瘤[1],其中急性淋巴细胞白血病是儿童最常见的白血病类型,其发病率是急性髓系白血病(AML)的5倍[2],临床常表现为血小板减少和/或贫血和/或中性粒细胞减少,白细胞计数不定,肝脾淋巴结肿大常见,骨关节痛可非常突出。对于有发热,治疗无效且骨痛的患儿,应警惕有无恶性血液病的可能。


ALL具有高度恶性和侵袭性,很多患者在短时间内便可快速进展。然而,因我国目前存在基层检验人员及临床医师水平受限、地区经济水平发展不平衡等因素,未能完善对病人的相关检查(如细胞形态学、流式细胞学、遗传学和病理等),极易出现对患者漏诊、误诊的情况,影响预后。


本案例的骨髓片中有这样一群细胞:此类细胞胞体大小不等,大细胞为主,类圆性,边缘规整或毛刺状,核大浆少或中等,胞浆蓝色,胞内可见红色颗粒,胞核圆形,可见核切迹及核溢出,核质细颗粒状,核仁0-2个大而清楚,形似髓系细胞却偏偏不是髓系细胞。


现剖析这例初步判断为急性髓系白血病的急性淋巴细胞白血病的临床特征、形态学特点、诊断标准,为细胞形态学工作者们提供帮助。



案例经过


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简要病史

患者男,15岁,半月余前无明显诱因下出现腰痛,活动明显受限。外院查血常规及凝血,大致正常;免疫球蛋白Ig G 1981mg/dl、补体 189.34mg/dl;外院MRI提示:胸腰骶椎椎体及附件大多异常信号影。外院就诊期间出现发热,予退热等治疗(具体不详),此后仍间断发热。

患者为进一步治疗就诊于我院门诊,门诊查胸腰椎增强MIR:胸椎、腰椎及所及颈椎、骶椎椎体、部分附件、所及骨盆骨质广泛异常信号,我院门诊医生初步考虑血液病方面,为病人做了骨髓穿刺并收入院。


入院查体

体温 36.6℃、脉搏 122次/分、呼吸 20次/分、血压 145/78mmHg。胸骨压痛,腰椎活动受限,未触及肝脾肿大。


实验室检查


血常规:WBC 8.08×109/L、NEU 5.92×109/L、HGB 137g/L、PLT 286×109/L。

肝/肾功:TP 89.8g/L ↑、G 45.1g/L ↑、UA 485μmol/L ↑、CR 114μmol/L ↑、UREA 8.1mmol/L ↑。

心肌酶谱:LDH 572U/L ↑、HBDH 422U/L ↑。

凝血:PT 14.5s ↑、PT% 63.8% ↓、PT-INR 1.27 ↑、PT-R 1.24 ↑、Fbg 3.74g/L ↑。

离子:Cl 95.1mmol/L ↓。

感染指标:CRP 224.51mg/L ↑。

铁蛋白:1970.05ng/ml。


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上面一系列检查提示肝功、肾功受损,LDH、铁蛋白高提示肿瘤恶性程度高;血常规、凝血功能未见明显异常;免疫球蛋白阴性;PET-CT显示全身骨骼见广泛分布的骨质破坏,代谢弥漫性不同程度增高,考虑为血液系统恶性肿瘤侵犯全身骨髓(淋巴瘤可能性大),再次证实了临床医生的判断。

血片:偶见原幼细胞(但计数时未计算到)。外周血涂片:血常规未见明显异常。

 

外周血片×1000(瑞士染色)

骨髓细胞学检查:有核细胞增生极度活跃,原幼细胞占93%,粒系占4.5%,红系占1.0%,淋巴细胞占1.0%,巨核细胞及血小板正常。

骨髓片×1000(瑞氏染色)

骨髓片×1000(瑞氏染色)

骨髓片×1000(瑞氏染色)

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该类原始及幼稚细胞占93%,此类细胞胞体大小不等,大细胞为主,类圆性,边缘规整或毛刺状,核大浆少或中等,胞浆蓝色,胞内可见红色颗粒,胞核类圆形,可见核切迹及核溢出,核质细颗粒状,核仁0-2个大而清楚。单从形态上看,此类细胞胞体大小不一,以大细胞为主,核染色质细致,核“薄”,部分细胞核型不规则,胞浆中等,胞核类圆形,第一感觉是形态倾向于“急性非淋巴细胞白血病原幼稚细胞”。我们初步判断是急性非淋巴细胞白血病(AML)。

骨髓片×1000(POX染色)

骨髓片×1000(POX染色)

骨髓片×1000(PAS染色)

骨髓片×1000(PAS染色)

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然而,细胞化学染色显示原幼细胞呈髓过氧化物酶(MPO)阴性、过典雪夫酸反应(PAS)11%阳性率,积13分,以颗粒状及点珠状阳性为主。我们都知道,MPO染色是形态鉴别急淋与急非淋的常用手段,若阳性≥3%,多考虑急非淋,若阳性<3%,考虑急淋可能性大,当然也不排除急性髓系白血病微分化型、急性原始粒细胞或单核细胞白血病及急性巨核细胞白血病等,PAS染色阳性的原幼细胞呈颗粒状及点珠状阳性为主,例外骨髓片中易见涂抹细胞,皆指示ALL可能性大。

这时,流式免疫分型结果出来了,流式标本存在部分血稀,但仍然提示异常幼稚B淋巴细胞占13.4%,所以,流式检测结果为急性B淋巴细胞白血病(Pro-B-ALL)。


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流式免疫分型报告



案例分析




骨髓细胞形态倾向AML,细胞化学染色支持ALL,这时流式报告B-ALL,这个病人我们究竟该如何报骨髓结果呢?

现在我们梳理下,这个病人骨髓片上的原+幼稚细胞第一感觉形态上看起来像AML细胞,但细胞化学染色不太支持,且易见涂抹细胞,让我们推翻了第一感觉,倾向于ALL。

因为有些原始淋巴细胞因处于更早的未分化阶段,呈现的细胞特征不明显,形态上会和AML原幼细胞相似,这个时候我们最好结合免疫分型考虑。考虑到流式免疫分型结果指示B-ALL,骨髓报告我们报了“ALL可能性大”的诊断意见。

骨髓报告

随后,基因分型检查结果也出来了,E2A/HLF阳性(E2A基因断裂重排阳性细胞占84%)。到这里病人的诊断已经很明确了,就是一例伴E2A/HLF阳性的B-ALL。

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总结



 
本病例骨髓细胞形态和其他典型的B-ALL虽有不同,但临床表现、细胞化学染色特点还是相同的。对于该病例,仔细辨别二者,不难发现,虽然此类细胞体积比较大,且其染色质较平时所见的原始(幼稚)淋巴细胞细致,但病例骨髓报告诊断有两个突破口:1. 细胞化学染色和急性髓系白血病不相符、2. 易见涂抹细胞。两个点都倾向于ALL,这时,流式免疫分型也证实了是B-ALL。

所以,当我们形态检验者遇到骨髓形态学和细胞化学染色不相符的情况时,要从临床的诊断思路出发,考虑到形态方法学的局限性,充分结合现有的血液病诊断方法学(如流式免疫分型、基因遗传学等),为临床提供精准的诊断依据。

最后,由于伴E2A/HLF阳性的B-ALL临床罕见、预后差[3],我们形态检验者应加强对疾病的认识,但有些病例确实无法根据形态识别,比如文中病例,只有细胞形态与流式免疫分型、分子生物学相结合,并及时与临床沟通,才能更精准的诊断,减少遗漏与误判。

【参考文献】

[1] Hossain MJ,Xie L,McCahan SM.Characterization of pediatric acute lymphoblastic leukemia survival patterns by age at diagnosis.J Cancer Epidemiol,2014,2014:865979;

[2] Ward E,DeSantis C,Robbins A,et al.Childhood and adolescent cancer statistics,2014.CA Cancer J Clin,2014,64:83-103;

[3] 黎晓丹,李佩青,邓力.伴高钙血症的急性淋巴细胞白血病1例[DB/OL].中国临床案例成果数据库,2023(2023-02-01).

[4] 夏薇,临床血液学检验技术.华中:华中科技大学出版社,2022.2017-213,26-265.

[5] 黄斌伦,杨晓斌.血液学检验.第5版.北京:人民卫生出版社,2020.176:200.

[6] 高琴丽, 李健, 李梅, 等. E2A-HLF阳性急性淋巴细胞白血病2例报告并文献复习[J]. 中国小儿血液与肿瘤杂志, 2019, 24(1):3.

[7] 姜博航.以高钙血症起病的儿童急性淋巴细胞白血病诊治现状[J].中国小儿血液与肿瘤杂志,2020.

  

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编辑:yeah  审校:小冉

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